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PNA BIO INC致力于为基础研究和应用领域的实验室提供的研究产品和服务。
PNA Bio提供PNA（Peptide Nucleic Acid）产品，包括定制寡核苷酸，FISH探针，miRNA抑制剂，PNA钳夹探针和Fmoc单体。HPLC纯化后，它们与MS / MS数据一起提供> 95％的纯度。PNA产品由Panagene制造。
PNA Bio还提供工程化核酸酶服务，包括CRISPR / Cas9核酸酶（RGEN）合成，验证和Cas9蛋白以及敲除和敲入细胞系服务。
Cas9蛋白与指导RNA复合，为CRISPR / Cas9技术提供了优于质粒或mRNA转染的益处。大的好处是，您可以制备准备在体内工作的RNP复合物。Cas9蛋白寿命短（细胞半衰期约为24小时），因此可以大限度地减少脱靶效应和镶嵌现象。您还可以通过简单的切割试验轻松测试体外指导RNA的活性。此外，Cas9蛋白非常稳定，与mRNA相比，活性确认更容易。后，它在更广泛的生物体中是活跃的，例如线虫，昆虫，植物和非典型的模型系统，因为它不需要转录或翻译。
由PNA Bio提供的Cas9蛋白与NLS缀合，并且它是注射/转染准备形式。
Cy3-Cas9可以很容易地富集用CRISPR / Cas9复合物转染的细胞。
体外切割测定
将PCR产物与不同量的Cas9蛋白一起温育并在凝胶上运行。体外切割测定是检查sgRNA活性的简单方法。
转染RNP复合物
通过电穿孔（Neon）或脂质转染胺（LF2000）将sgRNA和不同量Cas9蛋白的RNP复合物转染到NIH3T3细胞中。
注射RNP复合物
对于小鼠胚胎注射，将60ng / ul Cas9蛋白的RNP复合物和两种sgRNA各15ng / ul注射到小鼠胚胎中。从幼仔准备尾部DNA并进行T7E1测定.Grey代表WT，绿色代表大的缺失（＃2,3,4,8），红色代表小/ del（＃5,6,7），蓝色代表纯合子小/ in（＃9,10）。
Cas9蛋白
· 来自化脓性链球菌的 Cas9蛋白与NLS
· 注射，转染准备好
· 通过体外切割测定，电穿孔（作为RNP复合物）和
每批次的小鼠胚胎注射验证活性
· 标准浓度（CP01，重组至1 mg / ml）：20 ug，50 ug或200 ug（50 ug x 4）
· 高浓度（CP02和CP03，重组至5 mg / ml）：250 ug（CP02）或1 mg（CP03,250 ug x 4）
· 包装：CP01为20 ug或50 ug，CP02 / CP03为250 ug
· 建议使用CP01进行显微注射，建议使用CP02 / CP03进行电穿孔
· 也可用：D10A Nickase（CN01）和D10A / H840A dCas9（CD01）蛋白
液体形式的Cas9蛋白
· 可用1 mg / ml或5 mg / ml
· CP04-100：1mg / ml（6μM），20μg×5管
· CP04-500：5mg / ml（30μM），100μg×5管
Nickase和dCas9蛋白
· D10A Cas9 Nickase蛋白与来自化脓性链球菌的 NLS （CN01和CN02）
· D10A / H840A Cas9裂解死蛋白与来自化脓性链球菌的 NLS （CD01和CD02）
· 以50μg大小提供，重构为1mg / ml（CN01 / CD01）或250μg大小，重构为5mg / ml（CN02 / CD02）。
Cy3-Cas9和Cy3-dCas9蛋白
· Cy3标记Cas9蛋白与NLS（CP06），以实现转染细胞的分选和可视化
· 通过共聚焦显微镜检测荧光
· 通过体外切割测定和细胞转染确认活性
· 可提供浓度为5 mg / ml的50 ug（CP06-50）或200 ug（CP06-200）
· 还可获得Cy3标记的dCas9蛋白（CD07）
通过电穿孔进入细胞，然后进行T7E1测定，证实Cy3-Cas9蛋白的活性。通过共聚焦显微镜确认荧光。
产品 | 描述 | 可用尺寸 |
CP01 | 含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; | 20微克（120 pmol / 6 uM x 20 ul） |
CP02 | 含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; | 250微克（1530 pmol / 30 uM x 50 ul） |
CP03 | 含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; | 1毫克（250微克x 4） |
CP04-100 | 含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; | 100微克（20微克x 5） |
CP04-500 | 含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; | 500微克（100微克x 5） |
CN01切口 | 用NLS准备Cas9 D10A Nickase蛋白质; 重组至1 mg / ml（6 uM） | 50微克 |
CN02切口 | 用NLS准备Cas9 D10A Nickase蛋白质; 重组至5 mg / ml（30 uM） | 250微克 |
CD01 | 含有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; | 50微克 |
CD02 | 含有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; | 250微克 |
CP06 | Cy3标记的Cas9蛋白与NLS; | 50微克 |
CD07 | Cy3标记的Cas9死蛋白与NLS; | 50微克 |
Pnabio 部分产品列表
货号 | 品名 | 规格 | 品牌 |
CP01-20 | Reconstitutes to 1 mg/ml, 120 pmol (6 uM x 20 ul) | 20 ug | pnabio |
CP01-50 | Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul) | 50 ug | pnabio |
CP01-200 | Reconstitutes to 1 mg/ml, 1200 pmol (6 uM x 200 ul) | 200 ug (50 ug x 4) | pnabio |
CP02 | Reconstitutes to 5 mg/ml, 1530 pmol (30 uM x 50 ul) | 250 ug | pnabio |
CP03 | Reconstitutes to 5 mg/ml, 6000 pmol (30 uM x 50 ul x 4 tubes) | 1 mg (250 ug x 4) | pnabio |
CP04-100 | Liquid form 1 mg/ml, 600 pmol (6 uM x 20 ul x 5 tubes) | 100 ug (20 ug x 5) | pnabio |
CP04-500 | Liquid form 5 mg/ml, 3000 pmol (30 uM x 20 ul x 5 tubes) | 500 ug (100 ug x 5) | pnabio |
CN01 | Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul) | 50 ug | pnabio |
CN02 | Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul) | 250 ug | pnabio |
CD01 | Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul) | 50 ug | pnabio |
CD02 | Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul) | 250 ug | pnabio |
F1001 | C-rich telomere probe, FAM labeled | 5 nmole | pnabio |
F1002 | C-rich telomere probe, Cy3 labeled | 5 nmole | pnabio |
F1003 | C-rich telomere probe, Cy5 labeled | 5 nmole | pnabio |
F1004 | C-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled | 5 nmole | pnabio |
F1005 | G-rich telomere probe, FAM labeled | 5 nmole | pnabio |
F1006 | G-rich telomere probe, Cy3 labeled | 5 nmole | pnabio |
F1007 | G-rich telomere probe, Cy5 labeled | 5 nmole | pnabio |
F1008 | G-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled | 5 nmole | pnabio |
F1009 | C-rich telomere probe, FITC labeled | 5 nmole | pnabio |
F1010 | G-rich telomere probe, FITC labeled | 5 nmole | pnabio |
F1013 | C-rich telomere probe, Alexa Fluor 647 labeled | 5 nmole | pnabio |
F1014 | G-rich telomere probe, Alexa Fluor 647 labeled | 5 nmole | pnabio |
F1020 | TelC probe for arthropods, Alexa Fluor 488 labeled | 5 nmole | pnabio |
F2001 | C-rich telomere probe, Biotin labeled | 5 nmole | pnabio |
F3001 | Centromere probe, FAM labeled | 5 nmole | pnabio |
F3002 | Centromere probe, Cy3 labeled | 5 nmole | pnabio |
F3005 | Centromere probe, Cy5 labeled | 5 nmole | pnabio |
F3004 | Centromere probe, Alexa Fluor 488 labeled | 5 nmole | pnabio |
F3008 | Centromere probe, Biotin labeled | 5 nmole | pnabio |
F3003 | Centromere probe, Cy3 labeled | 5 nmole | pnabio |
F3006 | Centromere probe, FAM labeled | 5 nmole | pnabio |
F5001 | CAG repeats, Cy3 labeled | 5 nmole | pnabio |
G2001-3 | A set of 4 PNA oligos against human globin, | 3 nmole | pnabio |
G2001-10 | A set of 4 PNA oligos against human globin | 10 nmole | pnabio |
MP01-25 | ggcaagtgttcttcgga | 25 nmole | pnabio |
MP01-50 | ggcaagtgttcttcgga | 50 nmole | pnabio |
PP01-25 | ggctcaaccctggacag | 25 nmole | pnabio |
PP01-50 | ggctcaaccctggacag | 50 nmole | pnabio |
RV01 | Surrogate reporter vector with GFP for FACS | 5 ug | pnabio |
RV02 | Surrogate reporter vector with GFP and H2KK for MACS | 5 ug | pnabio |
RV03 | Surrogate reporter vector with GFP and Hygromycin-R | 5 ug | pnabio |
CV01 | Cas9 co-transfection vector (CMV promoter) | 5 ug | pnabio |
CV02 | Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (CMV promoter) | 5 ug | pnabio |
CV03 | Cas9, RFP, puromycin R expression vector (CMV promoter) | 5 ug | pnabio |
CV11 | Cas9 co-expression vector (EF1a promoter) | 5 ug | pnabio |
CV12 | Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (EF1a promoter) | 5 ug | pnabio |
CV13 | Cas9, RFP, and Puromycin R expression vector (EF1a promoter) | 5 ug | pnabio |
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