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上海起发现货genebridges K003说明书
点击次数:123 发布时间:2019-09-25

Gene Bridges拥有Red / ET重组的专有权利,并被允许颁发该技术的许可证并提供重组服务。任何其他学术或商业组织均无权提供重组服务。

 

与Red / ET重组可在任何选定位置克隆,亚克隆和修饰DNA。它可以精确改造任何大小的DNA分子,包括很大的分子,例如BAC或大肠杆菌染色体。

 

Red / ET重组增加了CRISPR / Cas9扩展基因组研究的能力。作为欧盟资助的项目AgedBrainSYSBIO的一部分,我们开发了一种新的策略来使大型基因组区域人性化。通过将CRISPR / Cas9与Red / ET重组相结合我们成功地一个33 kb的人类片段敲入了小鼠ApoE基因座。阅读我们  最近发布的作品  以获取更多详细信息。

 

4路重组(4WR)提供了一种新的快速且简化的方法,可在单个体内重组步骤中从多达四个DNA片段(例如PCR产物)组装质粒。4WR是Gene Bridges广受欢迎的直接克隆型大肠杆菌菌株GB05-dir(目录号K008)的新应用。

 

上海起发现货genebridges K003说明书

BAC Subcloning Kit

BAC亚克隆试剂盒

特征

  • 无需限制位点

  • 最多可克隆20 kb的片段

  • 高红色/ ET效率

  • 重组后可方便地去除Red / ET重组蛋白表达质粒pRedET。

应用

  • 将碱基对从BAC的DNA片段精确亚克隆到高拷贝质粒主链中

描述

可以包含大插入片段的大肠杆菌载体,例如细菌人工染色体(BAC),为功能基因组学提供了多个优势。它们可以携带足够的DNA,在单个分子中包含大多数真核基因,包括所有顺式作用调控元件,以及许多真核基因簇,原核调节子和许多完整的病毒基因组。然而,常规的克隆方法依赖于限制酶的使用和体外纯化步骤,这排除了大分子的工程改造。因此,直到最近,这种分子的用途才受到限制。

BAC亚克隆试剂盒旨在通过Red / ET重组从任何类型的细菌人工染色体(BAC)有效地将高达20 kb的大DNA片段亚克隆到质粒载体中。

Red / ET重组(重组)是一种允许对任何大小的DNA分子进行精确工程改造的方法,包括非常大的分子,例如BAC或大肠杆菌染色体。它依赖于在体内同源重组的大肠杆菌,并允许范围广泛的具有DNA分子修饰在任何选定的位置上。

内容

  • Red / ET重组蛋白表达质粒pRed / ET,通过此质粒转化,可将任何大肠杆菌菌株制成Red / ET精通

  • 带有ColE1复制起点和氨苄青霉素抗性基因的线性载体将用于亚克隆实验

  • 阳性对照,可将来自对照BAC的15 kb片段亚克隆到试剂盒随附的载体中

  • 详细的协议,质粒,图谱和序列的描述

 

序列

ColE1最小向量

 

放大器ColE1 ORI

 

GCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAACGTTGCGAAGCAAC GGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCATCAAATTAA GCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTTTCTACAAACTCTTTTGTTT ATTTTTCTAATACATCAGAGAGATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGATAATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCG CCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAAC GCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATC GAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTT TTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTGT TGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTG GTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAG AATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCT GACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGAT CATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACG ACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATT AACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAG GCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTA TTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACT GGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTA AGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTACG CGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGAC CGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTT CTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAG GGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTTGGGTGA TGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTG GAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTTGAACAACACTCAACC CTATCTCGGGCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTG GTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTA ACGTTTACAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACC AAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGA TCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAAC AAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACT CTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTC TAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATA CCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGT CTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCT GAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACT GAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAG GCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGC TTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTG ACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAAC GCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACA TGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGA GTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGC GAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTA TTTCACACCGCATAGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGAC GCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGT

 

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