bioacademia 02-701说明书

该cDNA文库（质粒DNA）是由啤酒酵母S288C衍生的poly（A）+ RNA在对数期通过Linker-Primer方法（参考文献1）由大阪H. Nojima教授构建的。大学。通过使用寡核苷酸（dT）18接头引物单向克隆该文库，该引物包含Not I和BamHI（Bgl II）-Sma I衔接子的限制性酶切位点。
该文库中使用的pLZ3载体（如下所示）不能在啤酒酵母中复制，但包含pUCori以便在大肠杆菌中复制。

应用
已知或未知基因的PCR筛选：准备已知或未知基因（cDNA）的引物并扩增通过从该文库中PCR克隆该基因，然后克隆至合适的载体。
标准扩增条件：以10-100 ng cDNA为模板，进行35个PCR反应循环。（根据目标基因的mRNA的表达率来改变模板的数量和循环数。）

规格
数量：在10 mM Tris-HCl-1mM EDTA（pH 7.5）中，500 ng（40 ng / ul 13ul）
质量：1）独立克隆的数量：3.6 x 106 
2）平均插入片段大小：大于1 kb
存储：-20℃

参考文献
1. KoboriM。池田 奈良 加藤 久米川 野岛 和川岛 “通过改进的方法大规模分离破骨细胞特异性基因，涉及制备减法cDNA文库。” Genes Cells 3：459-475（1998）PMID：9753427
2.田中S。和野岛 “ Nik1：酿酒酵母的Nim1样蛋白激酶与Cdc28复合物相互作用并调节细胞周期进程。” Genes Cells 1 905-921（1996）PMID：9077450 
3. SambrookJ。和RussellDW。分子克隆第11章“ cDNA文库的制备和基因鉴定”。CSHL出版社（2001）