🔍产品基础信息
- 货号:78BEA10011
- 中文名:热不稳定性耐高盐核酸酶(HL-SAN)
- 品牌:BIOHUB
- 规格:25 kU
- 储存条件:-20℃避光保存,有效期3年
- 适用领域:病毒载体生产、蛋白纯化、mNGS样本处理等
📝详细介绍
1️⃣ 产品特性
HL-SAN是一种重组非特异性内切酶,由毕赤酵母表达系统生产 。其核心特性包括:
- 高盐耐受性:在0.5 M NaCl条件下活性最佳,可耐受高达1 M NaCl 。
- 快速灭活:通过添加DTT或TCEP(还原剂)即可不可逆失活,50℃孵育30分钟灭活率>99% 。
- 广谱活性:可降解单链/双链DNA及RNA,产物为5-7 nt寡核苷酸 。
2️⃣ 技术参数
- 比活度:≥175,000 Units/mg(基于小牛胸腺DNA标准) 。
- 酶活定义:37℃下30分钟消化50 μg/ml DNA(OD260增加1.0) 。
- pH范围:7.5-9.5(最佳pH 9.0) 。
- Mg²⁺需求:1-20 mM(最佳浓度5-20 mM) 。
3️⃣ 应用场景
- 病毒载体生产:AAV/rAAV载体纯化中去除宿主DNA,符合FDA<10ng/dose标准 。
- mNGS样本处理:快速裂解宿主细胞,提升病原微生物检出灵敏度(如下呼吸道感染检测) 。
- 蛋白纯化:清除DNA结合蛋白杂质,优化下游工艺 。
🎯核心优势
✅ 高盐环境下的优秀性能
- 常规核酸酶(如Benzonase)在>100 mM盐浓度时失活,而HL-SAN在0.5 M NaCl下活性达峰值,显著提升复杂体系(如AAV裂解液)的核酸去除效率 。
✅ 智能灭活设计
- 通过添加DTT(1-5 mM)或TCEP(1-10 mM)即可灭活,无需加热或超滤,简化工艺流程 。
✅ 合规性与安全性
- 支持GMP生产,提供完整的COA、MSDS及可追溯文件 。
- 不含Triton X-100,符合欧盟环保法规 。
✅ 高性价比
- 比活度达175,000 U/mg,单位成本低于同类产品30% 。
❓常见问题与解答
- Q1:HL - SAN 与普通核酸酶有何区别?
A1: HL - SAN 专为高盐设计,在高盐浓度下仍能保持高效活性,而普通核酸酶在高盐环境下活性会大幅下降,无法满足高盐条件下去除宿主 DNA 等需求。
- Q2:灭活后是否残留酶活性?
A2: 添加 10mM DTT 或 TCEP 后,5 分钟内即可实现不可逆灭活,无残留风险,这样就能避免残留酶对后续实验或生产流程造成干扰。
- Q3:是否支持冻干工艺?
A3: HL - SAN 可冻干保存,复溶后活性稳定,适合长期储存,这大大提高了产品的便利性和使用寿命,满足不同的使用和保存需求。
- Q4:推荐使用浓度是多少?
A4: 宿主 DNA 清除推荐 1000U/ml,不过具体的使用浓度还需根据样本类型进行适当调整,以达到最佳的实验效果。
- Q5:是否适用于哺乳动物细胞样本?
A5: 是的,可高效去除哺乳动物基因组 DNA,适用于 mNGS 和病原检测,适用范围广泛,能满足多种实验和检测需求。
- Q6:在病毒载体生产中如何发挥作用?
A6: 在病毒载体生产如 AAV/AdV 病毒包装后,能有效清除宿主 DNA,满足 FDA/NMPA 对 HCD(宿主细胞 DNA)的严格管控要求,确保病毒载体的质量和安全性,对病毒载体的后续应用和审批等环节具有重要意义。
- Q7:在 mNGS 样本处理中的优势是什么?
A7: 能去除人体宿主 DNA,从而提升病原微生物检测灵敏度,有助于更准确地检测和分析样本中的病原微生物,为疾病的诊断和治疗提供更可靠的依据。
- Q8:在蛋白纯化中的作用机制是怎样的?
A8: 可清除 DNA 结合蛋白,提高目标蛋白纯度,通过去除与蛋白结合的 DNA,减少杂质干扰,使目标蛋白更容易被纯化和分离,提高蛋白纯化的效率和质量。
- Q9:酶的等电点是多少?
A9: pI 为 9.6,这一特性使其容易跟绝大多数蛋白分离,方便在复杂的生物样品中将酶与其他蛋白成分区分开来,有利于后续的纯化和分析等工作。
- Q10:在不同温度下的稳定性如何?
A10: 热不稳定性耐高盐核酸酶(HL-SAN)具有热不稳定性,在 37℃环境下保温 30 分钟后活性会降至 10%,在 42℃环境下保温 30 分钟后活性会降至 1% 以下,这种热不稳定性特点可在特定的温度条件下方便地实现酶的灭活,为实验流程的控制提供了便利。
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