🔍 基础信息
货号:TB1804R01
品名: Neuronal Activity Tissue Clearing Kit
品牌: Translucence Biosystems
📝原理
该试剂盒的核心原理是基于检测神经元激活后表达的即早基因(IEGs) 产物, specifically Npas4 and cFos。
1. 神经元活动标记: 当神经元被激活时,会迅速表达cFos和Npas4等即早基因。因此,这些蛋白的表达可以作为神经元近期活动的标志。
2. 双重标记,提高特异性:
●cFos:是一种广泛使用的神经元活动标志物,但其表达也可能由cAMP升高、神经营养因子等其他信号通路引发,特异性相对较低。
●Npas4:其表达由神经元活动下游的Ca2+依赖信号通路精确调控,作为纯神经元活动的标志物特异性更高。
3. 组织透明化: 试剂盒采用基于iDISCO+的改良透明化 protocol,通过一系列化学处理去除脂质等光散射物质,使整个大脑组织变得透明,从而允许光穿透整个样本。
4. 免疫荧光染色: 试剂盒内含经过验证的抗Npas4抗体和抗cFos抗体,以及相应的荧光标记二抗(Npas4-568呈红色,cFos-647应呈远红色,图示中可能做了颜色调整)。通过免疫荧光染色,在透明的全脑样本上对这两种活动标志物进行标记。
5. 成像与量化: 使用显微镜(如光片荧光显微镜)对透明的全脑进行三维成像,可以在单细胞分辨率下获得整个大脑中所有被激活神经元的分布图。通过同时观察cFos和Npas4的表达模式(共表达或独立表达),可以更全面、特异地区分神经元活动和其他信号机制。
❓解决实验中哪些问题
1. 传统二维切片的局限性: 解决了传统石蜡/冰冻切片只能观察大脑极少数切面,无法获得全脑范围活动图谱的问题,避免了采样误差。
2. 神经元活动标志物的特异性问题: 通过同时检测Npas4和cFos,帮助研究人员更准确地区分真实的神经元活动和其他非特异性信号激活,提高结论的可靠性。
3. 全脑三维成像的技术门槛: 提供了一个标准化、用户友好的完整解决方案(从透明化、染色到成像方案),降低了实现全脑透明化成像的技术难度和设备要求,使更多实验室能够开展此类研究。
4. 大数据分析的挑战: 提供(折扣价的)AI驱动的三维量化服务,帮助用户处理全脑成像产生的海量数据(TB级),自动识别和计数被激活的细胞。
📌优势
1. 全面且特异: 同时检测两种互补的即早基因,提供更全面的神经元活动信息。
2. 高分辨率: 实现全脑范围的细胞分辨率成像,不漏掉任何一个被激活的细胞。
3. 即用型试剂盒: 包含所有必要的缓冲液、抗体和耗材,可处理5个小鼠全脑。
4. 用户友好: 无需丰富的经验或特殊的实验室设备,按照提供的标准化流程即可获得高质量结果。
5. 流程清晰: 提供详细的Protocol日历,明确每个步骤所需时间,便于研究者规划和跟踪实验进度。
6. 强大的支持 ecosystem: 除了产品,还提供配套的成像、数据分析(AI量化)和科学家支持等一站式服务。
👥客户群体
该产品主要面向神经科学研究领域的科学家和研究人员,特别是:
●研究大脑功能环路(神经环路)的实验室。
●从事行为学(如学习记忆、恐惧、成瘾)、药理学(药物对全脑活动的影响)或遗传学(如特定基因敲除对脑功能的影响)研究的团队。
●希望从传统二维切片分析升级到更全面的三维全脑分析的研究人员。
●需要高通量、可重复地绘制全脑神经元活动图谱的实验室。
📋 订货信息
●产品内容: 试剂盒包含处理5个小鼠全脑所需的所有试剂、抗体和耗材。
●订购方式: 上海起发
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