本文档为 Epithelix 3D 充分分化人上皮组织的现有用户及新用户提供指导。
1.组织的技术描述
以下是对我们组织的简要(非详尽)技术说明:
Epithelix 公司生产源自人上皮上下呼吸道的 3D 体外重组组织(MucilAir™和 SmallAir™),具有以下特性:
•由低传代(P1 代)的原代人细胞构成。
•每种组织均在标准 24 孔板格式的 Transwell 插入式培养皿中,于气液界面(ALI)条件下培养。每个插入式培养皿置于 24 孔板的孔中。
图 1:24 孔板及 24 孔格式插入式培养皿
为 MucilAir™和 SmallAir™分别设计了专用培养基,以最大限度延长组织的保存期。订购时请勿忘记同时订购培养基!
•MucilAir™可提供鼻、气管或支气管来源的版本,订购时请注明。
•MucilAir-Pool™仅提供鼻来源版本(由 14 位不同供体的细胞混合而成)。
•SmallAir™由细支气管区域的细胞重组而成。
•所有产品均提供与成纤维细胞共培养的版本(HF 版本),请咨询库存情况。
我们的模型可模拟体内组织的特征:
•细胞类型完整:MucilAir™包含基底细胞、纤毛细胞和杯状细胞;SmallAir™包含基底细胞、纤毛细胞和克拉拉细胞。
•纤毛可功能性摆动,具备黏膜纤毛清除功能。
•可产生黏液。
•存在紧密连接。
•具备主动离子转运功能。
•具备代谢活性 / 解毒活性(CYP450 酶系)。
•可释放可溶性因子(细胞因子、趋化因子、金属蛋白酶等)。
•可维持分化状态及功能长达一年。
• 批次间重复性优异。
•即开即用。
2.订购流程
本部分概述组织订购流程、常见问题及需注意的时间节点。
库存与可获得性
我们每周都会重组生产需求最高的产品:支气管和鼻来源的 MucilAir™,以及鼻来源的 MucilAir-Pool™。这些产品通常可随时供应,但无论何种情况,均请先咨询库存!
部分产品需按需定制(例如:SmallAir™-CF 或 MucilAir-CF™):重组生产过程至少需要 6 周时间,之后方可发货。
大额订单也需提前预订。
订购步骤
1.请联系上海起发说明您的需求、咨询报价或库存情况。
2.我们将向您发送正式报价及交货时间表。
3.请提供包含准确交货地址和开票地址的正式采购订单(PO),相关信息将用于后续流程。
运输信息
•组织在营养凝胶中,置于标准 24 孔板内,包装在带有加热块的恒温箱中发货。
•强烈建议客户在收到组织后,先将其培养 2-3 天,以便组织从运输过程中恢复。
3.接收与培养维护
收到组织后应如何处理?
将组织接入培养(详见附录 1:MucilAir™与 SmallAir™接入培养流程)。
重要提示:收到组织后,需将其培养 2-3 天,以便组织从运输过程中恢复。
日常维护
•每周更换一次培养基(详见附录 2:培养基更换流程)。
•根据黏液产生情况,每 2-4 周进行一次顶端冲洗(详见附录 3:顶端冲洗流程)。
•在任何暴露实验前,建议提前 3 天进行顶端冲洗,以标准化重复样本中的黏液量。
附录 1:MucilAir™与 SmallAir™接入培养流程
操作步骤
收到产品后,请遵循以下步骤操作:
1.将培养板在 37°C(湿度 99%,CO₂浓度 5%)的培养箱中预热 1 小时。
注:此步骤非必需,但推荐执行,以方便将培养孔从凝胶中取出。
2.在超净工作台中打开一个新的 24 孔板
3.向每个孔中加入 0.7mL 预热至 37°C 的 MucilAir™专用培养基。
4.打开 MucilAir™的包装盖。
5. 从包装盒中取出培养板。
6. 将培养板转移至超净工作台中。
7.用镊子将插入式培养皿从凝胶中取出,转移至步骤 2 中准备好的新培养板中。
8.将培养板放入培养箱中常规培养(37°C,湿度 100%,CO₂浓度 5%)。
9. 每 2-3 天更换一次培养基。
(步骤 2、3、4、5、6、7 配图说明,原文略)
附录 2:培养基更换流程
培养基需每 3 天更换一次,每孔加入 0.7mL 新鲜培养基。(或每 2 天更换一次,每孔加入 0.5mL)
操作步骤
1.将足量的 MucilAir™或 SmallAir™专用培养基预热至 37°C。
2.从培养箱中取出培养板,在无菌超净工作台中打开培养板盖。
3.用连接真空泵的移液管或巴斯德吸管吸出所有孔中的旧培养基。
4.向每个孔中加入 0.5mL 或 0.7mL 新鲜培养基。注意不要将培养基洒到插入式培养皿内的组织上。
5.将培养板放入培养箱中常规培养(37°C,湿度 100%,CO₂浓度 5%)。
附录 3:顶端冲洗流程
操作步骤
1.向组织的顶端表面加入 200μL 预热至 37°C 的培养基。注意:顶端冲洗的总时长不得超过 30 分钟。
将培养板放入培养箱中常规培养(37°C,湿度 99%,CO₂浓度 5%)20 分钟。
2.(可选步骤)若黏液不浓稠,用 P200 移液管吸取 100μL 顶端液体,来回吹吸 3 次,以将黏液从顶端表面分离。
注意:切勿损伤上皮组织。
3.小心吸出组织顶端表面的培养基。
注意:切勿损伤上皮组织。
(步骤 1、2(可选)、3 配图说明,原文略)
更多产品信息,请联系中国区域代理商:上海起发实验试剂有限公司
如果您对任意产品或其他品牌感兴趣,可通过“在线留言"功能留下您的需求
(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
电话
QQ咨询
4006551678