▎前言
上海英诺赛图生物科技有限公司运营InnoCyto品牌,围绕免疫学与细胞分析提供试剂支持。上海起发实验试剂有限公司作为InnoCyto特约代理经销商,负责相关产品咨询与供应,便于科研用户对接InnoCyto流式抗体、荧光标记蛋白等实验物料。
① 品牌与产品体系概述
InnoCyto聚焦免疫学、肿瘤研究、细胞治疗评估、炎症与感染免疫等方向的科研试剂开发,产品涵盖流式抗体、荧光标记蛋白、重组蛋白、同型对照、多因子检测相关物料等类别。其流式抗体体系覆盖人源与小鼠来源的T细胞、B细胞、NK细胞、髓系细胞、抗原提呈相关分子、免疫检查点分子等标志物的检测需求;荧光标记蛋白体系可提供PE、APC、Biotin等标记的靶抗原,用于CAR阳性率评估、抗原结合验证、流式圈门对照、BLI或ELISA方法搭建。
在科研采购环节,上海起发实验试剂有限公司作为InnoCyto特约代理经销商,可提供产品目录核对、货号确认、规格选择、到货与售后问题跟进等服务。对新建流式平台、开展免疫分型、进行CAR-T或抗体药物前期评价的项目,可通过特约经销渠道确认当前在售货号与批次说明。
② 热门产品介绍
●PE/Cyanine5.5 Anti-Human CD38 Antibody
◇ 基本信息与货号
品名:PE/Cyanine5.5 Anti-Human CD38 Antibody
克隆号:HB-7
反应种属:人
应用方向:流式细胞术
货号与规格:101019,25 tests;101020,100 tests
同型:Mouse IgG1
标记格式:PE/Cyanine5.5
目标分子:CD38,别名gp45、T10、Cyclic ADP-ribose hydrolase 1、ADP-ribosyl cyclase
试剂状态:RUO,仅用于科研用途
◇ 产品特点
该产品采用PE与Cyanine5.5串联荧光,可在配备相应激光与滤片的流式系统中用于人CD38阳性细胞设门。CD38分布于浆细胞、活化T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞、树突状细胞等造血细胞,也可在特定非造血组织中表达。对于骨髓瘤、白血病、淋巴瘤相关免疫表型研究,以及免疫细胞活化、耗竭、代谢状态评估,可作为表型标记之一。
串联染料较适合多色panel中使用,但受补偿调节与荧光溢出影响,建议同步准备同型对照与单染管。该产品页面所列同型对照货号为301432,实际设门时按细胞类型与panel颜色组合选择。
◇ 存储条件
未稀释抗体溶液置于2℃至8℃保存,避免长期光照,不可冷冻。制剂为磷酸盐缓冲液,pH约7.2,含0.09%叠氮钠与0.2% BSA。叠氮钠具有一定危害性,操作应按实验室生物安全与化学品管理要求执行;分装、移液、废液处理避免与活细胞培养体系混用。
◇ 工作原理
CD38为Ⅱ型跨膜糖蛋白,胞外结构具有酶活位点,可参与NAD+向cADPR、ADP-ribose、NAADP等产物转化,从而影响胞内钙信号、免疫细胞活化、增殖、迁移与细胞因子分泌。流式检测中,偶联PE/Cyanine5.5的HB-7克隆与人CD38结合后,通过荧光信号识别CD38阳性群体。该染料激发峰值约565 nm,发射峰值约670 nm,可使用蓝色488 nm激光或532/561 nm绿/黄激光激发,具体以流式仪器配置与滤片设置为准。
◇ 使用方法
1)取人外周血淋巴细胞、PBMC、骨髓单个核细胞或其他待测单细胞悬液,调整至合适浓度。
2)按每0.5×10⁶至1×10⁶个细胞、总体积100 μL加入5 μL本试剂;若样本量或细胞数变化,先通过滴定确定适宜用量。
3)室温避光孵育,时间按实验室常规流式染色SOP执行;一般可设置15至30分钟,具体以说明书与预实验为准。
4)用含蛋白的缓冲液或流式洗涤液清洗,去除未结合抗体。
5)重悬后进行流式获取;同时设置未染、同型对照、单染补偿管。
6)分析时先圈淋巴细胞或目标群体,再按同型对照设定CD38阳性阈值,比较MFI与阳性比例。
●PE Anti-Human CD8a Antibody
◇ 基本信息与货号
品名:PE Anti-Human CD8a Antibody
克隆号:OKT8
反应种属:人
应用方向:流式细胞术
货号与规格:107913,25 tests;107914,100 tests
同型:Mouse IgG2a
标记格式:PE
目标分子:CD8a,别名T8、Leu2
试剂状态:RUO,仅用于科研用途
◇ 产品特点
CD8a常用于细胞毒性T细胞鉴定。人外周血与组织免疫分型中,CD8设门可与CD4、CD3、CD45RA、CCR7、PD-1、TIM-3、LAG-3等标志组合,用于效应T、记忆T、耗竭T等亚群分析。OKT8克隆适用于人CD8a流式检测,PE通道兼容多数配备488 nm蓝激光的流式细胞仪。
该产品适合感染免疫、肿瘤免疫、疫苗免疫评价、自身免疫疾病外周血免疫监测等项目。与CD4、CD3搭配可完成基础T细胞分型;进一步联合增殖或胞内因子标志,可扩展为活化、功能与记忆表型研究。
◇ 存储条件
未稀释抗体溶液2℃至8℃保存,避光,不可冷冻。制剂为磷酸盐缓冲液,pH约7.2,含0.09%叠氮钠与0.2% BSA。使用前轻弹或轻倒混匀,避免反复冻融;长期不用按说明书要求原装避光存放。
◇ 工作原理
CD8a在细胞毒性T细胞表面多以CD8αβ异二聚体形式存在,也可形成CD8αα同源二聚体;其胞外Ig样结构可与MHC I分子保守区域结合,作为TCR识别抗原时的共受体。TCR识别MHC I提呈肽段后,CD8增强Lck等信号分子靠近TCR复合体,降低活化阈值,促进细胞毒T细胞分化、颗粒酶与穿孔素介导杀伤、IFN-γ与TNF-α等细胞因子分泌。PE标记抗体与细胞表面CD8a结合后,通过565 nm附近激发、约575 nm发射实现荧光检测。
◇ 使用方法
1)制备人全血、PBMC或组织单细胞悬液,去除团块。
2)按每0.5×10⁶至1×10⁶个细胞、100 μL总体积加入5 μL本试剂;新panel建议做滴定点。
3)避光孵育后洗涤;若做胞内标志物,需先完成表面CD8染色,再按固定破膜SOP处理。
4)单独设PE单染管用于补偿;设Mouse IgG2a PE同型对照评估非特异性结合。
5)流式获取时先圈总淋巴细胞,再用CD3区分T细胞,按CD8荧光强度划分CD8阳性与阴性群体。
6)若评估耗竭或活化,可并联PD-1、TIM-3、CD38、HLA-DR等通道,但需提前检查荧光重叠与抗体用量。
●PE/iF594 Anti-Mouse TCRβ Antibody
◇ 基本信息与货号
品名:PE/iF594 Anti-Mouse TCRβ Antibody
克隆号:H57-597-R1
反应种属:小鼠
应用方向:流式细胞术
货号与规格:201715,25 tests;201716,100 tests
同型:Rat IgG1
标记格式:PE/iF594
目标分子:TCR β chain,TCR-β
试剂状态:RUO,仅用于科研用途
◇ 产品特点
该产品用于小鼠T细胞受体β链检测,可识别多数αβ TCR表达T细胞。与CD4、CD8、CD44、CD62L、CD69、IFN-γ等标志组合,可开展胸腺发育、外周T细胞亚群、活化与记忆表型、TCR克隆偏好初步筛查。H57-597-R1克隆适用于脾脏、淋巴结、外周血等小鼠免疫组织单细胞分析。
PE/iF594可在部分多色panel中替代传统PE二级信号,减少与其它PE偶联试剂的竞争;但是否适配取决于仪器滤片、激光数与整体配色方案。
◇ 存储条件
未稀释抗体溶液2℃至8℃保存,避光,不可冷冻。制剂为磷酸盐缓冲液,pH约7.2,含0.09%叠氮钠与0.2% BSA。多色panel使用前检查各串联或近光谱染料稳定性,避免强光、高温、反复开盖。
◇ 工作原理
小鼠TCRβ链与TCRα链组成αβ TCR,负责识别抗原提呈细胞MHCⅠ或MHCⅡ分子所呈现的肽段。TCRβ通过V、D、J、C基因重排形成多样性,其CDR3区域对抗原特异性贡献较大。TCR与CD3γ、δ、ε、ζ共同组成TCR复合体,识别抗原后通过ITAM传递活化信号,引发Lck、ZAP-70等激酶级联,导致T细胞增殖、分化与效应功能。PE/iF594偶联抗体结合TCRβ后,激发峰值约565 nm、发射峰值约603 nm,可由488 nm蓝激光或532/561 nm绿/黄激光激发,具体以仪器配置为准。
使用方法
1)取小鼠脾细胞、淋巴结细胞、外周血或组织消化单细胞悬液,过滤去团块。
2)按每0.5×10⁶至1×10⁶个细胞、100 μL总体积加入5 μL本试剂;不同组织密度与抗原表达水平建议滴定。
3)避光孵育、洗涤;若做胞内转录因子或细胞因子,按对应破膜与固定流程在表面染色后处理。
4)设Rat IgG1 PE/iF594同型对照;设PE/iF594单染管用于补偿。
5)圈淋巴细胞后结合CD3、CD4、CD8判读TCRβ整体表达;若分析克隆性,需配合TCR测序或额外Vβ试剂,单凭TCRβ总染不能定义克隆扩增。
③ 可解决的实验问题
③─1 免疫分型标记不全
多色panel设计中常遇到目标亚群缺少合适荧光组合。InnoCyto提供人、小鼠多类免疫细胞标志抗体,可分别覆盖T细胞、B细胞、NK细胞、单核或巨噬细胞、树突状细胞、粒细胞及免疫检查点分子。通过特约经销渠道确认克隆、同型、荧光与货号,可减少因标记重复或配色冲突造成的重买。
③─2 CD38等活化或浆细胞标志信号不稳定
CD38表达受细胞类型、活化状态、样本处理时间影响。使用明确克隆与串联染料抗体,配合同型对照、单染补偿与滴定,可改善阳性阈值不清、MFI偏低、背景偏高的问题。对骨髓瘤或浆细胞研究,CD38可与CD138、BCMA、CD19、CD20等组合设计,但需按具体病种与样本类型验证。
③─3 小鼠T细胞受体检测配色冲突
传统PE渠道在多色方案中常被多个标志占用。TCRβ采用PE/iF594后,可与FITC、PerCP、APC、BV类染料等重新分配;但所有组合应以仪器激光、滤片、补偿规则和预实验为准。对胸腺发育研究,TCRβ结合CD4、CD8、CD69、CD25可观察双阴、双阳、单阳过渡。
③─4 CAR或靶抗原结合缺乏对照蛋白
荧光标记CD38、CD20、PD-L1、CD16a、CD64等蛋白可用于CAR阳性率评估、抗原饱和结合、阻断实验与流式方法学对照。InnoCyto荧光标记蛋白按HEK293、CHO或E.coli表达体系提供不同靶点与标记形式;实际用于CAR验证时需确认靶抗原构象、标签、物种同源性与细胞模型匹配度。
③─5 同型对照与补偿管选择混乱
不同物种、同型、荧光染料均会影响非特异性染色判断。采购时按一抗来源选择对应同型对照,例如人CD38 PE/Cy5.5选Mouse IgG1同型,人CD8a PE选Mouse IgG2a同型,小鼠TCRβ PE/iF594选Rat IgG1同型。上海起发实验试剂有限公司作为特约代理经销商,可在下单前协助核对同型与单染方案,降低补偿设置错误。
④ 购买与使用该品牌产品的常见疑问
问:如何确认货号与规格是否当前在售?
答:以InnoCyto当期产品目录、网站产品页与特约经销渠道库存信息为准。流式抗体常按25 tests、100 tests提供;荧光蛋白按25 μg、100 μg提供;生物类似药或in vivo抗体按1 mg、5 mg、20 mg等规格提供。同名靶点不同克隆、荧光、种属不能互相替代。
问:产品到货后发现未冷藏运输是否有影响?
答:按产品说明书接收。多数液体流式抗体要求2℃至8℃保存,短期运输温度偏离需结合到货时长、包装温度指示与厂家稳定性说明评估。若到货后外观异常、浑浊、漏液或标签不符,保留外箱与温控记录,通过特约经销渠道申请复核。
问:同一样本能否把三款产品混用?
答:可以,但须属于同一物种与兼容panel。人CD38 PE/Cy5.5与人CD8a PE可同为人样本多色方案;小鼠TCRβ PE/iF594不能与人CD8a混用于同一管。多色设计应统筹激光、染料、克隆、同型与补偿,先做单染再合管。
问:流式信号弱怎么办?
答:先检查抗体用量是否按推荐5 μL/0.5×10⁶至1×10⁶细胞做滴定;再检查细胞活性、固定破膜步骤、避光与储存条件。串联染料若长期光照或冻融可能信号下降。另需确认仪器电压、补偿与激光功率;同型对照可帮助判断是否为非特异性结合。
问:RUO产品能否用于临床?
答:不能。InnoCyto相关抗体、蛋白与试剂盒多标注RUO,仅用于科学研究,不用于临床诊断、治疗或体外诊断判定。涉及患者样本的方法开发,应另行建立合规验证体系。
问:荧光标记蛋白与流式抗体有何区别?
答:流式抗体直接染细胞表面或胞内标志;荧光标记蛋白通常用于将可溶性靶抗原与表达对应CAR或受体的细胞结合,再经流式读数,也可用于ELISA、BLI等平台。二者不能互相替代,采购时按实验目的选择。
问:订购时如何减少发错货?
答:提供完整信息:靶点名称、种属、克隆、荧光格式、货号、规格、应用平台、样本类型。通过上海起发实验试剂有限公司特约经销服务核对上述字段,可降低同靶不同克隆或同靶不同荧光导致的退换风险。
问:多色panel如何避免串联染料干扰?
答:提前获取各染料激发、发射参数;建立单染补偿库;避免将发射相近的串联染料放入无合适滤片通道;定期做仪器PMT校准。对PE/Cy5.5、PE/Cy7、APC/Cy7等串联染料,注意避光、避免冻融与长期室温放置。
⑤ 实验应用方向补充
InnoCyto试剂可服务于以下科研场景:人外周血免疫分型、肿瘤微环境免疫细胞浸润分析、CAR-T与CAR-NK靶标结合验证、免疫检查点共表达研究、疫苗免疫后T/B细胞反应评估、炎症疾病单核与中性粒细胞标志检测、自身免疫模型T细胞亚群追踪、造血干细胞与淋巴发育相关标志分析。具体靶点选择应结合动物模型、样本来源、抗体克隆验证数据与既往文献。
对于新建立流式平台,建议先以CD3、CD4、CD8、CD19、CD56、CD16、HLA-DR、CD38等常规标志搭建基础panel,确认仪器补偿与染色SOP后,再扩展PD-1、TIM-3、LAG-3、CTLA-4、FOXP3、Ki-67等精细亚群指标。上海起发实验试剂有限公司作为InnoCyto特约代理经销商,可在目录匹配、货号确认、同型对照与到货验收方面提供对接。
⑥ 产品选用与质量确认建议
采购前确认四项内容:第一,靶点是否与人或小老鼠模型匹配;第二,克隆是否已有对应文献或本实验室历史数据;第三,荧光格式是否适配现有流式激光与滤片;第四,同型对照、补偿微球、固定破膜试剂是否一并配置。到货后保留说明书、批号、COA(如提供)、运输温控记录;使用做滴定与同型对照,建立本实验室MFI、阳性率与补偿参数档案。
对荧光标记蛋白,需关注表达体系、标签、纯化方式、标记物、适用平台与存储条件。不同靶点的PE、APC、Biotin版本货号不同,不能只按靶点名称下单;用于CAR阳性检测时,还要确认靶抗原胞外区构建是否覆盖CAR识别表位。
关键词:流式抗体货号查询、人CD38流式检测、小鼠TCRβ抗体、PE/Cy5.5染色方案、CD8a免疫分型、InnoCyto同型对照、CAR阳性率荧光蛋白、PD-L1重组蛋白ELISA、多色流式配色工具、免疫检查点标志抗体、PBMC亚群分析、浆细胞CD38设门、T细胞耗竭标志物、B细胞CD19检测、NK细胞CD56CD16、髓系细胞F4/80Ly6G、重组细胞因子订购、生物类似药抗体RUO、流式补偿单染对照、上海科研试剂特约经销
更多产品信息,请联系中国区域代理商:上海起发实验试剂有限公司
(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
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