wako●294-88501●大鼠促黄体生成素（LH）试剂盒（S型）【产品说明书】

🔍产品基础信息

- 货号：294-88501

- 英文名：LBIS™ Rat LH ELISA Kit

- 中文名：大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型）

- 品牌：wako

- 规格：96T

- 用途：用于免疫化学实验，仅限科研用途或进一步生产使用，不可用于诊断程序

📝产品概述

促黄体生成素（LH）是一种由垂体前叶分泌的糖蛋白激素，在大鼠的生殖生理过程中扮演着关键角色。对于雄性大鼠而言，LH主要作用于睾丸间质细胞，促进睾酮的合成与分泌，进而影响精子的发生与成熟；在雌性大鼠中，LH则在发情周期中发挥着调控作用，如促进卵泡的最终成熟、排卵以及黄体形成等。因此，精确检测大鼠体内的LH水平，对于深入研究大鼠的生殖内分泌机制、评估生殖毒性以及探索相关疾病的发生发展过程等具有极为重要的意义。而wako生物公司推出的这款试剂盒，正是科研工作者们开展此类研究的得力助手。

📌检测原理

该ELISA试剂盒采用酶联免疫吸附测定技术，利用特异性抗原抗体反应来实现对大鼠LH的精准定量检测。其核心原理是将大鼠LH抗原包被于微孔板上，当加入待测样本时，样本中的LH会与微孔板上的抗原发生特异性结合。随后，再加入与辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗LH抗体，该抗体能够与已结合在微孔板上的LH进行特异性识别和结合。最后，通过加入显色底物，底物在HRP的催化作用下发生氧化还原反应，产生特定颜色变化。颜色的深浅与样本中LH的含量呈正相关，通过测定吸光度值并对照标准曲线，即可准确计算出样本中LH的浓度。

🧪产品组分

- 包被有大鼠LH抗原的微孔板：作为免疫反应的载体，确保抗原抗体反应的高效进行。

- 酶标记抗大鼠LH抗体工作液：用于特异性识别和结合大鼠LH，且与底物反应产生可检测的信号。

- 大鼠LH标准品：提供已知浓度的LH标准，用于绘制标准曲线，从而实现对未知样本中LH含量的准确定量。

- 显色底物：在HRP的催化下发生显色反应，其颜色变化程度与样本中LH的含量成正比。

- 终止液：用于终止显色反应，使颜色变化稳定下来，便于准确测定吸光度值。

- 浓缩洗涤液：用于反应过程中的洗涤步骤，有效去除未结合的成分，减少背景干扰，提高检测的准确性。

- 说明书：详细阐述了试剂盒的使用方法、注意事项、储存条件等关键信息，是确保实验顺利进行的重要指导文件。

✅样本要求

- 样本类型：适用于大鼠的血清、血浆等样本类型。血清样本采集相对简便，能够较好地反映大鼠体内的实际LH水平；血浆样本则在某些特定研究场景下具有优势，如在需要同时检测多种血液成分或对血液抗凝处理有特殊要求时。

- 样本处理：采集后的样本应尽快进行离心处理，以去除细胞碎片等杂质，确保样本的澄清与纯净。一般建议在4℃下以3000rpm的转速离心10分钟。对于暂时不进行检测的样本，应根据实验计划合理分装，并妥善保存于合适温度下，避免反复冻融，以防样本中LH的降解或失活，影响检测结果的准确性。

- 样本保存：短期（24小时内）检测的样本可放置于4℃保存；若需长期保存，建议将样本分装后存放于-20℃环境下，可有效保持LH的稳定性，确保样本在较长时间内仍可用于准确检测。

💎操作步骤

1. 准备：从4℃冰箱中取出试剂盒，将所需试剂提前回温至室温，同时准备待测样本，并按要求进行适当处理与稀释。确保微孔板、试剂及样本等均达到适宜温度，以保证实验过程的顺利进行。

2. 加样：按照试剂盒说明书的指导，分别向微孔板中加入适量的标准品溶液和待测样本，注意尽量避免产生气泡，并确保加样准确无误，以提高实验的重复性和准确性。一般每个样本和标准品需进行双孔或多孔测定，以便后续对结果进行统计学分析，减小实验误差。

3. 孵育：将加样后的微孔板轻轻晃动混匀后，置于预先设定好温度和时间的孵箱或水浴中进行孵育。孵育过程中，抗原抗体反应充分进行，样本中的LH与微孔板上的抗原或抗体发生特异性结合。孵育时间、温度等条件应严格按照试剂盒说明书要求精确控制，以确保反应的特异性。常见的孵育温度为37℃，孵育时间为1-2小时左右，具体时间依试剂盒而定。

4. 洗涤：孵育结束后，立即将微孔板中的孵育液小心弃去，随后用洗涤液对微孔板进行充分洗涤。洗涤的目的是去除未结合的抗体、抗原以及其他非特异性吸附的成分，减少背景干扰，提高检测的灵敏度和特异性。一般采用自动洗板机或手动方式进行洗涤，洗涤次数通常为3-5次，每次洗涤后需尽量甩干微孔板中的残留液体，以防洗涤液残留影响后续反应。

5. 加入酶标记抗体：准确加入适量的酶标记抗大鼠LH抗体工作液于每个微孔中，轻轻晃动混匀后再次进行孵育。此步骤中，酶标记抗体与已结合在微孔板上的LH进行特异性结合，为后续的显色反应奠定基础。孵育条件与前一步骤类似，一般在37℃下孵育1小时左右。

6. 再次洗涤：孵育完成后，再次对微孔板进行洗涤，以去除未结合的酶标记抗体，进一步降低背景信号，确保检测结果的准确性。洗涤方法和次数与前次相同。

7. 显色：向每个微孔中加入显色底物溶液，混匀后置于室温下避光孵育。在HRP的催化作用下，显色底物发生氧化还原反应，微孔板中的溶液颜色逐渐发生变化，颜色的深浅与样本中LH的含量呈正相关。显色反应的时间一般较短，通常在15-30分钟左右，需严格控制显色时间，以防反应过度导致颜色过深，影响结果的准确判定。

8. 终止反应：当显色反应达到适宜程度时，迅速向每个微孔中加入终止液，轻轻混匀以终止显色反应。此时，溶液颜色会由原来的显色颜色转变为黄色，吸光度值趋于稳定，可在相应波长下进行准确测定。

9. 测定吸光度值：使用酶标仪在特定波长（一般为450nm）下测定每个微孔的吸光度值，记录数据并保存。吸光度值的高低直接反映了样本中LH的含量，通过与标准曲线对比即可计算出样本中LH的具体浓度。

10. 数据分析：根据测得的吸光度值，绘制标准曲线，并运用合适的数据分析软件或方法对样本的检测结果进行分析与处理。通过与标准曲线的对比，准确计算出待测样本中大鼠LH的含量，进而为后续的科研研究提供关键数据支持。

📦储存条件与有效期

- 储存条件：该试剂盒应妥善保存于2-10℃的环境中，各组分需严格按照说明书要求进行保存，避免阳光直射、高温、潮湿等不良环境对试剂盒质量产生影响。在储存过程中，应注意保持试剂盒的密封性，防止试剂受潮或受到污染。

- 有效期：在规定的储存条件下，试剂盒的有效期为6个月。在有效期内，各组分的性能和活性能够得到充分保证，确保检测结果的准确性和可靠性。因此，用户在购买和使用试剂盒时，应关注其生产日期和有效期，合理安排实验计划，避免使用过期试剂盒，以免影响实验结果。

🎯核心优势详细介绍

1️⃣高灵敏度与准确性

- 试剂盒采用先进的酶联免疫吸附测定技术，通过特异性抗原抗体反应和酶催化显色反应，能够精确检测大鼠样本中低浓度的LH含量，检测灵敏度高，确保在各种生理病理状态下均能准确检测到LH水平的变化。

- 采用双抗体夹心法或竞争法等优化的免疫反应模式，有效减少了非特异性结合和交叉反应的发生，提高了检测的特异性和准确性。同时，试剂盒中的标准品经过严格纯化和校准，能够准确反映不同浓度梯度下的LH含量，为检测结果提供可靠的定量依据，使检测结果与实际样本中LH含量高度吻合，检测误差控制在极小范围内，为科研工作者提供了精准可靠的数据支持。

2️⃣操作简便快捷

- 试剂盒的设计充分考虑了用户的操作便捷性，各组分经过精心优化和预分装，实验步骤简洁明了，无需繁琐的前处理和复杂的操作技巧。从样本加入到最终结果的得出，整个检测过程一般在3-4小时内即可完成，大大节省了实验时间，提高了科研工作效率，使科研人员能够更快速地获取实验数据，加速研究进程。

- 说明书详细清晰地阐述了每一步操作的要点和注意事项，即使是新手科研人员也能轻松上手，按照步骤进行准确操作。同时，试剂盒对实验设备的要求相对较低，常规的实验室设备如微量移液器、酶标仪、孵箱等即可满足检测需求，无需额外购置昂贵的专用仪器，降低了实验成本，提高了试剂盒的普及性和实用性，使其能够广泛应用于各类科研实验室。

3️⃣稳定性与可靠性

- wako生物公司凭借其在生物试剂研发领域的深厚技术积累和严格质量控制体系，确保了该ELISA试剂盒的稳定性和可靠性。试剂盒中的各组分在生产过程中经过严格的质量检测和稳定性验证，从原料采购、生产加工到成品包装，每一步都遵循严格的质量标准和操作规范，确保每一批次试剂盒的性能和质量保持高度一致。

- 在规定的储存条件下，试剂盒的有效期长达6个月，在有效期内，试剂盒的检测性能稳定，各项指标不受时间影响，能够持续为用户提供最终用户带来稳定可靠的检测结果。即使在实验过程中出现轻微的环境波动或操作差异，试剂盒也能凭借其优异的稳定性，保持检测结果的准确性和可重复性，减少了因试剂不稳定导致的实验失败和数据偏差，为科研工作的顺利开展提供了坚实保障。

4️⃣适用范围广泛

- 该大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型）适用于多种科研领域和实验场景，无论是在基础生殖生理研究中探究大鼠生殖内分泌轴的调节机制、研究不同生理阶段大鼠LH水平的变化规律，还是在生殖毒理学研究中评估化学物质、药物或环境因素对大鼠生殖功能的影响，亦或是在辅助生殖技术研究中优化大鼠繁殖性能等，均能发挥重要作用，提供关键的检测数据支持。

- 除了科研用途外，该试剂盒还可用于进一步生产相关产品或技术服务的开发过程中，为产品质量控制、技术研发等提供精准的检测手段，具有广阔的应用前景和市场潜力，能够满足不同用户在不同场景下的多样化需求。

❓常见疑问解答

▍问1：该试剂盒是否可以用于其他物种的LH检测？

答：不可以！这款试剂盒是专门针对大鼠促黄体生成素（LH）设计和研发的，其抗原抗体反应具有高度的物种特异性，仅适用于大鼠样本的LH检测。若用于其他物种的LH检测，可能会出现严重的非特异性结合或检测结果不准确的情况，因此不能用于其他物种的LH检测呢。

▍问2：试剂盒在运输过程中温度波动是否会对试剂盒质量产生影响？

答：在正常运输过程中，只要温度波动范围控制在合理范围内（一般不超过-20℃至25℃），并确保运输时间较短，通常不会对试剂盒质量产生显著影响呢。不过，为了保证试剂盒的性能和质量，wako生物公司在运输过程中会采用专业的冷链包装和保温措施，确保试剂盒处于适宜的温度环境中。收到试剂盒后，建议您尽快按照说明书要求将其妥善保存于2-10℃的环境中哦。若在运输过程中出现温度严重超标或长时间高温暴露等情况，可能会对试剂盒质量产生一定影响，此时您应及时与供应商联系，进行相关处理。

▍问3：如果样本中LH含量超出试剂盒的检测范围，该如何处理？

答：若样本中LH含量超出试剂盒的检测范围，您可以通过对样本进行适当稀释后再进行检测来解决这个问题呢。在进行稀释时，需采用试剂盒中提供的稀释液或说明书指定的其他稀释液，并严格按照一定比例进行稀释，同时要确保稀释后的样本中LH含量落在试剂盒的检测范围内哦。在计算最终结果时，别忘了将稀释倍数考虑进去，以得到准确的LH含量值呀。

▍问4：试剂盒的重复性如何？

答5：该试剂盒具有出色的重复性呢。在实验过程中，通过严格控制实验条件和操作步骤，同一批次的样本在多次重复检测中能够获得高度一致的结果，不同批次的试剂盒之间也保持着良好的稳定性，能够确保实验数据的可靠性和可重复性，为科研工作者提供稳定可信的检测平台哦。

▍问6：如何确保试剂盒检测结果的准确性？

答：为确保试剂盒检测结果的准确性，您需要注意以下几点哦。首先，在实验前要仔细阅读并严格遵循试剂盒说明书中的各项操作指导，包括样本处理、试剂准备、孵育条件控制、洗涤步骤等。其次，确保所使用的试剂盒在有效期内，并妥善保存于规定的温度环境中，避免因试剂过期或保存不当导致检测结果偏差。再者，实验过程中要尽量减少人为操作误差，如准确移液、避免气泡产生、保持反应体系的一致性等。最后，建议每个样本设置双孔或多孔进行检测，并同时检测标准品和对照样本，通过绘制标准曲线和计算样本的准确浓度，对检测结果进行严格的质量控制和数据分析呀。

▍问7：试剂盒是否提供售后服务？

答：当然啦！wako生物公司始终致力于为客户提供优质的产品和完善的售后服务。如果您在使用该试剂盒过程中遇到任何问题，如实验结果异常、试剂盒质量问题等，您可以及时与wako生物公司的客服团队取得联系哦。他们会为您提供专业的技术咨询和解决方案，协助您解决实验中遇到的困难。对于因产品质量问题导致的实验失败等情况，公司会根据具体情况为您安排退换货等相关售后服务，确保您的科研工作不受影响，让您无后顾之忧呀。

▍问8：该试剂盒是否需要特殊设备进行检测？

答：不需要特殊的设备哦！该试剂盒采用常规的酶联免疫吸附测定技术，只需配备一般的实验室设备，如微量移液器、酶标仪、孵箱、洗板机等即可完成整个检测过程呀。这些设备在大多数科研实验室中都较为常见，方便您随时开展实验，无需额外购置昂贵的专用仪器，降低了实验成本，提高了试剂盒的普及性和实用性呢。

▍问9：试剂盒是否对样本收集时间有特殊要求？

答：样本收集时间会根据具体的研究目的和实验设计有所不同哦。一般来说，对于检测大鼠体内的基础LH水平，通常选择在大鼠的静息状态下、非应激时间段进行采样，如在大鼠的活动期或非活动期的特定时间点采集样本，以减少生理节律等因素对LH水平的影响。在研究某些特定生理过程或药物干预对LH水平的影响时，则需根据实验方案在特定的时间点进行采样，以准确捕捉LH水平的变化情况哦。不过，无论何时采集样本，都应尽量保持样本收集过程的一致性和规范性，确保样本的质量和稳定性，为后续的检测提供可靠的保证呀。

▍问10：试剂盒是否可以与其他检测方法联用？

答：是的呀！该试剂盒可以与其他检测方法联用，如放射免疫分析（RIA）、化学发光免疫分析（CLIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）的其他检测项目等，以实现对大鼠生殖内分泌系统更全面、深入的研究。通过多种检测方法的相互补充和验证，能够更准确地评估大鼠的生殖生理状态和内分泌功能，为科研工作者提供更丰富的数据信息，助力科研成果的产出哦。在联用过程中，需注意不同检测方法之间的兼容性和样本处理要求的差异，合理规划实验流程，确保联用检测的顺利进行和结果的可靠性呀。

▍问11：如何验证试剂盒的灵敏度和准确性？

答：您可以通过以下几种方法来验证试剂盒的灵敏度和准确性哦。首先，您可以使用已知浓度的LH标准品进行检测，观察试剂盒能否准确检测出标准品的浓度，并且检测结果是否与标准品的实际浓度相符，以此来验证试剂盒的准确性。其次，您可以采用稀释法来验证试剂盒的灵敏度，即将含有低浓度LH的样本逐步稀释，然后使用试剂盒进行检测，观察试剂盒能否检测到浓度的LH以及检测结果是否稳定可靠，从而确定试剂盒的低检测限。此外，您还可以将该试剂盒与其他已知灵敏度和准确性的检测方法进行对比分析，对相同的样本进行检测，比较检测结果的一致性和相关性，以进一步验证试剂盒的性能哦。在进行验证实验时，建议您严格按照试剂盒说明书和相关标准操作规程进行，并设置适当的重复次数和对照组，以确保验证结果的科学性和可靠性呀。

更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

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