生物制药残留DNA提取试剂盒（ biohub B48202 ） 生物制药残留DNA提取试剂盒（NaI法） 残留DNA提取试剂盒遵照中国药典记载的NaI法，适用于疫苗和治疗用生物制品所含宿主细胞残余DNA的提取。 残留DNA提取试剂盒可以提取样品中含有的极微量的DNA，回收率较高。DNA的提取操作时间为60-90 分钟。提取的DNA可以通过qPCR进行定量。 生物制药残余DNA抽提试剂盒 （NaI法DNA提取试剂盒） 特点 ● 遵照中国药典登载的NaI法*1
● 高回收率
● 单管操作（无需换管） ，耗时仅60-90 min
● 不需要Phenol和Chloroform等有机溶剂
● 兼容多种DNA *1 为使DNA检测方法与标准保持同步，中国药典（The Chinese Pharmacopoeia）宣布建立残留细胞DNA检测国家标准。NaI法将作为残留DNA提取方法，被新增至2020版的中国药典中。 ◆ 原理 1. 使样品中的蛋白质和脂质溶于NaI；
2. Isoproanol与糖原选择性地共沉淀DNA。 ◆ 使用方法 q 1、每个样品添加500uL或稀释至2 mL微离心管 q 2、加20uL洗涤剂组合液到每管，并轻轻的涡旋 q 3、选项：如果高浓度的蛋白质干扰DNA提取和DNA分析，每个样品中吸取添加20uL消化蛋白酶K（10mg/ml），在60°C， 20min，然后在95°C灭酶 5min q 4、加500uL NaI溶液到每个微管中，并轻轻的涡旋 q 5、50°C孵育10分钟 q 6、加900uL异丙醇涡旋 q 7、室温孵化30min 8、离心机12000转15min 9、轻轻倒出或吸出上清液 q 10、添加1.8ml洗涤缓冲液（含酒精），涡旋 11、离心机12000转10min q 12、轻轻倒出或吸出上清液 q 13、风干DNA q 14、添加20-60uL水轻轻涡旋溶解DNA q 15、纯化的DNA可进行PCR、实时定量PCR、酶切、DNA测序、荧光染色法 注意事项：
1） 用于稀释NaI溶液的蒸馏去离子水须去除DNA。
2） 配制好的洗涤溶液（B）在4℃至少能保存一周。如果需要少量的洗涤溶液（B），加入糖原 溶液到无菌离心管中至合适体积即可。
3） 在保存期间NaI溶液会结晶，加热溶液至50℃可帮助溶解。
4） 提取步骤应在DNA 变性之前，因此重要的是使用无菌技术尽可能降低DNA 污染。预先包装好的无菌吸管、无菌试管和手套都要经过此步骤。 5) 请于各步骤使用搅拌器将溶液搅拌均匀。样品溶液里含有DNA酶时，进行步骤2之前请先进行步骤3。步骤4里样品溶解不完全时，请把保温温度升至40-60℃帮助溶解。但是含有部分蛋白（γ-球蛋白）或高浓度蛋白的样品（＞50mg/ml），加热可能会导致蛋白聚集，请注意。 ◆ 应用案例 DNA spiking test（加标回收实验） DNA Extractor Kit( biohub B48202 )可以高产量提取残留DNA，甚至少量残留DNA。 ◆ 试剂盒构成 | 内容物 | 内容量 | | NaI法溶液 | 25ml | | 洗涤剂组合液 | 1ml | | 洗涤缓冲液（无酒精） | 30 mL | | 糖原溶液 | 100uL | 备注：每种成分不单独出售 试剂盒不包含： 乙醇（洗涤缓冲液） 异丙醇（用于DNA沉淀） 2ml微复合管（离心或等效的） 微型离心机（离心或等效的） ◆ biohub B48202产品信息 | 产品编号 | 产品名称 | 储存 | 包装 | | B48202 | DNA Extractor™ Kit for Residual DNA, CP Method(Sodium Iodide Method)
残留DNA提取试剂盒（NaI法） | 2-10℃ | 50 tests | ■ 保存
2 - 10℃，试剂盒的保存期为2 - 3 年。 在工业生产的疫苗和治疗用生物制品（干扰素、白细胞介素、单克隆抗体、重组蛋白）中，宿主细胞残余DNA污染直接影响终产品和整个生产过程的质量和产量，可能引起动物致瘤、感染病毒DNA等严重后果，中国药典、WHO、EU、FDA对宿主细胞DNA残留限量都有规定。传统的DNA提取方法蛋白酶K-SDS法在SDS的稳定和促进下降解细胞中的蛋白质特别是核酶，再经有机溶剂萃取得到高质量的DNA，但毒DNA和生物制品宿主细胞残余DNA的提取试剂盒。使用新型提取步骤，用（NaI）作为促溶剂，稳定且灵敏度高、时间短，无有毒溶剂，无需复杂和费力操作，即可从样品中得到高质量和高回收率的DNA。
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