🧬 产品描述
产品全称:Human Anti-LAM Recombinant Antibody
中文名称:重组人源抗脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗体
国际货号:HPAB-M0560-YC
宿主物种:Human(人源)
抗体类型:Human IgG, κ(可根据需求调整为 IgM 或 IgA)
特异性靶点:LAM(Liparabinomannan,脂阿拉伯甘露聚糖)
交叉反应性:Mycobacterium Tuberculosis(结核分枝杆菌)
核心应用:ELISA、Western Blot、Microarray(微阵列)、Blocking(阻断实验)
蛋白纯度:>95%(经还原型SDS-PAGE与SEC-HPLC双重验证)
标准浓度:具体浓度详见每支产品标签(典型范围:0.5 mg/mL - 2.0 mg/mL)
保存缓冲液:1x PBS(磷酸盐缓冲液,pH 7.4)
防腐剂:无(生产及冻存过程未添加叠氮钠或硫柳汞等防腐剂)
产品形态:无菌过滤液体(于无菌条件下分装至低吸附EP管中)
品牌归属:Creative Biolabs
本产品是一款利用前沿基因工程技术与重组抗体表达体系制备的高特异性免疫检测试剂。它靶向结核分枝杆菌细胞壁上的特征性糖脂抗原——脂阿拉伯甘露聚糖(LAM),并能表现出高的结合亲和力。依托于成熟的Hi-Affi™重组抗体开发平台,该抗体不仅在分子层面上实现了序列的精准定义,还在表达纯化过程中去除了内毒素与宿主DNA残留,确保了在临床前研究与体外诊断(IVD)原料筛选中的绝对安全性与合规性。

🔬 产品背景与工作原理
脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)的生物学意义
LAM(Liparabinomannan)是结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis)及相关非结核分枝杆菌细胞壁中含量丰富、结构最复杂的糖脂分子。它由甘露聚糖骨架、阿拉伯糖侧链以及磷脂酰肌醇帽结构组成。在结核菌的感染周期中,LAM不仅维持着细菌细胞膜的完整性,更作为关键的毒力因子,通过调节宿主巨噬细胞的凋亡通路、抑制吞噬体-溶酶体融合来帮助病原体在宿主细胞内长期潜伏。此外,LAM会从代谢活跃的结核杆菌中释放到外周血液或尿液中,这使其成为开发结核病(TB)无创诊断标志物的“黄金靶点"。
重组抗体的作用机制
本产品通过基因重组技术,将特异性识别LAM表位的抗体重链与轻链基因克隆至表达载体中,并在哺乳动物细胞(如HEK293)或无血清原核系统中进行大规模发酵表达。其工作原理基于经典的抗原-抗体特异性结合反应:当该重组抗体与样本中的LAM分子相遇时,其互补决定区(CDR)会通过疏水作用、氢键和范德华力与LAM的阿拉伯糖帽或甘露糖核心发生高亲和力的立体构象契合。这种特异性结合可以作为“分子探针",在后续加入二抗(如HRP标记的抗人IgG)及底物显色系统后,实现信号的指数级放大,从而完成对极低丰度LAM抗原的精准定性或定量分析。
✨ 产品核心特点
1. 纯度与均一性
传统腹水制备的多克隆抗体往往伴随着大量的杂蛋白,严重影响实验的信噪比。本产品经过蛋白A/G亲和层析以及精细的离子交换层析纯化,最终纯度经SEC-HPLC(体积排阻高效液相色谱)测定高达95.33%以上。在还原型SDS-PAGE电泳中,仅呈现清晰的约50 kDa重链和25 kDa轻链条带,无杂带干扰。
2. 批次间一致性
得益于确定的基因序列和标准化细胞培养工艺,该重组抗体摆脱了传统杂交瘤技术因染色体丢失或培养条件波动导致的“飘变"风险。每一批次的HPAB-M0560-YC在亲和力常数(KD值)、表位识别位点及效价上均保持高度一致,为需要长期追踪的大规模队列研究或体外诊断试剂盒的注册申报提供了坚实的保障。
3. 动物成分零残留(Animal-Free)
在研发与生产全链条中,未使用任何动物源性酶类或血清,极大地降低了实验中因宿主残留蛋白引发的非特异性背景干扰,满足下游细胞功能学实验及人体临床诊断的原料安全标准。
4. 多应用场景的广泛兼容性
无论是在高通量ELISA板孔中捕捉游离的LAM抗原,还是在Western Blot中锁定经过SDS-PAGE分离变性的糖脂条带,亦或是在微阵列芯片上作为捕获探针,该抗体均能展现出线性宽广、背景极低的优异性能。
🛡️ 解决的实验痛点
在使用传统抗体制备方法进行结核抗原检测时,科研人员常常面临以下令人棘手的难题:
• 灵敏度不足导致假阴性:传统多抗对LAM这类糖脂抗原的亲和力较弱,当患者处于结核感染早期或免疫力低下时,体液中微量的LAM无法被有效捕获,从而导致漏检。本产品凭借重组技术定向筛选出的高亲和力克隆,将检测下限(LoD)推进了一个数量级。
• 特异性交叉引发假阳性:结核分枝杆菌与其他环境中的腐生分枝杆菌在细胞壁成分上具有高度同源性。普通抗体极易发生交叉反应,而本产品通过严苛的阴性/阳性筛选,确保只对M. Tuberculosis来源的LAM产生特异性应答。
• 试剂批间差破坏数据连续性:长期纵向研究(Longitudinal Study)需要数年的随访检测,传统抗体每批次的差异会导致历史数据无法与新数据在同一个统计学模型中对齐。本产品的无限增殖特性解决了这一痛点。
• 下游偶联困难:传统抗体含有大量BSA或明胶保护剂,在生物素化或荧光标记时效率极低。本产品溶于纯净的PBS中,为科研人员进行下游化学偶联改造提供了极大的便利。
🧊 储存与复溶规范
为了保证您手中的每一瓶 HPAB-M0560-YC 都能发挥出标称的最佳性能,请务必严格遵守以下储存与操作规范:
短期储存(1 - 2周)
收到产品后,请将其直立放置于 2℃ - 8℃ 的家用冰箱冷藏室中保存。在此期间,尽量避免反复拿取导致温度剧烈波动。
长期储存(-20℃ 及以下)
若计划在超过两周的时间内不使用该产品,强烈建议进行分装(Aliquot)。使用低吸附性的无菌离心管,每管分装 10 μL 至 50 μL(根据日常单次使用量而定)。置于 -20℃ 独立冷冻室中避光保存。在此条件下,抗体的活性可稳定保持至少 24 个月。
操作注意事项(极其重要)
1. 开盖前离心:在运输过程中,少量抗体粉末或液体会粘附在管盖或管壁上方。请在开盖前,使用微型离心机以 10,000 rpm 的转速离心 30 秒,确保全部试剂沉降至管底。
2. 避免反复冻融:反复冻融会导致蛋白质发生不可逆的聚集和变性,从而使效价大幅下降。这就是为什么我们强烈要求您进行预分装的原因。一旦从 -20℃ 取出解冻,若一次未用完,切勿再次冻存,只能转移至 4℃ 并在一周内尽快用完。
3. 缓冲液兼容性:本产品以纯净 PBS 配制。如果您需要在特定缓冲液(如碳酸盐包被液、Tris缓冲液)中进行实验,请使用相应缓冲液稀释抗体,并注意最终pH值应维持在 7.0 - 7.6 之间,以防抗体失活。
🧪 使用方法与操作规程
为了帮助您快速上手并获得可重复的优质数据,我们针对该抗体适用的四大核心应用场景,提供了经过内部优化的基础实验方案。您可以根据自己实验室的具体条件在此基础上进行微调。
1. ELISA(酶联免疫吸附测定)方案
ELISA 是本产品最常应用的场景,主要用于定量检测临床尿液、血清或培养上清中的游离 LAM 抗原。
• 包被(Coating):使用 0.05 M 碳酸盐包被缓冲液(pH 9.6)将 HPAB-M0560-YC 稀释至 2 - 5 μg/mL。向每个 ELISA 板孔中加入 100 μL,封板后置于 4℃ 孵育过夜(12-16小时)。
• 封闭(Blocking):甩干包被液,每孔加入 200 μL 含 3% BSA 或 5% 脱脂奶粉的 PBST 缓冲液,37℃ 孵育 1-2 小时,以降低非特异性吸附。
• 加样与孵育:用 PBST 洗涤液洗板 3 次。加入梯度稀释的 LAM 标准品或待测样本(100 μL/孔),37℃ 孵育 1 小时。
• 加酶标二抗:洗板 3 次。加入 HRP 标记的抗人 IgG(或 IgM,视一抗亚型而定)二抗,37℃ 孵育 45 分钟。
• 显色与终止:洗板 5 次。加入 TMB 显色底物(100 μL/孔),避光反应 10-15 分钟。加入 1 M 硫酸终止液(50 μL/孔)。使用酶标仪在 450 nm 波长下读取 OD 值。
2. Western Blot(蛋白质印迹)方案
Western Blot 主要用于确认样本中 LAM 的分子量大小(通常在 20-40 kDa 范围内迁移,但因糖基化程度不同会呈现弥散条带)。
• 电泳与转膜:将提取的样本与 5x 上样缓冲液混合后煮沸变性。进行 SDS-PAGE 电泳分离,随后通过湿转法或半干转法将蛋白转移至 PVDF 或 NC 膜上。
• 封闭:使用 5% 脱脂牛奶或 BSA 的 TBST 缓冲液室温封闭膜 1 小时。
• 一抗孵育:用 TBST 稀释 HPAB-M0560-YC(建议起始稀释比例为 1:1000 - 1:5000),将膜浸入一抗溶液中,4℃ 平缓摇动孵育过夜。
• 二抗孵育与显影:TBST 洗膜 3 次,每次 5 分钟。加入 IRDye 800CW 标记的抗人二抗(1:10000 稀释),室温避光孵育 1 小时。再次洗膜后,使用 Odyssey 双色红外激光成像系统或化学发光底物进行显影定影。
3. Microarray(微阵列/芯片)方案
用于高通量筛选或多重检测。
将 HPAB-M0560-YC 用打印缓冲液(如 ArrayIt Spotting Solution)稀释至 0.1 - 0.5 mg/mL。使用微阵列打印机器人将其点样于醛基化玻片或 384 孔板上。点样后在湿度控制环境中室温干燥过夜,随后进行紫外线交联固定。后续步骤与 ELISA 类似,依次进行封闭、样本孵育、荧光二抗孵育及芯片扫描。
4. Blocking(阻断/中和)实验方案
用于细胞水平的结核感染机制研究。
在体外培养的巨噬细胞(如 THP-1 或 Raw264.7)感染结核分枝杆菌前,预先在培养基中加入 HPAB-M0560-YC(终浓度 10 - 50 μg/mL)。抗体将与培养基中游离的 LAM 结合,或在细菌表面占据 LAM 位点,从而阻断 LAM 与宿主细胞表面 C型凝集素受体(如 Dectin-2)的结合,进而观察由此引发的细胞因子(TNF-α, IL-6)分泌水平变化。
⚠️ 常见问题与解决方案(Troubleshooting)
在实验过程中遇到挫折是科学研究的一部分。我们整理了全球用户在使用同类重组抗LAM抗体时最常遇到的八大问题,并提供了详尽的分析与对策。
问题一:ELISA 读数过低,无法拟合标准曲线
• 可能原因 A:包被条件不佳。LAM 作为糖脂,容易在酸性环境下解离。
◦ 解决方案:确保包被缓冲液 pH 值严格控制在 9.4 - 9.8 之间;尝试延长包被时间至 48 小时(4℃);或在包被液中加入 10 mM MgCl₂ 以增强糖脂与塑料板的吸附力。
• 可能原因 B:一抗效价下降。
◦ 解决方案:检查抗体储存历史,若存在反复冻融,请更换新分装管;适当提高一抗的孵育浓度。
问题二:Western Blot 出现高背景或非特异性杂带
• 可能原因 A:封闭不够。
◦ 解决方案:LAM 具有较强的疏水性,建议使用 5% 脱脂牛奶 + 0.1% Tween-20 进行强化封闭;或在封闭液中添加 0.1% 的鱼明胶(Fish Gelatin)。
• 可能原因 B:二抗交叉反应。
◦ 解决方案:本产品为人源抗体,若使用过氧化物酶标记的二抗,需确认二抗是否去除了Fc段的交叉吸附(Pre-adsorbed)。建议使用 Fab 段特异性的二抗。
问题三:实验重复性极差(CV值 > 15%)
• 可能原因:移液操作误差或洗板机流速不均。
• 解决方案:在稀释标准品时,务必使用校准过的移液器并更换低吸附吸头;如果是洗板导致,检查洗液瓶是否有气泡,增加洗板停留时间(Soak time)至 60 秒。
问题四:在细胞阻断实验中未见预期表型改变
• 可能原因 A:抗体无法接触靶点。
• 解决方案:LAM 深埋于结核菌厚厚的荚膜中。建议在感染前使用超声破碎或轻微皂苷(Saponin)透化处理细菌,使抗体能够真正接触到 LAM 表位。
• 可能原因 B:浓度不足。
• 解决方案:进行预实验,使用 1, 10, 50, 100 μg/mL 的梯度浓度测试细胞毒性及中和效率。
问题五:产品解冻后出现轻微浑浊或沉淀
• 可能原因:蛋白质在冻融过程中发生聚集,或因长期存放产生了微量聚合物。
• 解决方案:切勿剧烈震荡。将管子插在碎冰上,使用超声波水浴锅轻柔震荡 1 分钟使其重新溶解;若沉淀无法溶解,可于 4℃ 下以 12,000 rpm 离心 10 分钟,小心吸取上清液分装使用。
问题六:SEC-HPLC 检测纯度低于产品检验报告(COA)
• 可能原因:缓冲液中含有高浓度盐离子或去垢剂,影响了色谱柱分离效果。
• 解决方案:上样前务必使用脱盐柱(Desalting Column)将抗体置换至 HPLC 兼容的等度洗脱液(如 150 mM 磷酸钠缓冲液,pH 7.0)中。
问题七:进行抗体偶联(如生物素化)后失去结合能力
• 可能原因:偶联反应中使用的溶剂(如DMF、DMSO)比例过高,导致抗体变性。
• 解决方案:严格控制有机相比例不超过 5%(v/v);偶联反应需在 pH 8.0 - 8.5 的硼酸盐缓冲液中进行;反应结束后立即使用 PD-10 脱盐柱去除游离生物素。
问题八:微阵列点样后容易脱落
• 可能原因:点样浓度过低或玻片表面醛基活性丧失。
• 解决方案:将 HPAB-M0560-YC 与点样缓冲液按 1:1 混合后点样;在点样环境中放置饱和硫酸铜溶液以维持 70% 左右的相对湿度,防止液滴在点样过程中过度蒸发。
📜 安全与免责声明
1. 安全防护:尽管本产品经过严格的无菌及无热原处理,但仍属于生物源性制剂。操作过程中请始终穿戴实验服、佩戴一次性手套和护目镜。避免产生气溶胶,切勿用口吸移液器。
2. 废弃物处理:所有接触过本产品的吸头、离心管及残余液体均视为潜在的生物危害废弃物。必须经过 10% 漂白剂或 75% 酒精浸泡消毒至少 30 分钟后,方可作为医疗垃圾处理。
3. 应用限制声明:本产品(HPAB-M0560-YC)仅供经过专业培训的科研人员或诊断机构实验室使用。除非另有明确书面授权,不得直接用于人体或动物的体内诊断、治疗或注射。
关键词:Human Anti-LAM重组抗体、HPAB-M0560-YC、结核分枝杆菌LAM抗原检测、脂阿拉伯甘露聚糖抗体、重组人源化IgM抗体、Western Blot糖脂抗原检测、ELISA试剂盒原料抗体、高纯度LAM单克隆抗体、无动物源成分抗体、生物素标记LAM抗体、结核菌快速诊断试剂、抗体药代动力学研究、Creative Biolabs代理、重组抗体制备服务、IgG/IgM亚型切换、高特异性多克隆抗体、低交叉反应抗体、磷酸盐缓冲液保存抗体、SDS-PAGE验证抗体、SEC-HPLC纯度检测
更多产品信息,请联系中国区域代理商:上海起发实验试剂有限公司
(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
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PABL-322-1mg | Recombinant Human Anti-RSV Antibody (D25) | 1mg | Creative Biolabs |
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CTS-011 | Mouse C57BL6 Complement Serum | 5ml | Creative Biolabs |
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ADC-AA-043 | anti-Rat IgG(Fc)Fab-C-MMAE ADC | 50ug | Creative Biolabs |
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MP0008J | Magic™ Membrane Protein Human HSD17B13 (Hydroxysteroid 17-beta dehydrogenase 13) for Antibody Discovery | 0.02mg | Creative Biolabs |
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CBMAB-T1095-YJ-1mg | Mouse Anti-Tarm1 Recombinant Antibody (CBYJT-2004) | 1mg | Creative Biolabs |
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PABZ-017-500ug | Mouse Anti-CA9 Recombinant Antibody (clone M75) | 500ug | Creative Biolabs |
TAB-1105CL-5mg | Human Anti-VTCN1 Recombinant Antibody SDS-PAGE>95% | 5mg | Creative Biolabs |
MOB-0402ZL-5mg | Human IgG1, kappa - Isotype Control Antibody SDS-PAGE>95% | 5mg | Creative Biolabs |
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CBMM500 | Magic mRNA Transfection Reagent-500 | 500uL | Creative Biolabs |
PABZ-017 | Mouse Anti-CA9 Recombinant Antibody (clone M75) | 1mg | Creative Biolabs |
VAdv-Ly0079 | Synthetic Poly(I:C) (Polyinosinic-Polycytidylic) (VAdv-Ly0079) | 10mg | Creative Biolabs |
MHC-LC091 | A*02:01/Human NY-ESO-1 (SLLMWITQC) MHC Tetramer | 1 vial | Creative Biolabs |
TAB-189 | Human Anti-ERBB3 Recombinant Antibody | 100mg | Creative Biolabs |
TP-098CL-1mg | Palivizumab Biotin标记,SDS-PAGE>95% | 1mg | Creative Biolabs |
TAB-568CL | Anti-Human SIGLEC15 Therapeutic Antibody (AB-25E9) | 500ug | Creative Biolabs |
MP0224F | Magic™ Antibody Discovery - Human Integrin alpha 2 beta 1 (30-1132(ITGA2)&21-728(ITGB1)) Membrane Protein, Partial, -His Tag & Tag free | 100ug | Creative Biolabs |
PABS-0236-1MG | Human Anti-RSV F Recombinant Antibody (clone MPE8) | 1MG | Creative Biolabs |
PABL-321-HRP | Recombinant Human Anti-RSV Antibody (AM14) HRP偶联 | 2mg | Creative Biolabs |
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TAB-360CT-1mg | Anti-Human RSV-F Therapeutic Antibody (D25) Biotin标记,SDS-PAGE>95% | 1mg | Creative Biolabs |
CBMAB-N4308-WJ | Mouse Anti-SON Recombinant Antibody (C-10) | 200ug | Creative Biolabs |
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TAB-653LC-5mg | Anti-human IL32 Therapeutic antibody (2C2) (CAT#: TAB-653LC) | 5mg | Creative Biolabs |
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PABL-321--1mg | Recombinant Human Anti-RSV Antibody (AM14) Biotin标记,SDS-PAGE>95% | 1mg | Creative Biolabs |
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MHC-LC3193 | BV421-A*02:01/Human CEACAM5 (IMIGVLVGV) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC137 | PE-A*02:01/Human CEA (YLSGADLNL) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC3101 | PE-A*02:01/Human ERBB2 (KIFGSLAFL) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC007 | PE-A*02:01/Human Her-2/neu (RLLQETELV) MHC Tetramer | ea | Creative Biolabs |
MHC-LC3112 | PE-A*02:01/Human TP53 (KTCPVQLWV) MHC Tetramer (CAT#: MHC-LC3112) | ea | Creative Biolabs |
MOB-400CQ-1mg | Mouse Anti-T7 RNA Polymerase Antibody (CBL-C001) (CAT#: MOB-400CQ) | 1mg | Creative Biolabs |
GBG0078S | Blood group H [BSA] | 1mg | Creative Biolabs |
TAB-388CT | Anti-Human SOST Therapeutic Single Domain Antibody (6-E12) | 10mg | Creative Biolabs |
AGM-034YJ | Mouse Anti-CD77 Monoclonal Ant | 100ug | Creative Biolabs |
HPAB-2032-FY | Human Anti-VZV Recombinant Antibody (clone 10) | 100ug | Creative Biolabs |
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