Epithelix 公司 AlveolAir™模型实用指南（2025 版）

本文为 Epithelix 公司 3D 分化人源体外肺泡上皮模型（AlveolAir™）的用户或新用户指南。

一、AlveolAir™技术说明

以下是 AlveolAir™模型的简要技术说明（非详尽版）：

Epithelix 公司生产的 3D 体外组织（AlveolAir™）由人源原代肺泡上皮细胞重组而成，具有以下特性：

◆由低传代（P2）的人源原代细胞构成。

◆每个组织均在标准 24 孔板的气液界面（ALI）中培养，采用 Transwell 插入式培养皿（Epithelix 公司产品编号 EP24W，聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）膜，孔径 1µm），每个插入式培养皿置于 24 孔板的一个孔中。

图 1：24 孔板及配套的 24 孔规格插入式培养皿

AlveolAir™模型为共培养模型：膜的顶侧（暴露于空气）为肺泡上皮细胞，膜的基底侧（浸没于培养基中）为内皮细胞。

图 2：AlveolAir™模型的阿利新蓝 - 苏木精 - 伊红（Alcian blue H/E）染色横截面

公司为 AlveolAir™模型定制了专用培养基以维持组织培养，订购时请务必同时订购培养基！

AlveolAir™模型可模拟体内组织的多种特性：

◆即开即用，充分分化，功能完备，稳定期长达 2 周（“使用期"）。注：总保质期为 3 周，其中包含约 1 周的运输时间。

◆在使用期内，两种细胞类型（1 型肺泡上皮细胞（AT1）和 2 型肺泡上皮细胞（AT2））的比例保持稳定（见图 3）。

◆可产生表面活性物质（SP-x 型）。

◆存在紧密连接，跨上皮细胞电阻（TEER）在使用期内保持稳定（见图 3）。

◆可释放可溶性因子（细胞因子、趋化因子等）。

◆批次间重复性优异。

◆适用于与 Epithelix 公司的原代肺泡巨噬细胞共培养。

图 3：AlveolAir™模型的共聚焦显微镜图像

二、订购流程

本节概述组织订购流程、常见问题及需注意的时间节点。

（一）库存与供货情况

AlveolAir™仅按需生产，自申请周起算，发货周期为 4-6 周。

最小订购量为 12 个单位（或 12 个 Transwell 插入式培养皿），无最大订购量限制。

（二）订购步骤

1.请先联系上海起发说明需求、咨询报价或供货情况。

2.我们将提供正式报价并告知交货时间表。重要提示：生产及发货日期一经确定，不可更改。

（三）其他信息

1.组织产品以标准 24 孔板为载体，置于营养凝胶中，包装在含保温块的恒温箱内发货。

2. 强烈建议客户在收到组织后，先培养 1/2 天再进行实验，以便组织从运输过程中恢复（详见第三节）。

三、接收与培养维护

收到组织后应如何操作？

（一）第 1 周 - 第 1 天

1.将组织接入培养环境（附录 1：AlveolAir™接入培养步骤）。请记录下最初写在培养皿盖子上的组织编号。

2.若部分组织的顶侧出现培养基，可能是运输过程导致。用连接真空泵的巴斯德吸管轻轻吸去培养基。

3. 将组织放入培养箱（37°C、100% 湿度、5% CO₂）。

（二）第 1 周 - 第五天

更换培养基（附录 2：更换培养基步骤）

（三）第 2 周 - 第一天

1.更换培养基（附录 2：更换培养基步骤）

2.可选操作：进行 TEER 测量以质控（附录 3：Epithelix 公司 TEER 测量 protocol）

此时组织可在接下来的 2 周内（稳定期）自由用于实验。欢迎分享您的使用体验！

如需更多信息，请联系上海起发

附录 1：AlveolAir™接入培养步骤

操作流程

收到产品后，请按以下步骤操作：

1. 在超净工作台中打开一个新的 24 孔板，向每个孔中加入 0.7ml 预热至 37°C 的 AlveolAir™专用培养基。

2.取下 AlveolAir™包装的盖子。

3.从包装盒中取出培养板。

4. 将培养板转移至超净工作台内。

5.用镊子将插入式培养皿从琼脂中取出，转移至步骤 1 中准备好的新培养板中。

6.将培养板放入培养箱进行常规培养（37°C、100% 湿度、5% CO₂）。

7. 每 2-3 天更换一次培养基。

附录 2：更换培养基步骤

培养基更换频率：每 3 天（或更频繁）更换一次，每次每孔加入 0.7ml 新鲜培养基；或每 2 天更换一次，每次每孔加入 0.5ml 新鲜培养基。

操作流程

1. 预热足量的 AlveolAir™专用培养基至 37°C。

2.从培养箱中取出培养板，在无菌超净工作台下取下盖子。

3.用连接真空泵的移液器或巴斯德吸管吸去所有孔中的培养基。

4.向每个孔中加入 0.5ml 或 0.7ml 培养基，注意避免将培养基洒入插入式培养皿内的组织上。

5.将培养板放入培养箱进行常规培养（37°C、100% 湿度、5% CO₂）。

附录 3：Epithelix 公司跨上皮细胞电阻（TEER）测量 protocol

实验材料

◆AlveolAir™专用培养基

◆EVOMX 上皮电压电阻仪及电极（STX2）或同等设备

◆ 0.9% 氯化钠溶液（货号 1000090，Bichsel 公司）

◆乙醇（货号 02855，Fluka 公司）

操作流程

1. 向 AlveolAir™的顶侧表面加入 200µl 预热的专用培养基。

2.打开 EVOMX 仪器，将电极在 70% 乙醇中清洗，仪器屏幕应显示：-1。

3.在生理盐水（0.9% NaCl）中清洗电极，仪器屏幕应显示：0.00。

4.将电极置于 AlveolAir™上，确保长电极杆穿过插入式培养皿的间隙并靠在孔底，短电极杆位于顶侧表面的培养基中。仪器屏幕将显示电阻值（Ω）。

5.轻轻吸去 AlveolAir™顶侧表面的培养基，注意不要损伤上皮细胞。

电阻值（Ω）换算为 TEER 值（Ω・cm²）的公式

TEER (Ω.cm²)=(resistance value (Ω)-100 (Ω))x0.33 (cm²)

◆100 Ω = 膜的电阻值

◆ 0.33 cm² = 上皮细胞的表面积

注：健康的 AlveolAir™组织 TEER 值应＞100 Ω・cm²。