eaglebio KTR-757说明书

eaglebio KTR-757说明书

MMAE ADC ELISA Kit

SKU：KTR-757

分类：所有产品，检测试剂盒，癌症生物标记试剂盒，药物监测检测试剂盒，免疫学检测试剂盒

MMAE抗体药物偶联物（ADC）ELISA分析试剂盒（酶联免疫分析试剂盒）旨在用于定量测定测试样品中抗体-MMAE-偶联物的水平。对于MMAE抗体药物偶联物（ADC）的临床前和临床药理学研究非常有用。该试剂盒可直接使用来自组织/细胞培养物的样品以及来自人，大鼠，小鼠，灵长类动物等的血清样品。可以使用该试剂盒测量基于人源化单克隆抗体的MMAE-ADC和基于小鼠单克隆抗体的MMAE-ADC。

MMAE ADC ELISA试剂盒

在美国开发和生产的MMAE ADC ELISA试剂盒

尺寸：1×96个孔的
灵敏度：0.0435μg/ mL的
动态范围：0.032 - 4.0微克/毫升
孵育时间：2.5小时
样品类型：血清，细胞培养，组织
样本大小：100μL
备用名称：单甲基auristatin E，MMAE抗体药物共轭ELISA试剂盒
仅供研究使用

包含的控件

测定原理

MMAE ADC ELISA试剂盒的设计，开发和生产，用于定量测量血清中的单甲基澳瑞他汀E（MMAE）共轭物。该测定法利用竞争性免疫测定技术和仅与单甲基澳瑞他汀E结合的抗体结合使用。

将测定校准物（抗体MMAE缀合物）和测试血清样品直接添加到微滴定板的孔中，该板已涂有特异性抗MMAE抗体。随后，将辣根过氧化物酶（HRP）共轭的MMAE添加到每个孔中。在温育期间，抗体MMAE缀合物与HRP缀合的MMAE竞争抗MMAE抗体的有限结合位点。形成了包被良好的“抗MMAE抗体-HRP缀合的MMAE”的免疫复合物。未结合的抗体和缓冲液基质在随后的洗涤步骤中被去除。为了检测该免疫复合物，将孔与底物溶液在定时反应中孵育，然后将其与酸性试剂（即ELISA终止溶液）终止反应。然后在分光光度计酶标仪中测量吸光度。结合到每个微量滴定孔壁上的免疫复合物的酶促活性与测试样品中抗体-MMAE偶联物的量成反比。通过在4参数或log-logit曲线拟合上绘制每个校准器的吸光度与各自的抗体-MMAE缀合物浓度的关系来生成校准曲线。直接从该校准曲线确定测试样品中抗体-MMAE缀合物的浓度。

测定步骤

1. 将足够数量的Anti-MMAE抗体包被的微孔板/孔放在支架中，以一式两份运行人类Anti-MMAE标准品，对照和未知样品。
2. 将100 µL校准物和测试样品添加到微孔中。
3. 牢固密封板孔，盖上箔纸或其他材料以防光照，然后在ELISA板振动器（小轨道半径）上以400至450 rpm的转速旋转30分钟。
4. 立即向每个孔中加入25 µL HRP共轭MMAE（目录号30719）。（注意：添加HRP共轭MMAE之前无洗涤步骤）
5. 牢固密封板孔，用箔纸或其他材料遮盖以防光照，然后在ELISA板振荡器（小轨道半径）上旋转2个小时。在400至450 rpm下±10分钟。
6. 通过将350 µL工作洗涤溶液分配到每个孔中，然后将所有内容物*吸出，将每个孔洗涤5次。
7. 或者，可以使用自动微孔板清洗机。
8. 在每个孔中加入100 µL ELISA HRP底物。
9. 用铝箔或其他材料覆盖板，以避免暴露在光线下。在室温下静置板静置20分钟。
10. 立即将100 µL ELISA终止溶液添加到每个孔中。轻轻混合。
11. 读取450 nm处的吸光度。

典型标准曲线

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