Ubiquigent去泛素化酶动力与特约代理经销商介绍

▌前言

Ubiquigent™（Ubiquigent Ltd.，商标标识 Ubiquigent logo）正式授权上海起发实验试剂有限公司作为其在中国的特约代理经销商，承接全线研究试剂与试剂盒的询单与交付。本次授权覆盖泛素级联标准品、重组DUB酶、E1/E2/E3组分及DUB检测底物等目录产品。

一、公司业务轮廓

▌1.1 研究重心

Ubiquigent的业务轴线围绕泛素-蛋白酶体系统（UPS）与去泛素化酶（DUB）两个互锁模块展开。其试剂目录不覆盖常规Western一抗或通用培养基添加剂，而是沿着E1活化酶—E2结合酶—E3连接酶—泛素链修饰体—DUB逆转酶—26S蛋白酶体这条级联通路逐节点布货。

▌1.2 平台协同背景

实验室运营与MRC蛋白磷酸化及泛素化研究单元保持日常协作关系，试剂批间放行沿用同一套InstantBlue™ SDS-PAGE与质谱鉴定双轨COA流程；每支蛋白产品附带Lot-specific证书，可追溯分子量、纯度条带、酶活验证条件三项原始读数，而非仅给出浓度标称值。

▌1.3 目录结构（节选常备大类）

▸ 泛素及泛素样修饰蛋白（Ub / SUMO1 / SUMO2 / ISG15 / NEDD8）

▸ 全系列Lys6/11/27/29/33/48/63二聚泛素链标准品

▸ E1（UBE1）、十余种E2同工酶、Cul-Rbx-Skp复合体类E3组件

▸ 重组DUB酶（USP / UCH / OTU / JOSD / BAP / CYLD亚家族）

▸ 荧光酶活底物（Rhodamine 110 / AMC / TAMRA标记泛素）

▸ DUB assay配套缓冲液与USP14活化/检测试剂盒

二、热卖产品

▌产品01｜Cat. No. 60-0106-010 · Di-ubiquitin (K48-linked)

品名：Lys48-连接二聚泛素（无标签）

规格：10 μg / 支

▸ 产品特点：酵母定量蛋白组学数据显示K48链约占天然泛素连接总数的29%，与K11并列两类丰度较高的链型；K48四聚体被报道为蛋白酶体识别的较短功能单元，其二聚体形式适合用作体外 cleavage assay 的阳性底物对照与抗体验证梯度点。

▸ 存储条件：-70 ℃避光保存；复溶后按单次用量分装，-20 ℃可维持6个月，避免反复冻融超过三次。

▸ 工作原理：两个泛素单体通过第48位赖氨酸ε-氨基与相邻单体C端甘氨酸形成异肽键连接；相较于K63链的伸展构象，K48链呈致密球状堆积，与蛋白酶体Rpn10/Rpn13识别域的亲和力存在可测差异。

▸ 使用方法：以GST-USP2（对连接类型宽容的DUB）作参比酶，37 ℃孵育60 min后4–12%梯度胶电泳，InstantBlue™染色判读二聚体条带消退与单体条带生成；建议同步设mono-ubiquitin空白孔与酶 alone 对照孔。

▌产品02｜Cat. No. 64-0037-050 · USP21 CD(196-565) [GST-tagged]

品名：泛素特异性蛋白酶21催化结构域（残基196–565）谷胱甘肽融合重组蛋白

规格：50 μg / 支

▸ 产品特点：截取全长USP21的催化核心区段，去除N端无序区域带来的批间聚集倾向；表达宿主为大肠杆菌，C端保留GST标签便于pull-down回收与固定化酶活柱制备；质谱鉴定放行，SDS-PAGE纯度优于76%。

▸ 存储条件：-70 ℃长期保存；制剂体系为50 mM HEPES pH 7.5 / 150 mM NaCl / 2 mM DTT / 10%甘油，开管前4 ℃短暂离心收集管壁液滴。

▸ 工作原理：归属半胱氨酸蛋白酶类DUB，通过活性中心半胱氨酸亲核攻击底物异肽键的羰基碳，释放游离泛素或缩短末端链长；文献中该酶与着丝粒微管、MARK激酶互作网络有关联报道。

▸ 使用方法：按1 μg酶 / 50 μL反应体系加入预冷DUB Assay Buffer（可配64-2001-500五倍母液稀释），与Ub-Rhodamine 110底物37 ℃共孵育，酶标仪Ex/Em 485/535 nm通道连续读取斜率；未用完母液不建议二次冻融，按5 μL单份分装为宜。

▌产品03｜Cat. No. 60-0117-050 · Ubiquitin-Rhodamine 110

品名：罗丹明110标记泛素荧光底物（Glycine连接臂）

规格：50 μg / 支

▸ 产品特点：C端甘氨酸与Rhodamine 110荧光团偶联，DUB剪切前荧光自淬灭，切割瞬间释放游离R110-glycine产生可定量荧光跳变；是DUBprofiler™平台及各家重组USP/UCH/OTUB酶活放行的共用参比底物。

▸ 存储条件：按管身标签条件保存，-70 ℃干粉态稳定性较长；复溶建议使用无菌1×DUB Assay Buffer而非纯水，分装后-20 ℃遮光存放。

▸ 工作原理：荧光共振淬灭解除模型——完整底物中Ub与R110空间邻近抑制发射，DUB活性中心水解异肽键后产物扩散，量子产率回升，荧光增量与酶活性在一定时间窗内呈线性关系。

▸ 使用方法：终浓度建议落在0.5–2 μM区间做标准曲线，每板设无酶空白与已知浓度USP4阳性对照双孔；检测窗口控制在初始速率线性段（通常前20 min），避免底物耗尽带来的斜率回落。

三、这套试剂能够对应到实验里的具体卡点

▌3.1 链型交叉识别问题

市售泛素化总蛋白抗体（如FK2，Cat. 60-0106系列同目录可配68-0121-500）对K48与K63均有反应，单独使用无法区分降解信号与DNA损伤应答信号。搭配K48/K63分别独立的二聚标准品跑梯度和平行cut-off对照，可以把WB条带的链型归属收回到可论证范围。

▌3.2 内源底物丰度不足时的pull-down回收率

全细胞裂解液中天然K63修饰蛋白占比偏低，直接用普通GST树脂背景偏高。选用目录内链型特异捕获组件配合Glutathione Agarose Resin分级洗涤（三次 × 5 min），再用10 mM还原型谷胱甘肽洗脱，质谱鉴定前的样品洁净度有改善空间。

▌3.3 DUB抑制剂初筛的酶活基线漂移

化合物孵育实验中常见变量是底物批次与酶储存条件。同一Lot的60-0117-050加同一Lot的64-0037-050 / 64-0018-050组合，能把板间CV控制在可复现区间，这对后续IC50拟合的置信带宽度有直接影响。

▌3.4 E3连接酶重构体系的组分兼容

Cul1/Rbx1/Skp1（63-1001-025）与UBE2D1（62-0010-020）同源于无标签表达体系，与带GST/6His标签的DUB产品混用时无需额外换缓冲液，减少盐离子冲突带来的沉淀。

四、采购与实验侧的实务问答

▌Q1 货期与批次如何安排较为稳妥

目前目录内多数重组酶与荧光底物由英国邓迪工厂按Lot放行，常规货号到岸周期受航运排期影响存在浮动。建议课题组按季度消耗量一次性提交60-0117-050与常用DUB酶的合并清单，同一Lot号覆盖整轮化合物筛选可减少对照重做。

▌Q2 复溶体积有没有推荐值

COA仅给浓度标称，未强制规定复溶体积；实验室通行做法是按工作液10×终浓度反推，例如64-0037-050按0.5 mg/mL母液配制后得到约100 μL，足够96孔板12–16块。复溶缓冲内DTT需新鲜补加。

▌Q3 bulk包装与单支装怎么选

10 μg规格的二聚链标准品适合方法学建立阶段的梯度摸索；进入正式样本队列后60-0106-050（50 μg装）与60-0107-050（K63五十微克服装）的单位成本更合适。所有规格均标注For research use only，不面向诊断或临床样本处理场景。

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更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

🔖Ubiquigent热卖产品