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bioacademia 02-012说明书
点击次数:59 发布时间:2020-12-15

 bioacademia 02-012说明书

Taq-DNA聚合酶经济性(-dNTPs),具有强健的缓冲液
02-012  200件,02-012-5 5件x 200件
储存:储存温度-20˚C。
浓度:5单位/μl
*注:一个单位是指能将10 nmol的总dNTPs并入的酶量
当激活的鲑鱼精子DNA被用作
模板/底漆。
储存缓冲液:20毫米Tris HCl(pH 8.0),100毫米KCl,0.1毫米EDTA,1毫米DTT,50%甘油,0.5%
吐温20,0.5%Igepal CA-630。
提供试剂:10 x强效缓冲液(Taq)
应用:
1) 高通量PCR
2) 菌落PCR
3) dUTP、dITP和荧光标记核苷酸的掺入
4) 底漆延伸
5) 在3’-钝端添加一个单核苷酸(腺苷),用于克隆到TA载体。
背景:水热菌DNA聚合酶(taqdna聚合酶)在大肠杆菌中表达
量大,纯度高。该酶具有耐热DNA聚合酶活性,且
分子量为94 kDa。这种酶适用于PCR反应;能够用不同的
底漆。
质量保证:通过SDS-PAGE(CBB染色)测定纯度大于95%(图1)
证实缺乏核酸内切酶和核酸外切酶。
PCR检测:以DNA为模板进行PCR反应,扩增结果良好,达14个
kB(图2)。
使用强效缓冲液(Taq)的注意事项:强效缓冲液可诱导最大限度的酶活性。避免
在凝胶电泳分析中产生不希望出现的条带,最宜反应时间为
建议如下:1)模板延伸时间约为5至10秒/kb,模板延伸时间为8kb,以及
大约15秒/kb,最多14kb;2)用2步PCR设置大致相同的延长时间
(穿梭PCR)和三步PCR;3)在没有扩增的情况下,通过小步延长延伸时间
看到。采用二步PCR方法可以更快地检测到扩增产物。

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