Diagnostic BioSystems（ K002）CC/Mount™ 水溶性封片剂产品介绍-上海起发

一、产品描述

产品中文名称： CC/Mount™ 水溶性封片剂（亦称水性封固介质/水性 mounting medium）

产品英文名称： CC/Mount™ Aqueous Permanent Mounting Medium

品牌： Diagnostic BioSystems（简称DBS，美国诊断生物系统公司）

目录货号（Catalog Number）： K002

常见规格： 30 mL 瓶装（透明粘稠、即用型液体）

产品形态： 澄清粘稠液体（Clear viscous ready to use mounting medium），水性基质，无需复溶或稀释，开瓶即可直接使用

主要防腐成分备注： 本品含有Sodium Azide作为防腐剂组分，操作中请参照实验室化学品安全规范进行接触防护与废弃物处置

预期用途声明： 本产品专为体外诊断及科研用途设计（For In Vitro Diagnostic Use / For R&D use），适用于经免疫组织化学（IHC）染色、原位杂交染色及各类显色/荧光标记后的组织切片之封片保存

二、产品概述与适用范围

在现代病理学与生命科学研究中，组织切片经过免疫组化染色（过氧化物酶系统如 HRP/DAB、碱性磷酸酶系统如 AP/Fast Red 等）或免疫荧光染色后，如何将这些来之不易的染色结果稳定地固化下来、实现长期存档且光学品质不劣化，始终是日常制片流程里最关键的一步收尾环节。传统的水性封片剂虽然操作安全，但往往折射率偏低，干燥后组织看起来灰蒙蒙的，缺乏脱水透明后有机封片剂那种清亮通透的质感；而传统的有机封片剂（如二甲苯系/甲苯系 mountant）虽然成像效果好，却伴随挥发性有机溶剂气味、需要严格脱水步骤、并且会使某些水性显色底物（如 AEC）溶解褪色，对荧光染料也构成光漂白加速风险。

CC/Mount™ 正是为了在上述矛盾中寻找一个可操作的平衡点而被开发出来的一种水性基质、但具备高折射率的封固介质。它在配方设计上将水性介质的光学属性推向接近有机 mountant 的表现区间，使得染色组织切片在不经有机溶剂脱水的前提下，也能呈现出接近"脱水透明标本"的清晰外观；同时凭借其偏碱性的 pH 环境，为荧光信号提供额外的稳定性支撑。由于它是水基体系，因此与 AEC 等有机不溶性但水敏感的显色底物兼容性良好——这也是它在 IHC 双路径（DAB 路径 / AEC 或 Fast Red 路径）实验室里被反复选用的核心原因之一。

本品适用于但不限于以下染色体系的切片封固保存：

过氧化物酶（Peroxidase）显色系统：DAB（3,3'‑二氨基联苯胺）及其衍生物显色产物

碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase）显色系统：Fast Red（固红）/ BCIP‑NBT / BCIP‑INT 等底物局部沉淀产物

免疫荧光染色切片：FITC（异硫氰酸荧光素）及藻胆蛋白类（phycobiliproteins）等荧光标签

其他水性不溶发色团定位实验：凡显色产物为"有机不溶性沉淀"且不宜接触有机溶剂的场景

三、工作原理（为什么它能做到"水性介质却像有机封片的效果"）

3.1 折射率的关键作用

在光学显微镜下观察组织切片时，光线穿过盖玻片 → 封固介质 → 组织 → 载玻片，每一步都存在折射率差异。当封固介质的折射率与玻璃（约 n≈1.52–1.54）和组织结构的"背景基质"差距较大时，未染色区域会产生明显的散射界面，使视野显得灰暗浑浊；反之，当封固介质的折射率更接近玻璃折射率时，非染色区域的散射减弱，组织结构会呈现出更清亮、对比度更高的观感——这也就是为什么传统流程里要用梯度酒精→二甲苯脱水再用 DPX / Permount 之类有机 mountant 封片，本质上都是在拉平折射率差。

CC/Mount™ 的设计思路并不是走"脱水→疏水有机溶剂"的老路，而是把水性高分子/溶质体系调配到足够高的光学密度与折射率（very high refractive index for an aqueous medium），使最终干燥固化后的膜层本身在光学上更接近有机 mountant 的效果。因此，组织在 CC/Mount 中固化后，外观上可以接近脱水标本的通透感，而无需将切片暴露于二甲苯或甲苯蒸气中。

3.2 干燥固化形成稳定聚合物膜层

CC/Mount 为粘稠液态，涂布于切片表面后，通过加热干燥（推荐70°C烘箱）或室温缓慢蒸发固化，逐渐形成一层坚硬、透明、基本不溶于水的固态膜。这个膜层把染色区域物理性地"锁"在里面，阻止空气氧化、湿气滞留与微生物侵蚀带来的染料降解，从而实现保存的目的。由于它是水性体系固化而成，对 AEC 这类不溶于水的沉淀型显色产物不构成"溶剂溶解褪色"威胁。

3.3 偏碱性 pH 对荧光信号的稳定意义

很多荧光基团（尤其是 FITC 通道）在偏酸性环境下更容易发生质子化导致的荧光淬灭或光谱漂移。CC/Mount 的高 pH 环境（相对于普通水性封片剂）有助于降低这一风险，延长荧光切片的可用观察窗口。需要注意的是：对于对热敏感的荧光染料，品牌方案给出了"不加热、改用室温固化+覆盖玻片"的替代路径（详见后文操作流程），以避免70°C加热引起任何光物理特性变化。

四、产品特点（优势与技术亮点）

（1）水性体系——免去有机溶剂暴露风险

CC/Mount 以水为分散连续相，操作人员无需处理二甲苯、甲苯或挥发态烃类溶剂的蒸气，这在改善通风不良环境的安全性与降低实验室职业健康负担方面具有现实意义。当然，本品仍属于化学品范畴，含有防腐剂，仍需佩戴常规防护（护目镜、手套），不能等同于"随意涂抹的文具胶水"。

（2）高折射率的水性介质——成像品质更接近有机封片效果

这是 CC/Mount 区别于普通水性甘油缓冲封片剂的关键。普通水性封片剂干燥后往往留下雾感，而 CC/Mount 的折射率优化使其在固化后能提供更高的组织分辨率与更清晰的背景表现，满足多数常规阅片与数字化扫描（slide scanner）对透明度的要求。

（3）无需盖玻片即可完成封存（可选模式灵活）

标准用法下，CC/Mount 不要求加盖玻片——它在切片表面自行固化成膜，形成自支撑的保护层。这在高通量实验室可以减少盖玻片耗材成本、降低盖片过程中产生气泡的返工率。若出于归档习惯或油镜兼容需求仍希望使用盖玻片，本品也给出明确的后置有机封片（post‑mounting）路径：待 CC/Mount 充分干硬后，再在其上叠加一层薄层有机 mountant（如 DPX / Permount / E‑Z Mount / ProTexx / Shandon‑Mount 等），然后覆盖盖玻片即可。

（4）对主流 IHC 显色底物的兼容性覆盖面广

明确支持的显色底物/染料类型包括：

AEC（氨基乙基卡巴唑，有机不溶但可被有机溶剂溶解褪色，故特别适合水性封片路线）

DAB 及其相关聚合物显色体系

Fast Red（固红，AP系统常用）

BCIP/NBT 与 BCIP/INT（碱性磷酸酶显色沉淀）

FITC 及 藻胆蛋白类荧光染料

这一覆盖范围使得 CC/Mount 能作为多个染色平台共用的一瓶封片剂，减少实验室试剂管理复杂度。

（5）可逆性——必要时可重新开封重试

与传统有机封片一旦干了就几乎不可逆不同，CC/Mount 作为水性基体系，若后续发现封片不均、误操作为需要重做时，可将载玻片浸泡于去离子水中（配合磁力搅拌器温和搅动数小时至过夜），使固化膜逐步软化剥离脱离，从而给技术人员留出补救余地。

五、储存条件与稳定性

储存温度：室温保存（Store at room temperature）。请勿冷藏（Do not refrigerate）。

背后的原因与 CC/Mount 的物理形态直接相关：它是一瓶澄清粘稠液态 mountant，低温冷藏可能导致组分粘度异常升高、析出或瓶口结晶堵塞；此外冷藏环境常见的冷凝水若进入瓶口也可能带来微生物污染风险。室温避光、瓶盖紧闭存放是推荐的日常保管方式。

防腐剂提示： 本品含Sodium Azide作为抑菌防腐组分，操作时避免直接摄入或接触开放性伤口；废液处置请遵守所在机构关于含叠氮化合物废液的处理规定（通常不作为大宗有机卤废液，但仍应纳入化学品废弃物登记）。

有效期： 请严格遵守瓶身标签上印刷的有效期（Do not use after expiration date printed on label），过期产品的粘度、pH 缓冲能力与光学性能均可能发生偏移，不建议凭"看着没坏"来主观延用。

六、解决实验中的哪些痛点（场景化问题—解决方案对应关系）

6.1 传统有机封片导致 AEC 显色"瞬间消失"

问题本质： AEC 的显色产物不溶于水，但可溶于有机溶剂（二甲苯/甲苯/多数芳香烃）。一旦走标准脱水—透明—DPX 路线，红色信号会被溶解带走。

CC/Mount 的应对： 全程水性体系封固，AEC 沉淀被物理包埋而非化学溶解，显色信号得以保留。

6.2 普通水性封片剂干燥后发雾、看不清、数字化扫描噪点多

问题本质： 折射率偏低导致大量光散射，使得未染色区不透亮，组织结构边缘模糊，尤其在大面积脂肪组织或低细胞密度区域更加明显。

CC/Mount 的应对： 高折射率水性配方使固化膜在视觉上更接近有机 mountant 的清亮感，提升分辨率与观感对比度。

6.3 盖玻片封片时总是进气泡、气泡压在核上毁一张片

问题本质： 粘度过高的有机 mountant 或不恰当的倾倒角度会裹入微泡；另外有些水性 mountant 在滴加时因瓶口设计不良会"挤"出气泡。

CC/Mount 的应对： 其一，标准流程可以不加盖玻片，从根本上消除盖片气泡问题；其二，即使要盖玻片，产品说明书中明确给出了预处理技巧——取下红色端盖后用锋利刀片或剪刀将前端切掉，使液体能平稳流下而非靠挤压涌出，同时在使用前将瓶子倒置静置以驱出微量气泡。

6.4 荧光切片放几个月后信号暗淡甚至无法判读

问题本质： 荧光染料的光漂白与水解/质子化双重作用；封存环境若偏酸、若含氧滞留，则会加速衰减。

CC/Mount 的应对： 偏碱性 pH 有助于稳定荧光强度；且水性固化膜隔绝了直接空气接触。对于热敏感荧光，方案还给出室温固化的非加热分支（见操作流程），避免70°C热处理造成额外的影响。

6.5 某些特殊染色或脆弱组织不耐梯度酒精—二甲苯的剧烈脱水

问题本质： 组织脆裂、脱片风险增加。

CC/Mount 的应对： 切片在染色水洗结束后只需吸去周围多余水分但不让组织干透（tissue must be moist prior to mounting），即可直接加 CC/Mount 封固，跳过醇/二甲苯系列，降低对易碎标本的机械冲击。

七、使用方法与操作流程（分步详解）

前提提醒： 以下流程基于 Diagnostic BioSystems 品牌数据页（DS‑2023‑A）以及 Sigma‑Aldrich PIS 文件中给出的标准操作框架整理而来。不同实验室的切片厚度、组织类型、染色体系与设备条件会有差异，建议在正式运行前用 1–2 张测试切片做条件确认。

第一步：准备工作与瓶口处理

从瓶子上取下红色端盖（red end cap / red tip），然后用锋利剃刀刀片或小型剪刀将瓶嘴前端切掉。这一步看似简单但很关键：原装瓶的尖嘴如果保持封闭状态仅靠捅开一个小孔，挤压出液时会把 CC/Mount "喷射"出来并裹入微小气泡；切掉前端后，液体可以以稳定的滴状流淌，显著减少微泡形成。

另外，在开始操作前，可以将瓶子倒置放置于一个容器中几分钟（瓶口朝下但不要接触脏表面），利用重力让内部可能存在的零星气泡上浮离开瓶嘴区域。

第二步：染色后切片的前置状态控制

染色完成并经最终水洗后，用洁净纸巾/无尘纸轻轻吸去载玻片周围多余的水分，但绝对不要让组织区域本身变干（do not let tissue specimen dry）。说明书中强调：tissue must be moist prior to mounting。组织一旦在封片前干透，细胞形态会发生皱缩改变，且后续 CC/Mount 渗入的均匀性也会受影响。

理想状态是：组织表面有一层极薄的附着水膜，周围无积水。

第三步：滴加 CC/Mount

取 2–3 滴 CC/Mount 直接滴加在组织切片区域上。然后通过手腕轻轻转动/旋转载玻片，使液体在表面铺展成一层均匀的薄膜，确认整个组织区域被覆盖。

此时如果看到局部有肉眼可见的气泡，可以用移液器吸头前段轻轻拨动边缘使其移至边界外，或在尚未开始干燥前补一滴料液填补缺口——但通常只要瓶口处理得当、组织面湿润且操作平稳，气泡问题会大幅减少。

第四步A：标准加热固化法（适用于 DAB / AEC / Fast Red 等非热敏显色切片）

将载玻片水平放入预热至 70°C 的烘箱/干燥箱中。注意确认烘箱搁板是水平的——倾斜会导致 CC/Mount 在半干状态下流动聚集、厚度不均，最终固化膜出现条纹或边缘堆积。

干燥固化时间通常为 10–20 分钟，具体取决于你实际涂布的量（面积大小与液层厚薄）。取出后让其冷却至室温，即可直接在显微镜下观察。此模式下一般不加盖玻片。

第四步B：非加热室温固化法（适用于荧光染料标记切片——如 FITC 等，若希望避免70°C热暴露）

如果切片带有荧光标记且你倾向于不加热处理：

在滴加液态 CC/Mount 覆盖组织后，直接覆上盖玻片（此时 CC/Mount 仍处于液态）

将载玻片在室温下静置 45 分钟至 1 小时，允许 CC/Mount 在盖片下方缓慢固化

固化后可在盖玻片四周边缘用无色快干指甲油（nail polish）封边，以防止空气渗入和盖片滑动，利于较长期存放

补充说明：也有实验室选择荧光切片不加热也不加盖片，仅用加热法的干膜方式，但前提是你需要接受干膜表面直接使用油镜时需要后处理（见下一步）。

第五步：如需使用浸油物镜（oil lens）或需要更标准的封片档案外观——后置有机封片（Post‑Mounting）

CC/Mount 固化形成的干膜表面可以直接用干镜观察；但如果你的阅片或扫描协议要求使用浸油物镜，或者出于归档统一规范你想最终仍有盖玻片，则品牌给出以下 post‑mounting 路径：

确认 CC/Mount 已经干硬（手指轻触边缘不粘手、膜体稳固）

在其上再施加一层有机基封固剂（例如 E‑Z Mount、ProTexx、Permount、Shandon‑Mount 或 DPX 等均可，以你实验室既有的为准）

然后覆盖盖玻片

这样做的结果是：底层 CC/Mount 负责保护水性不溶显色底物不被有机溶剂溶解，上层薄有机 mountant 负责提供传统封片的界面相容性（油镜兼容、边缘密封）。且 CC/Mount 本身的折射率已经调得很接近有机 mountant，因此两层叠合的光学过渡不会引入明显的额外界面散射。

第六步（必要时）：移除 CC/Mount（返工/重做场景）

如果封片结果不满意需要重新处理：

将载玻片浸入装有去离子水的烧杯中

放置在磁力搅拌器上，低速温和搅动

浸泡 数小时至过夜 可使干燥的 CC/Mount 膜层充分软化脱落

取出后用流水轻柔冲洗，根据需要重新进行后续封片

这种可逆性是水性 mountant 相对有机 mountant 的一大实用优势，但也意味着：长期存档过程中应避免长时间泡水环境——正常干燥固化后的 CC/Mount 膜在日常切片盒存放条件下是稳定的，不需要额外防水保护。

八、常见问题与解决方案（FAQ / Troubleshooting）

Q1：滴加时总是出小气泡，膜干了以后每个气泡留下一个"亮洞"，怎么办？

原因分析： 瓶嘴未切掉导致出液不畅、靠挤压出液裹气；或组织表面已经半干了、液滴落在干点上弹溅裹气；或操作台有风（风扇/空调直吹）导致液面局部结皮拉扯。

解决方案：

严格执行"去红色端盖→切掉前端"的步骤，让液体靠自重稳定滴落

使用前将瓶子短暂倒置静置排泡

确认组织是 moist 而非 dry 状态再滴加

滴加后尽量减少气流直吹，自然铺展后再移入烘箱

Q2：70°C烘完冷却后发现膜面有裂纹或翘边卷起？

原因分析： 可能是涂布厚度不均匀（边缘太薄中间太厚），或烘箱温度过高/局部热点，或切片本身残留洗涤剂导致界面附着力变差。

解决方案：

检查烘箱实际温度（用独立温度计校准），确认搁板水平

滴加量控制在刚好全覆盖的薄层，不要堆料

玻片清洗流程中确认漂洗充分去除清洁剂的硅残留

若组织区域较小，可适当扩大涂布直径至组织周边空白区1–2mm，增加锚定面积

Q3：AEC 红色信号在 CC/Mount 封完后还是觉得比预期浅——是褪色了吗？

原因分析： AEC 的信号强度受水膜残余影响很大：如果组织表面残留水太多，CC/Mount 被稀释变薄，折射率效应打折扣，看起来会"发雾"，并非真正褪色。另一种可能是最终观察时的白平衡/灯强与以前习惯不同造成的感知偏差。

解决方案：

封片前用无尘纸吸掉玻片周围积水，但保持组织区微湿——这个"微湿不积水"的平衡点值得用几张练习片找手感

确认 CC/Mount 涂布均匀且足量覆盖

如确实需要更高对比度的存档记录，可补拍数字图像留存

Q4：荧光切片，用了70°C加热后荧光变弱——还能不能用加热法？

原因分析： 部分荧光系统（尤其 FITC 通道）对热不甚耐受，70°C虽只十来分钟，仍可能加速光物理衰减。

解决方案：

对荧光切片改用室温固化分支：液态 CC/Mount + 盖玻片 + 45min–1h 室温固化 + 指甲油封边

若你仍偏好干膜不加盖片的形态，可试验更低温度（如 50–60°C）延长干燥时间的折中方案，但需验证你特定染料的信号保持情况

无论如何，荧光切片的最佳实践一贯是：尽早成像、分通道存档、避光保存

Q5：长期存放后盖玻片边缘有白色结晶析出？

原因分析： CC/Mount 含防腐，若环境湿度波动大且边缘密封不全，可能出现微量盐析结晶（叠氮化物在某些条件下可在边缘渗出结晶化）；亦可能与所用后封固有机 mountant 的溶剂交互有关。

解决方案：

如走 post‑mounting 路线，确保有机 mountant 层连续完整、盖片边缘密封到位

如用纯 CC/Mount 干膜路线，无需盖片时通常不存在"边缘渗出"环境，但若切片盒受潮严重任何水基体系都可能吸附潮气——保持干燥存储仍是基本原则

白色结晶若为少量且仅在边缘，不影响组织中央判读；若侵入组织区则需评估是否重做

Q6：能不能直接省掉加热，室温放干就行？

原因分析： 技术上室温也可以逐渐蒸发固化，但耗时更长且环境尘埃容易落在表面；品牌给出的是 70°C 10–20 min 的可控窗口，目的是在保证效率的同时获得均匀一致的固化膜。

建议： 若你有充分验证数据表明室温过夜在你的环境湿度与组织类型上也能得到均匀膜且无霉变风险，可以作为备选；但从可重复性与批间一致性角度，70°C短时干燥是更推荐的标准做法。

Q7：CC/Mount 干了以后可以用香柏油（ immersion oil）直接顶在干膜上观察吗？

原因分析： 干膜表面从很多用户的实操反馈来看可以耐受短暂油镜接触，但 CC/Mount 毕竟不是传统硬质树脂，长期油浸接触的清洁与残留问题需要评估。

建议： 若你频繁使用 40×/60×/100× 油镜，更稳妥的是走 post‑mounting 路线——CC/Mount 干透后加一层 DPX 之类有机 mountant 再盖片，这样就回归经典油镜兼容界面。

九、安全注意事项与废弃物处理

本品含有Sodium Azide作为防腐剂，操作时请佩戴护目镜与防护手套；避免吸入瓶口附近气味（虽然是水性体系，但一般性化学品防护不可省略）。

不要将本品倒入普通下水道而不经稀释/登记——叠氮化物在高浓度下可与金属管道（特别是铜/铅）形成敏感叠氮化物，请按所在机构的化学废弃物分类处置。

储存于室温、远离食品与饮品、远离儿童可及区域。标签上如有破损导致无法辨识有效期或批号，建议停用。

本产品为体外诊断/研究用途，不得用于药物、家庭或其他未经声明的用途。

十、质量与合规说明

Diagnostic BioSystems 的产品质控框架参照 CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）质量标准为免疫组化检测的设计与实施提供的指引精神来构建其 QC 叙述。用户在实际临床实验室引入本品时，应将其纳入本实验室的 IHC 试剂验证流程（lot‑to‑lot一致性、阴阳性对照切片的外观评估、存档稳定性抽查等），并以实验室负责人确认签字的记录作为合规留档。

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（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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