​杂交瘤技术概述 - Creative Biolabs

杂交瘤技术概述 - Creative Biolabs

“Creative Biolabs 致力于以品质提供高度定制化的综合解决方案，以推进全球客户的研究项目。"

1975年，Kohler 和 Milstein 开发了杂交瘤技术。该技术将产生抗体的 B 细胞与永生性癌细胞系融合，从而创建出能够无限期产生抗体的永生化杂交瘤细胞系。杂交瘤技术是现代研究中应用广泛的技术之一。

针对不同研究目标，研究人员会采用多样化的免疫策略来获取 B 细胞。当动物的血清中产生足量抗体后，将对其进行优化。

取出已处死动物的脾脏，并在无菌条件下分离活化的 B 细胞。通过 ELISA 等检测方法鉴定血清中由活化 B 细胞产生的抗体。随后，将这些活化的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合。

在细胞融合前几周，需在 8-氮杂鸟嘌呤中培养转移性肿瘤细胞，以获得次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）基因功能缺失的骨髓瘤细胞（这是杂交瘤技术的方法）。

细胞融合是将活化的 B 淋巴细胞与 HAT 敏感型骨髓瘤细胞进行融合的过程。在此步骤中，将新鲜获取的活化 B 细胞与 HAT 敏感型骨髓瘤细胞在促融介质中离心混合。电融合是另一种融合方法，即细胞在电场作用下发生融合。

即使采用高效的融合技术，也只有 1–2% 的细胞能成功形成杂交瘤细胞。因此，杂交瘤筛选至关重要。目前的筛选主要是在 HAT 培养基中孵育细胞混合物 10–14 天。在此过程中，氨基蝶呤的存在阻断了细胞通过从头合成途径合成核苷酸的能力。而次黄嘌呤和脱氧胸苷则使携带功能性 HGPRT 基因的细胞能够通过补救途径存活。因此，源自 B 淋巴细胞并携带功能性 HGPRT 基因的杂交细胞得以存活，而未融合的 B 细胞和恶性肿瘤细胞则被淘汰。

对杂交瘤进行筛选，挑选出能产生针对抗原特定表位抗体的克隆。

在大型培养容器或培养瓶中克隆并增殖杂交瘤细胞。

目前，单克隆抗体可通过体外和体内两种方式生产。在体内，通常使用小鼠腹水法生产单克隆抗体；而在体外，则是培养杂交瘤细胞并利用培养基分离单克隆抗体。

图 1. 杂交瘤技术的应用。(Mitra, S., et al., 2021)

Creative Biolabs 很高兴能分享我们在杂交瘤领域的专业知识与经验，以促进客户的研究。

杂交瘤技术的优势

1.产生高纯度和高特异性的抗体。

2.高度可重现且可扩展。

3.用于进行高灵敏度和高特异性的检测。

4.抗体可以通过体外方法获得。

5.抗原或免疫原的纯度并非必要条件。

6.有助于识别针对特定抗原的正确克隆。

7.体内抗体的产生确保了可变结构域和恒定结构域的混合形成。所产生的抗体对目标物质的表位具有高亲和力。

8.一旦杂交瘤细胞稳定，即可获很多供应的高性价比均质抗体。

9.广泛应用于疫苗生产研究。

10.杂交瘤抗体生产广泛应用于诊断和治疗程序中。

参考声明

所列的所有服务和产品均仅供研究使用（For Research Use Only），不得用于任何诊断或治疗用途。

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（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）