日本NIPPON Genetics EUROPE公司Bambanker™细胞冻存液产品手册

一、标准化流程，实现稳定可靠的细胞冻存

整套方案流程，保障细胞冻存与复苏效果稳定可控

完整操作流程：细胞处理→扩大培养→冻存保护→低温冻存→长期储存

二、实验室选择 Bambanker™ 的核心原因

核心产品优势

1.无血清配方

2.细胞复苏存活率＞90%

3.操作简便快速，节省实验时间

4.符合 GMP 生产规范

三、从常规细胞培养到稳定复苏

细胞冻存是细胞实验流程中最容易出现结果不稳定的环节：操作手法、处理时长的微小差异，都会造成细胞复苏效果天差地别。本手册梳理决定冻融实验成败的关键步骤与质控要点，讲解 Bambanker™如何实现稳定的细胞复苏效果，减少不同操作人员、不同实验批次之间的数据偏差。

四、什么是 Bambanker™？

Bambanker™ 是一款即用型无血清细胞冻存液，适用于体外培养细胞的长期低温保藏。

目前已有覆盖 120 余种细胞与组织的同行评审文献验证其性能；相比含血清冻存液，本品可提升复苏存活率，同时降低实验数据波动。

产品带来的便利

•储存灵活：可直接放入 - 80℃冰箱冻存，也可转入液氮（LN₂）进行超长期保存

•流程简化：无需程序降温、梯度分步冻存操作

•长期结果稳定：无血清、成分明确，批次间差异小

适用场景

1.常规细胞建库（制备工作细胞株 / 备份冻存管，保障日常细胞培养持续开展）

2.主细胞库 / 工作细胞库构建，保证多人、多时间点实验结果可重复

3.高价值、难以重复获取的细胞（肿瘤细胞、干细胞、原代细胞等）

冻存操作标准化为何至关重要？

绝大多数冻融实验的数据偏差都来源于冻存阶段。冻存时细微操作差异（室温放置时长、吹打力度、降温速率），都会显著影响细胞复苏后的存活状态。

Bambanker™省去梯度程序降温步骤，但只有统一规范操作，才能保证不同冻存管、不同操作人员获得一致的复苏结果。

Bambanker™是细胞冻存流程的核心配套试剂，搭配专用配套耗材，可实现日常操作全程标准化、无菌可控。

五、Bambanker™ 全系列产品，适配各类细胞

全系 Bambanker™ 均为无血清、开盖即用型冻存液。

细胞种类、操作手法都会影响最终复苏效果，本文仅作基础参考，各实验室需建立专属标准对照实验。

手册汇总了所有使用 Bambanker™冻存的细胞及 3D 培养样本相关资料。

六、快速选型指南：10 秒选出适配型号

•需要规避 DMSO → Bambanker™ 无 DMSO 款

•要求无动物源组分 → Bambanker™ hRM

•高通量、简化流程、免离心 → Bambanker™ Direct 直冻款

•绝大多数常规细胞通用选型 → Bambanker™ 标准款

七、冻存：冻融流程中影响最大的关键环节

冻存阶段的操作时长、处理方式、低温保护条件不当，会直接导致细胞复苏活力下降，增加重复实验工作量。

统一冻存操作标准，是提升复苏存活率、减少重复实验高效的手段。

八、冻融实验失败的常见原因

1.冻存前细胞状态不佳（细胞应激、细胞密度过密或过稀）

2.操作不统一（处理时长、吹打方式、室温暴露时长不一致）

3.冻存保护条件不统一

4.不同实验室、操作人员手法差异，相同细胞复苏结果全不同

5.规模化冻存重复性差，样本数量越多误差越大

九、优先选用 Bambanker™ 的理由

一次细胞复苏失败，会耗费数天至数周实验周期。标准化冻存流程可大幅减少重复实验；冻存环节是影响细胞复苏效果、实验规模、重复工作量的核心节点，应当优先完成该环节标准化。

十、Bambanker™ 多能干细胞复苏效果验证

实验目标：复苏后细胞数量稳定、细胞表型不发生偏移

实验参数：

•细胞类型：小鼠多能干细胞

•冻存试剂：Bambanker™

•检测指标：①细胞密度 ②细胞表型维持能力

1.细胞密度

对比组别：冻存前 VS 复苏培养 2 天

复苏后细胞密度高，细胞形态与冻存前无明显差异

2.细胞表型维持（碱性磷酸酶 ALP 染色）

检测时间：复苏培养 3 天

数据结论：复苏后细胞密度高、形态与冻存前基本一致，培养 3 天 ALP 染色活性稳定，冻存过程中细胞表型未发生改变。

* 数据致谢：日本东京工业大学生命理工学院生物分子工程系田川实验室安博士提供

针对多能干细胞，仅保证细胞存活远远不够，还需复苏后细胞不发生表型漂移。本实验通过两项实用指标（复苏细胞形态 / 细胞密度、多能标志物 ALP 染色）验证 Bambanker™复苏品质。

十一、Bambanker™ 支持 - 80℃长期低温储存

多款细胞在 - 80℃条件下稳定保存 5 年，细胞活力无明显衰减

液氮常被视作长期保藏的黄金标准，但 - 80℃低温冰箱具备取用便捷、安全性高、日常使用更省心等实操优势。

使用 Bambanker™冻存的细胞，在 - 80℃储存最长 5 年仍可维持高细胞活力。

测试细胞样本

悬浮细胞：K562、JURKAT

贴壁细胞：HeLa S3、OKT4、HEK293

•多款贴壁、悬浮细胞在 - 80℃长期储存（最长 5 年）后仍保持高活力

•常规细胞库可直接选用 - 80℃储存，大幅降低液氮使用与运维成本

实操参考准则

•常规细胞建库：-80℃冰箱储存

•超长期保藏：液氮（LN₂）

十二、Bambanker™ 标准冻存操作流程（附影响复苏效果的核心质控点）

步骤 1：确认细胞满足冻存标准

细胞形态健康、生长状态稳定、细胞密度适配对应细胞类型；对数生长期冻存可大化复苏存活率。

步骤 2：消化细胞，制备单细胞悬液

使用实验室常规消化方法轻柔处理；根据实验流程需求离心收集细胞沉淀。

步骤 3：Bambanker™重悬细胞（无血清体系）

将细胞转移至冻存管，加入 1mL Bambanker™重悬；

* 注意：避免产生气泡，所有冻存管室温暴露时长保持一致。

步骤 4：直接放入 - 80℃冻存，无需梯度降温

冻存管置于 - 80℃冰箱完成冻存与短期保藏；

可选操作：冻存完成后转移至液氮长期储存（非必需步骤）。

冻存操作一致性 = 复苏结果一致性

核心质控关键点

1.处理时长：所有冻存管室温暴露时间统一

2.温度暴露：尽量缩短室温放置时长，操作标准统一

3.细胞重悬：轻柔吹打，力度统一，禁止产生大量气泡

4.标签与溯源：清晰标记样本信息，避免样本混淆、重复实验

5.操作标准化：全程严格遵循统一操作步骤

十三、冻存数据波动的常见诱因

各冻存管处理时长不一致、室温暴露时长差异；标签模糊、无冻存管存放台账；冰箱内放置方式不统一；吹打力度过大产生大量气泡。

Bambanker™ 细胞复苏与培养流程（影响复苏效果的前期关键操作）

复苏前准备

1.提前预热培养基，备好培养皿 / 培养瓶

2.提前标记样本，规划冻存管对应培养容器

快速融化冻存细胞

37℃恒温水浴 / 恒温箱快速融化，仅融至液体状态即可，禁止长时间升温放置。

转移细胞，轻柔操作

1.将 1mL 含细胞的 Bambanker™悬液加入预热新鲜培养基

2.20℃、300–400×g 离心 3 分钟

3.弃去上清液

* 禁止剧烈吹打，避免产生气泡

铺板培养

使用预热培养基重悬细胞，转移至培养容器。

复苏后 24–72 小时稳定培养

维持稳定培养环境，减少不必要操作；持续观察细胞形态、贴壁与增殖状态。

换液

根据对应细胞类型遵循实验室标准换液时间，所有实验组保持换液时长统一。

复苏数据记录

对比实验室标准对照组，记录复苏效果（贴壁率、细胞形态、增殖速度）；登记关键信息：冻存管编号、铺板密度、培养容器、处理时长、操作人员。

复苏操作规范（推荐操作 & 禁止操作）

十四、全流程总览

细胞培养启动 → 操作台前期准备 → 维持无菌操作环境 → 细胞低温冻存 → 细胞长期储存

配套耗材：FastGene 血清移液管、EasyFlow 移液辅助设备、细胞培养转运盒、冻存管、CapMaster Pro 管盖开关设备

Bambanker™是整套细胞冻存流程的核心试剂

NIPPON Genetics 欧洲分部提供全流程冻存配套解决方案：以 Bambanker™冻存液为核心，搭配全套配套耗材，保障日常操作标准化、无菌可控。

十五、无菌操作与流程稳定配套耗材详解

FastGene EasyFlow 移液辅助设备（货号 FG-SPC）

作用：优化细胞培养最频繁操作 —— 无菌液体转移

适用场景：常规换液、细胞洗涤、超净台内样本转移

FastGene 血清移液管（系列货号 FG-SP#）

作用：覆盖全规格液体转移需求，从少量补液到全量换液均可适配

适用场景：细胞换液、洗涤、传代、样本转移；可与 EasyFlow 设备配套

FastGene CapMaster Pro 管盖自动开关设备（货号 FG-CDC05）

作用：省去反复手动开合冻存管的重复人工操作

适用场景：所有需要频繁开盖、关盖的无菌实验步骤

FastGene 细胞培养转运盒（货号 CC01）

作用：细胞转运、孵育过程降低污染风险

适用场景：培养容器转运至孵箱，孵育过程防护细胞样本

FastGene 冻存管（系列货号 FG-CRY#）

作用：低温储存安全稳定，配套 2D 二维码标签插件（FG-CRY-2D）实现样本清晰溯源

适用场景：细胞分装冻存、长期低温保藏、冻存盒有序存放样本

十六、产品应用范围广泛

已有超 120 种细胞、组织相关同行评审文献验证 Bambanker™应用效果，适配多种实验体系

覆盖细胞样本范围

1.免疫 / 造血细胞、上皮细胞、干细胞 / 祖细胞、原代细胞 / 患者来源样本、3D 类器官模型

2.数据均来自引用 Bambanker™的同行评审文献，每种细胞类型对应一篇代表性文献

3.文献附带 DOI 链接，可直接查阅原始实验数据

部分适配细胞目录

干细胞、祖细胞及其分化子代

人脂肪间充质干细胞（ASCs）

人胶质母细胞瘤干细胞神经球

提示：本清单仅作参考，无法保证所有实验室实验方案均达到同等效果，需结合实验室自身质控标准开展预实验验证。

十七、产品总览

一、Bambanker™冻存液全系规格及货号

试用申请：可申请 1mL 分装于冻存管的 Bambanker™样品，方便快速测试后再批量采购。

二、FastGene 配套耗材规格及货号

更多产品信息，请联系授权代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）