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creativemolecules 001SS说明书
点击次数:80 发布时间:2021-02-01

creativemolecules 001SS说明书

BS 3-H12/D12

产品信息BS 3-H12/D12双硫琥珀酰亚胺亚甲酸酯12 x 1 mg BS 3-H12和BS 3-D12的1:1摩尔比混合物,目录号:编号:001SS C16H18N2Na2O14S2/C16D12H6N2Na2O14S2 MW 572/584特征:同位素编码。
水溶性。
用于死端交联的240/252铵离子。
BS3-H12/D12是一种水溶性、同双功能、同位素编码的交联剂双磺琥珀酰亚胺亚酸酯。试剂的轻(H12)和重(D12)形式的区别在于重形式的12个氘原子,而不是轻形式的12个氢原子,否则在化学上是相同的。同位素编码能够在质谱中明确检测交联产物。
BS3-H12/D12的反应产物将在质谱中表现为强度相等的双峰,对应于试剂的轻(H12)和重(D12)形式,以12.07573 Da除以电荷状态(+ 1为12.07,+ 2为6.04,+ 3为4.03等)。
在pH 7-9缓冲液中,N-羟基磺琥珀酰亚胺(NHSS)酯主要与伯氨基(-NH2)反应,形成稳定的酰胺键。因此,交联反应应避免使用含胺的缓冲液(Tris、甘氨酸、铵盐等)。BS3具有水溶性,可在水中制备贮备液。为制备50 mM BS3-H12/D12储备液,向含有1 mg试剂的预称重管中加入35 l水。

 

使用以下公式计算肽交联质量:[M12 + H]+ =[M1 + H]+ +[M2 + H]+ + 137.06025[M1OH + H]+ =[M1 + H]+ + 156.07864[M1i + H]+ =[M1 + H]+ + + 138.06808[M1NH2 + H]+ =[M1 + H]+ + + 155.09462,其中M1、M2-游离肽质量;M12-肽间交联质量;M1OH-死端交联质量;M1i–肽内交联的质量;M1NH2–死端酰胺的质量(如果用铵盐淬灭反应)。
MS-Bridge  桥元素组成:C8 H10 O2;–OH死角的修饰元素组成:C8 H12 O3;–NH2死角的修饰元素组成:C8 H13 O2 N。
FLAG(DYKDDDDK)肽测试反应的典型MALDI质谱图如图1所示。试剂的轻(H12)形式的反应产物的质量为:1013–无FLAG肽;1151–肽内交联;1169–死端交联;2163–肽间交联。
MSMS光谱中对应于试剂赖氨酸铵离子修饰的240/252双峰信号表明存在–OH死端交联(参考文献1)。1、2)、(图2)。
 

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