美国CELLSCRIPT特约代理经销商

▌前言

美国CELLSCRIPT（商标LOGO名：CELLSCRIPT™）专注RNA合成、加帽、加尾与质控试剂研发。上海起发实验试剂有限公司作为其特约代理经销商，提供产品咨询、货期核对与合规科研采购支持，覆盖体外转录及mRNA工艺相关实验需求。

▌一、公司介绍

CELLSCRIPT™定位于RNA技术试剂供应，业务围绕“RNA for Translation in Cells"展开，主要服务临床研究、免疫治疗、基因治疗研究、疫苗研究及常规分子生物学实验。产品体系覆盖体外转录、5′端加帽、3′端聚腺苷酸化、双链RNA去除、RNA质量控制等环节。

品牌产品线包含T7/SP6启动子转录试剂、标准与修饰核苷转录系统、Cap 0与Cap 1加帽系统、Poly（A）加尾系统、RNase抑制剂、dsRNA去除系统以及加帽效率与Poly（A）长度检测试剂。其试剂适用于线性双链DNA模板的RNA合成，也可与后续纯化、转染、体外翻译、mRNA质量分析等流程衔接。

在研究方法上，CELLSCRIPT™提供模块化与一体化两类方案。模块化方案允许科研人员根据模板类型、RNA长度、修饰需求和下游应用单独选择转录、加帽、加尾组件；一体化方案将转录、加帽、加尾、纯化试剂整合在同一系统内，减少跨试剂盒配液与转移步骤。相关产品标注为研究使用，不用于临床诊断或治疗直接给药。

▌二、热门产品介绍

▌2.1 产品一：T7 mScript™ Standard mRNA Production System V2

① 基本货号与品名  

货号：C-MSC11610，规格10 reactions。  

货号：C-MSC100625，规格25 reactions。  

品名：T7 mScript™ Standard mRNA Production System V2，即T7 mScript标准mRNA生产系统V2。

② 产品特点  

该系统用于合成含尿苷、5′端Cap 1加帽、3′端Poly（A）加尾的mRNA。系统整合四个工作模块：T7高产量体外转录、ScriptCap Cap 1加帽、A-Plus Poly（A）加尾、乙酸铵沉淀纯化。配套ScriptGuard RNase抑制剂，降低转录与加尾过程中RNA被RNase降解的风险。标准方案可获得较高比例5′端加帽产物，并可根据实验需要调节Poly（A）长度，常规范围约50至300个A以上。

③ 存储条件  

全套组件按说明书要求存放于－20℃无自动除霜循环冷冻环境。不同酶液多含50%甘油缓冲体系，避免－70℃长期存放；复融后短暂置于冰上，用后及时回冻。SAM等相关小体积试剂对温度敏感，配制与孵育过程中保持低温操作。

④ 工作原理  

第一模块以线性双链DNA为模板，利用T7 mScript酶组合与ATP、CTP、GTP、UTP进行体外转录，获得原始RNA。第二模块利用ScriptCap Capping Enzyme将RNA 5′三磷酸转化为二磷酸，并连接GTP形成帽结构，再利用2′-O-Methyltransferase以SAM为甲基供体完成Cap 1甲基化。第三模块利用A-Plus Poly（A）Polymerase在3′端逐个添加AMP，形成Poly（A）尾。第四模块利用乙酸铵沉淀收集并初步纯化mRNA。加帽与加尾后的mRNA在真核细胞转染、显微注射及体外翻译中通常表现出较未处理RNA更稳定的存在时间与翻译输出。

⑤ 使用方法  

第一步，准备经限制性酶切线性化并纯化的T7双链DNA模板，测定浓度与纯度。第二步，按试剂盒比例加入10×转录缓冲液、四种NTP、T7 mScript酶混合液、ScriptGuard RNase抑制剂及模板，37℃进行转录。第三步，转录结束后按模块加入加帽酶、2′-O-甲基转移酶、SAM及相应缓冲液，37℃完成Cap 1构建。第四步，加入A-Plus Poly（A）Polymerase与ATP缓冲体系，按目标尾长设定孵育时间。第五步，用乙酸铵沉淀或试剂盒推荐纯化方式回收mRNA，检测浓度、加帽率、尾长与完整性。系统附带对照模板时，可按对照protocol校验收量与反应一致性。

▌2.2 产品二：T7-Scribe™ Standard RNA IVT Kit

① 基本货号与品名  

货号：C-AS3107，规格50 reactions。  

货号：C-AS2607，规格25 reactions。  

品名：T7-Scribe™ Standard RNA IVT Kit，即T7-Scribe标准RNA体外转录试剂盒。

② 产品特点  

该产品用于以T7 RNA聚合酶体系合成规范GAUC RNA，即含A、G、C、U四种经典核苷的体外转录RNA。标准20 μL反应、2小时可从1 μg对照模板获得至多约150 μg RNA，反应可放大至毫克级别。试剂盒适用于长转录本与短转录本，可通过调整NTP、模板量、反应体积与孵育时间改变产量。配套ScriptGuard RNase抑制剂与RNase-Free DNase I，便于后续去除模板DNA。该IVT RNA可继续用ScriptCap系统加帽、用A-Plus系统加尾，转为mRNA；也可用于RNA结构、探针、标准品及部分体外翻译场景。

③ 存储条件  

整体存放于－20℃无除霜冷冻环境，不存放于－70℃。T7-Scribe酶液、ScriptGuard、DNase I多以50%甘油缓冲液提供；其中酶液常规含50 mM Tris-HCl pH7.5、100 mM NaCl、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、0.1% Triton X-100体系，DNase I缓冲含CaCl2、MgCl2等成分。到货后按组分标签分格存放，避免反复冻融。

④ 工作原理  

T7-Scribe酶在T7启动子控制下识别线性双链DNA，以DNA非模板链为参照合成单链RNA。反应体系提供10×转录缓冲液、100 mM ATP/CTP/GTP/UTP、DTT、T7-Scribe酶混合液及对照模板。转录完成后，利用RNase-Free DNase I降解DNA模板，降低后续RNA应用中的模板残留。ScriptGuard通过抑制RNase A类活性减少RNA降解。所得RNA为未加帽、未加尾的原始转录产物，可按实验目的进行纯化、标记、加帽或加尾。

⑤ 使用方法  

第一步，准备线性化双链DNA，建议溶于无RNase水或TE，避免酚类、强变性剂残留。第二步，配制基础反应：10×T7-Scribe转录缓冲液、ATP/CTP/GTP/UTP、DTT、T7-Scribe酶、ScriptGuard及模板，用无RNase水补至目标体积。第三步，37℃孵育，标准20 μL体系2小时；若提高模板量或扩大体积，按比例放大并验证混匀与热传导。第四步，加入RNase-Free DNase I，37℃短时处理以去除DNA模板。第五步，采用醋酸铵/乙醇沉淀、柱纯化或酚氯仿方法回收RNA，用无RNase水溶解。第六步，如需标记RNA，可在NTP中替换或部分加入荧光；如需mRNA，继续接ScriptCap与A-Plus流程。

▌2.3 产品三：ScriptCap™ m7G Capping System

① 基本货号与品名  

货号：C-SCCE0610，规格10 reactions。  

货号：C-SCCE0625，规格25 reactions。  

品名：ScriptCap™ m7G Capping System，即ScriptCap m7G加帽系统。

② 产品特点  

该系统对体外转录RNA进行转录后5′加帽，构建Cap 0结构，即N7-甲基鸟苷帽。标准25次装提供ScriptCap Capping Enzyme、10×加帽缓冲液、10 mM GTP、20 mM SAM、ScriptGuard RNase抑制剂及无RNase水。标准单次反应可处理约60 μg RNA，反应规模可按输入RNA量调整。加帽后产物可直接进入A-Plus Poly（A）加尾反应，不必额外纯化；若需Cap 1，可继续配合ScriptCap 2′-O-Methyltransferase Kit使用。

③ 存储条件  

全部组分存放于－20℃无除霜冷冻环境，不存放于－70℃。加帽酶、ScriptGuard多以50%甘油缓冲提供；SAM对温度与反复冻融较敏感，分装后低温操作，避免室温长时间放置。GTP、缓冲液按组分标签存放，防止交叉污染。

④ 工作原理  

加帽包含三步酶促反应：RNA 5′三磷酸先经RNA三磷酸酶活性转化为二磷酸；加帽酶以GTP为底物，将GMP通过5′-5′三磷酸键连接至RNA 5′端，形成GpppN结构；甲基转移酶以SAM为甲基供体，在鸟苷第7位氮原子上引入甲基，形成m7G Cap 0。相比共转录帽类似物，转录后酶法加帽可减少帽类似物与GTP竞争启动的问题，对适宜5′端结构的RNA可获得接近Cap 0比例。Cap 0可提升RNA在真核细胞中的稳定性与翻译起始效率；进一步2′-O甲基化可获得Cap 1。

⑤ 使用方法  

第一步，准备已纯化IVT RNA，建议溶于无RNase水，避免高EDTA、酚、盐类残留影响酶活。第二步，按反应体积加入10×ScriptCap加帽缓冲液、GTP、SAM、ScriptCap Capping Enzyme、ScriptGuard及RNA。第三步，若RNA 5′端二级结构较强，可先适度热变性并快速冷却，改善加帽酶接近效率。第四步，37℃孵育，常规时间按说明书设置，低效时可延长至3小时并复核SAM新鲜度。第五步，加帽完成后可直接进行A-Plus加尾；若评估Cap 1，补加2′-O-甲基转移酶与SAM继续反应。第六步，用柱纯化、沉淀或推荐的RNA回收方式处理样品，通过加帽效率检测、体外翻译或转染实验验证效果。

▌三、解决实验中哪些问题

① 体外RNA产量不足：T7-Scribe与T7 mScript体系针对规范GAUC模板提供高产量转录方案，可通过模板质量优化、NTP比例、酶量及反应时间提升收量。

② 转录后DNA模板残留：T7-Scribe配套RNase-Free DNase I，可在转录后降解双链DNA模板，降低qPCR、转染或后续酶处理中的模板干扰。

③ 未加帽RNA翻译效率低：未加帽RNA易被核酸酶降解且翻译起始弱。ScriptCap m7G可构建Cap 0，T7 mScript一体化系统可进一步构建Cap 1，改善稳定存在与蛋白表达。

④ Poly（A）尾不均或缺失：单独转录产物无3′尾，转染后存在时间较短。A-Plus加尾模块可按需设定尾长，与加帽产物组合形成完整mRNA。

⑤ 加帽共转录效率受限：帽类似物共转录会受GTP竞争影响。ScriptCap采用转录后酶法加帽，适合对加帽比例要求较严格的科研场景。

⑥ RNA降解难以控制：ScriptGuard RNase抑制剂可纳入转录、加帽、加尾体系，降低操作过程中RNase导致的片段化。

⑦ mRNA质量评价不完整：如实验需要，可配合CELLSCRIPT EZ-QC加帽效率、Cap 1效率与Poly（A）长度检测试剂，对批次一致性进行过程控制。

▌四、购买本品牌产品常见疑问与解答

① 问：CELLSCRIPT试剂是否可用于临床诊断？  

答：本文涉及产品均标注为研究使用，不用于体外诊断、治疗给药或人体直接使用。

② 问：T7 mScript与T7-Scribe应如何选择？  

答：若只需合成原始IVT RNA，选T7-Scribe；若希望一次完成转录、Cap 1加帽与Poly（A）加尾，选T7 mScript Standard mRNA Production System V2。

③ 问：模板是否必须线性化？  

答：建议采用经限制性酶切线性化的双链DNA。超螺旋质粒可导致读穿、收量下降与产物异质，线性化并纯化后效果更可控。

④ 问：加帽后是否必须纯化再加尾？  

答：ScriptCap m7G加帽产物在适宜反应条件下可直接进入A-Plus加尾；若输入RNA杂质较多或盐浓度偏高，建议先纯化再继续。

⑤ 问：－20℃冷冻是否有特殊要求？  

答：按说明书存放于无自动除霜循环的－20℃环境；含甘油酶液避免－70℃，防止冻存损伤与反复冻融。

⑥ 问：如何提升加帽效率？  

答：保证RNA纯化充分、无RNase污染；SAM现配现用并保持低温；对5′结构复杂RNA可适当热变性；必要时延长加帽孵育时间。

⑦ 问：Poly（A）尾长度如何调控？  

答：通过A-Plus酶量、ATP浓度与孵育时间调节。短时间、少酶量通常获得较短尾；延长时间或增加酶量可获得更长尾，但需结合下游转染与稳定性需求优化。

⑧ 问：上海起发实验试剂有限公司可提供哪些支持？  

答：上海起发实验试剂有限公司作为CELLSCRIPT特约代理经销商，可提供货号核对、规格匹配、货期信息、说明书参数确认及科研采购对接，不涉及产品技术结论的替代判断。

⑨ 问：修饰核苷mRNA是否可用这些产品？  

答：本文三款主要针对规范尿苷RNA及Cap 1标准mRNA。若需假尿苷、N1-甲基假尿苷、m5C等修饰，应选择CELLSCRIPT INCOGNITO等对应修饰转录系统，并按模板与修饰核苷类型确认。

⑩ 问：RNA收量达不到说明书参考值怎么办？  

答：先核查模板线性化效率、纯度、启动子强度、NTP新鲜度与转录时间；再用对照模板验证试剂盒状态。若仍异常，保留批号信息并联系技术支持按具体反应条件排查。

▌五、适用实验场景

① mRNA合成与转染：以T7 mScript获得Cap 1、Poly（A）mRNA，用于真核细胞蛋白表达。  

② RNA探针与标准品：以T7-Scribe合成生物素、荧光标记RNA。  

③ 体外翻译：未加帽或加帽RNA均可按系统要求投入兔网织红细胞、小麦胚芽等翻译体系。  

④ 加帽工艺研究：以ScriptCap m7G建立Cap 0，再扩展Cap 1，比较不同帽结构对稳定性的影响。  

⑤ 疫苗与免疫研究：标准mRNA合成可作为抗原表达、免疫原性评价的初期研究材料。  

⑥ RNA质量控质：配合加帽效率、尾长与dsRNA检测，建立小试批次评价数据。

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更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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