澳大利亚Biosensis公司Fluoro-Jade C (FJC) 退化神经元染色试剂盒介绍

一、基础信息  

1. 产品货号与名称  

  - 货号：TR-100-FJT、TR-100-FJ

  - 英文名称：Fluoro-Jade C (FJC) Ready-to-Dilute Staining Kit for identifying Degenerating Neurons  

  - 中文名称：Fluoro-Jade C (FJC) 退化神经元染色试剂盒

2. 规格与品牌  

  - 规格：20 mL、40mL

  - 品牌：Biosensis

二、核心原理  

1. Fluoro-Jade C 的化学特性  

  Fluoro-Jade C（FJC）是一种阴离子荧光素衍生物，通过特殊化学修饰增强了与变性神经元的亲和力。其分子结构包含多个羧基基团，使其在生理条件下带负电荷，能够特异性结合变性神经元膜表面暴露的酸性磷脂和变性蛋白质（如磷酸化神经丝）。  

2. 染色机制  

  - 变性神经元识别：当神经元发生退行性变时，细胞膜通透性增加，酸性成分暴露。FJC通过静电相互作用和疏水效应结合这些成分，形成稳定的荧光标记。  

  - 高分辨率成像：FJC的激发峰为495 nm，发射峰为521 nm，与FITC滤光片兼容，可清晰显示退化神经元的胞体、树突、轴突及末端形态，分辨率显著优于传统银染和早期Fluoro-Jade染料（如FJ、FJB）。  

  - 抗褪色性能：FJC分子结构中的刚性平面设计使其具有优异的抗光漂白能力，染色结果可长期保存（4℃避光保存数周），适合高分辨率共聚焦显微镜成像。  

三、解决实验中的关键问题  

1. 传统方法的局限性  

  - 银染技术：操作繁琐、耗时（需2-3天），且无法与免疫荧光标记兼容，难以实现多重染色。  

  - TUNEL法：仅检测DNA断裂，无法显示神经元整体形态，且对早期变性神经元不敏感。  

  - 硫黄素S等染料：特异性差，易与淀粉样斑块非特异性结合，背景干扰严重。  

2. FJC染色的突破性解决方案  

  - 全阶段变性神经元检测：可同时标记凋亡、坏死和自噬性死亡的神经元，覆盖从早期胞体肿胀到晚期轴突断裂的完整退变过程。  

  - 形态学与功能学结合：在显示神经元退变的同时，可与NeuN、TH等抗体进行多重染色，明确退变神经元的类型和功能状态。  

  - 多组织兼容性：适用于新鲜冷冻、多聚甲醛/福尔马林固定及石蜡包埋组织，无需复杂预处理即可获得高质量染色结果。  

四、技术优势  

1. 即用型设计，简化实验流程  

  - 试剂盒包含FJC染色液、DAPI复染液、氢氧化钠和KMnO₄，无需自行配制，直接使用。  

  - 标准化操作步骤：组织切片经固定、通透化后，只需依次浸入KMnO₄（消除背景）、FJC染色液（30分钟）和DAPI（5分钟），全程可在2小时内完成。  

2. 高灵敏度与特异性  

  - 信噪比优势：FJC的信号背景比显著高于FJB和硫黄素S，在低倍镜下即可清晰观察退变神经元的分布，尤其适合大样本定量分析。  

  - 非特异性染色控制：通过KMnO₄预处理消除组织内自发荧光，结合DAPI复染细胞核，可有效区分神经元与血管、胶质细胞等非特异性染色。  

3. 兼容性与灵活性  

  - 多重荧光标记：FJC的激发/发射光谱与Alexa Fluor 488、Cy3等常用荧光素无重叠，可与β-淀粉样蛋白（Aβ）、磷酸化tau蛋白等抗体联合使用，实现退变神经元与病理标志物的共定位分析。  

  - 跨物种应用：已在小鼠、大鼠、猴及人类脑组织中验证，适用于多种神经退行性疾病模型（如5×FAD转基因小鼠、MPTP诱导的PD模型）。  

4. 抗干扰与稳定性  

  - 抗组织处理干扰：对福尔马林固定、石蜡包埋等剧烈处理具有耐受性，染色结果重复性高。  

  - 长期保存性能：未开封试剂盒可在4℃稳定保存12个月，稀释后的染色液需在4小时内使用以确保最佳效果。  

五、应用场景与客户群体  

1. 核心应用领域  

  - 神经退行性疾病研究：  

    - 阿尔茨海默病（AD）：检测Aβ斑块周围的退变神经元，研究突触丢失与认知功能的关系。  

    - 帕金森病（PD）：在MPTP诱导的小鼠模型中，定位黑质致密部（SNc）多巴胺能神经元的退变过程。  

    - 肌侧索硬化（ALS）：分析脊髓运动神经元的轴突退变与胶质细胞反应。  

  - 神经损伤与修复研究：  

    - 脑缺血模型：检测缺血半暗带神经元的退变动态，评估溶栓治疗效果。  

    - 脊髓损伤模型：追踪轴突再生过程中退变轴突的清除效率。  

  - 药物研发与毒性评估：  

    - 神经保护药物筛选：在细胞或动物模型中验证候选药物对退变神经元的保护作用。  

    - 神经毒性评价：评估药物、重金属等对中枢神经系统的损伤机制。  

2. 目标客户群体  

  - 科研机构与高校：神经科学、病理学、药理学实验室，用于基础机制研究和论文发表。  

  - 生物医药企业：药物研发部门，用于神经退行性疾病药物的临床前模型验证。  

  - CRO公司：提供外包染色服务，支持药物毒理学评价和病理分析。  

六、订货信息  

1. 中国代理商：上海起发

2. 注意事项  

  - 价格咨询：产品价格需通过代理商获取，根据订购量可享批量折扣。  

  - 运输与保存：试剂盒需4℃避光保存，运输过程中使用冰袋确保稳定性。  

  - 实验建议：  

    - 组织切片需充分固定（多聚甲醛或福尔马林），避免非特异性染色。  

    - 染色后切片应避免长时间暴露于强光下，建议使用抗褪色封片剂（如含DAPI的SlowFade Gold）。  

    - 新鲜稀释的FJC染色液好用，剩余溶液可冷藏避光保存48小时，但需在使用前过滤以去除沉淀。  

七、技术验证与典型案例  

1. 实验流程验证  

  - 组织处理：取MPTP诱导的PD小鼠中脑切片，经4%多聚甲醛固定后，依次用KMnO₄（0.01%）处理5分钟、FJC染色液孵育30分钟、DAPI复染5分钟，封片后在荧光显微镜下观察。  

  - 结果显示：黑质致密部（SNc）可见大量FJC阳性神经元，胞体皱缩、树突断裂，与TH免疫荧光染色结果共定位，证实退变神经元为多巴胺能神经元。  

2. 多重染色应用  

  - 实验设计：在5×FAD转基因小鼠脑切片中，同时进行FJC染色和Aβ免疫荧光标记（Alexa Fluor 594偶联抗体）。  

  - 结果显示：FJC阳性神经元环绕Aβ斑块分布，提示斑块周围神经元退变与Aβ沉积密切相关。  

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