您好!欢迎访问上海起发实验试剂有限公司网站!
全国服务咨询热线:

15921799099

当前位置:首页 > 技术文章 > clsgmbh 500286说明书

clsgmbh 500286说明书

更新时间:2022-09-20      点击次数:460

clsgmbh 500286说明书


clsgmb MH-3924A

500286冻存培养物
描述从 ACI 大鼠肝癌(细胞系服务)体外建立。
生物
组织
疾病肝细胞癌
同义词MH 3924A、MH3924A、MH-3924 A、MH 3924 A、3924A、莫里斯肝癌 3924A、MH-3924、MH3924、MH 3924
年龄16 个月
形态学上皮样
生长特性粘附的
表达/突变/易感性clsgmbh 500286
培养基记忆体
中等补充剂10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺、4.5 g/L 葡萄糖
倍增时间25-35 小时
继代培养去除培养基并使用不含钙和镁的 PBS 冲洗贴壁细胞(T25 为 3-5 ml PBS,T75 细胞培养瓶为 5-10 ml)。添加Accutase(每T25 1-2 ml,每T75细胞培养瓶2.5 ml),细胞片必须*覆盖。在环境温度下孵育 8-10 分钟。用培养基 (10 ml) 小心重悬细胞,以 300 g 离心 3 分钟,将细胞重悬于新鲜培养基中,然后分装到含有新鲜培养基的新烧瓶中。
分流比建议比例为 1:4 至 1:6
播种密度2 x 10^4 细胞/cm^2
流体更新每 3 到 5 天
冷冻恢复使用 2xT25 细胞培养瓶中冷冻管的全部内容开始培养。细胞将在 24-48 小时内恢复。
冷冻培养基CM-1(CLS 目录号 800150)
处理冷冻保存的培养物细胞在干冰上冷冻运输。请确保小瓶仍处于冷冻状态。如果不打算立即培养,冷冻管必须在到达后储存在 -150°C 以下。如果打算立即培养,请遵循以下说明: 在 37 °C 水浴中快速搅拌,在 40-60 秒内快速解冻。水浴应该有含有抗菌剂的干净水。样品解冻后,立即从水浴中取出冷冻管。一小块冰块应该仍然存在,小瓶应该仍然是冷的。从现在开始,所有操作都应在无菌条件下进行。将冷冻管转移到无菌流动柜并用 70% 酒精擦拭。小心打开小瓶,将细胞悬液转移到含有 8 ml 培养基(室温)的 15 ml 离心管中。小心重悬细胞。以 300 xg 离心 3 分钟并弃去上清液。可以省略离心步骤,但在这种情况下,必须在 24 小时后去除剩余的冷冻培养基。在 10 ml 新鲜细胞培养基中小心重悬细胞,并将它们转移到两个 T25 细胞培养瓶中。所有进一步的步骤都在 Subculture 部分中描述。
增殖培养物的处理一到两个细胞培养瓶中装有细胞培养基。将整个培养基分别收集在 1 个或 2 个 50 ml 离心管中。小心地向每个 T25 细胞培养瓶中加入 5 ml 细胞培养基。在显微镜下控制细胞形态和汇合。在 37 °C 下孵育至少 24 小时。将收集的培养基以 300 xg 离心 3 分钟,以收集可能在运输过程中脱落的细胞。如果可见细胞沉淀,将细胞重悬于 5 ml 细胞培养基中并转移到 T25 细胞培养瓶中。在 37 °C 下孵育至少 24 小时。
上海起发实验试剂有限公司
地址:上海浦东川沙镇川沙路6619号上海起发实验试剂有限公司
邮箱:xs1@78bio.com
传真:021-50724961
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息