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 技术文章
残留DNA提取试剂盒
点击次数:57 发布时间:2020-05-06

残留DNA提取试剂盒(碘化纳法) 

残留DNA提取试剂盒遵照中国药典记载的碘化纳法,适用于疫苗和治疗用生物制品所含宿主细胞残余DNA的提 取。

残留DNA提取试剂盒可以提取样品中含有的极微量的DNA,回收率较高。

DNA的提取操作时间为60-90 min。

提取的DNA可以通过qPCR进行定量。

◆特点

● 遵照中国药典登载的碘化纳法

 ● 高回收率

● 单管操作(无需换管) ,耗时仅60-90 min

● 不需要苯酚和氯方等有机溶剂

● 兼容多种DNA *1 为使DNA检测方法与国际标准保持同步,中国药典(The Chinese Pharmacopoeia)宣布建立残留细胞 *1 DNA检测国家标准。碘化纳法将作为残留DNA提取方法,被新增至2020版的中国药典中。

◆原理 1. 使样品中的蛋白质和脂质溶于碘化纳和N-月桂基肌氨酸钠; 2. 异丙醇与糖原选择性地共沉淀DNA。

 

◆使用方法

 

方法1 

应用实例 DNA spiking test(加标回收实验) 

 

DNA Extractor™ Kit可以高产量提取残留DNA,甚至少量残留DNA。 

 

上海起发Ivy Fine Chemicals B48202现货

货号品名规格品牌
B48202100L Glycogen Solution;1 mL Detergent Combo Solution;25 mL Sodium Iodide Solution;30 mLWashing Buffer (No Ethanol)DNA提取器试剂盒 kit  Ivy Fine Chemicals

 

Ivy Fine Chemicals Corporation,

目录号B48202,50 次浸提,

4 ℃ 下可稳定储存 2 年

仅供实验室使用

 

溶液制备:

向清洗缓冲液中加入 70 mL 乙醇,

向碘化纳溶液中加入 50 L 糖原

向清洗缓冲液中加入 2 L 糖原

 

DNA 提取程序:

向 2 mL 微量离心管中加入 500 L 各样品或稀释液

向各试管中加入 20 L 清洁剂组合溶液,并轻轻涡旋

  • 选项:如果高浓度的蛋白质干扰 DNA 提取和随后的 DNA 分析,每个样品用 20 L 蛋白酶 K (10 mg/mL) 在 60 C 消化 20 min,然后在 95 C 灭活酶 5 min

向各微量离心管中加入 500 L 碘化纳溶液,轻轻涡旋

在 50 ℃ 下孵育 10 min

加入 900 L 异丙醇并涡旋。

室温下孵育 30 min

以 12000 rpm 离心 15 min

轻轻倒出或吸取上清液

加入 1.8 mL 洗涤缓冲液(含乙醇)并涡旋

以 12000 rpm 离心 10 min

轻轻倒出或吸取上清液

风干 DNA

加入 20-60 L 水,轻轻涡旋溶解 DNA

纯化的 DNA 可通过 PCR、real time PCR、限制性内切酶切、DNA 测序、Picogreen 荧光染色进行分析

流程图:

 

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