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 技术文章
KANEKA KanCapA™ 抗体纯化树脂-上海起发
点击次数:88 发布时间:2021-01-29

KANEKA KanCapA™ 抗体纯化树脂-上海起发

 

抗体纯化树脂​ -富士胶片和光

KANEKA KanCapA™

 

   

  

  本产品为Protein A亲和层析树脂。用于从活体样本及细胞培养上清.纯化免疫球蛋白及包含Fc段的重组抗体。

  本产品由高交联纤维素微珠及新研发的耐碱Protein A配体构成,可用于IgG的亲和纯化。

 

 

◆特点

 

  • 耐碱

  • 良好洗脱条件

  • 高抗体结合能力

  • 可循环使用

  • 便于扩增

 

 

◆关于改良Protein A

 

  

  KanCapA™采用的不是天然Protein A,而是使用变异型C域5聚物的新型Protein A。

  天然Protein A的C域结合于Fc段,也结合于Fab段,其中与VH3亚家族抗体的反应性较高。该类型的解离需要弱酸条件下洗脱。

  为改善该问题,使用分子设计系统重新设计分子,研发了保持耐碱性、改善Fab段的非特异性结合及洗脱曲线的Protein A。

 

 

本产品采用的Protein A

 

1.C5聚体蛋白质

搜狗截图20160727141313.png

良好pH条件下清晰地洗脱抗体 

2.较高的耐碱性

3.减少Fab段的非特异性结合

 

 

◆产品特性

 

KANEKA KanCapA™ 产品特性

 

矩阵

高交联纤维

 ※

 1) 平均粒度为累积体积分布的中间粒度

 2) 5%动态结合容量为前端分析测定(停留时间3分钟)

 3) 可在强碱条件下清洗,但请避免长时间的清洗

 4) 请勿冷冻

平均粒度1)

65-85μm

配体

Protein A,重组(抗强碱)

结合

化学结合(还原胺化)

动态结合容量2)

≧35mg 人多克隆IgG/mL载体

化学稳定性3)

使用亲和层析通用可溶性溶媒时较稳定

pH范围3)

pH 2-13

静止清洗条件3)

0.1-0.5 mol/L氢氧化钠
6-8 mol/L尿素、6 mol/L盐酸胍

流量

大500cm/h(层高: 20-25cm)

停留时间

≧3分钟(建议:4-6分钟)

保存条件4)

20%乙醇浑浊液,1~10℃

 

 

◆应用

 

1、Fab段纯化应用

 

 • 利用KANEKA KanCapA™的特点,可从经木瓜蛋白酶处理后的IgG溶液分馏Fc段及Fab段。

 

3-.jpg

 

 

2、IgG洗脱曲线(pH3.5 & pH3.0)

 

 • 洗脱范围已优化,可清晰地分馏提纯。

 

4-.jpg

 

 

 

3、通过强碱清洗进行树脂循环

 

 • 进行300次循环处理后(0.1M氢氧化钠溶液,15分钟),IgG的结合容量的减少率仍低于20%,表明其循环性能较高。

 

5-.jpg6-.jpg

 

使用0.1 M氢氧化钠溶液进行循环处理后的IgG结合活性曲线数据

循环处理后(0.1M氢氧化钠溶液 15分钟)的IgG回收率及ProteinA配体的渗滤量的曲线数据 

 

 

4、动态结合容量 曲线数据

 

 • 在4-6分钟停留时间过程中,DBC较高。

  ※ 动态结合容量表示纯化样本在流动的状态下,回收程度的数值。动态结合容量较高的载体的流速较快,可回收大量目标分子,因此可以认为在短时间内有效纯化目标分子的优质载体。

 

7-.jpg

       KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 动态结合容量) 曲线数据

 

 

5、不同大小的树脂填充装柱的压力/流速绘图数据

 

8-.jpg

                填充依赖压力的计算方法是从整体压力减去系统压力。

 

 

6、KANEKA KanCapA™于各种大小的柱的填充效果

 

  • KANEKA KanCapA™适用于各种大小的柱。

 

充填方法

L. D.(厘米)

高度(毫米)

培养皿/米

非对称性

流动填充

4.4

200

5710

1.14

轴向力填充

7

199

6063

1.06

流动填充

10

201

5276

1.18

流动填充

30

200

5208

1.17

轴向力填充

45

233

4712

1.09

 

以下是脉冲注入数据:

  可溶性溶媒:1(v/v)% 丙酮

  注入量:1% 柱容量

  流速:60 cm/h

 

 

◆产品列表

 

产品编号产品名称规格
114-01071KANEKA KanCapA™2mL (net 1mL)
110-0107310mL (net 5mL)
118-0107450mL (net 25mL)
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