▌前言
NVIGEN(商标标识:MagVigen™)旗下磁性纳米颗粒试剂现已由上海起发实验试剂有限公司作为特约代理经销商负责国内渠道对接,本次上线的三款试剂盒覆盖cfDNA提取、NGS文库分选与稀有细胞富集三类常规湿实验场景。
▌一、公司研发脉络与技术平台
NVIGEN是一家以分子工程纳米粒为底层载体的生物医药试剂研发企业,核心技术来源于加州大学伯克利分校与斯坦福大学持续二十年的纳米医药研究方向。 目前对外供应的商品化试剂集中在四个纳米粒平台:MagVigen™磁性纳米粒、MyQuVigen™磁-量子点复合粒、MaxVigen™多功能体内成像粒、AuVigen™生物兼容金纳米粒。
其中面向日常科研实验流通量较大的为MagVigen™系列。该系列以约8 nm超顺磁性氧化铁为核心,外包硅烷化壳层并共价连接功能基团或识别配体,终产物水合粒径落在数十至一百纳米区间。 相比传统微米级分离微球,同质量下纳米粒可提供约十倍表面积,结合容量随之抬升,所需洗脱体积相应缩小,对后续qPCR、数字PCR与NGS上机浓度更为友好。
▌二、热卖产品
◈ 产品①|MagVigen™ Plasma cfDNA Extraction Kit
▸ 货号 Cat# K61003
▸ 品名 Plasma cfDNA Extraction Kit(血浆游离DNA捕获试剂盒)
▸ 产品特点 适用于血浆与血清样本中的cfDNA、ctDNA、cffDNA及线粒体来源cfDNA回收;输入体量可在100 µl至10 ml区间内线性放大;免离心柱、免高速离心步骤,两段75%乙醇洗涤后两次洗脱可进一步提高得率。
▸ 存储条件 组分4℃避光保存,保质期6个月;运输途中短期室温放置不显著影响活性。
▸ 工作原理 样本裂解后,经表面修饰的MagVigen™纳米粒通过固相可逆固定化(SPRI)机制与cfDNA片段形成nanoparticle-oligo复合体,在外加磁场下完成液相-固相转移,未结合蛋白、盐离子与小片段干扰物随上清移除。
▸ 使用方法 ①裂解血浆样本;②按比例加入纳米粒悬液室温孵育结合;③磁架上静置至溶液澄清,吸弃上清;④Wash 1缓冲液重悬洗涤一次;⑤75%乙醇洗涤两次,每次静置后吸净;⑥20 µl洗脱缓冲液室温洗脱5分钟,磁分离后收集上清;⑦可按需重复一次洗脱合并产物,直接转入下游PCR或建库。
◈ 产品②|MagVigen™ EASY DNA Select Kit
▸ 货号 Cat# K61001-Easy
▸ 品名 EASY DNA Select Kit(常规片段范围DNA分选纯化试剂盒)
▸ 产品特点 覆盖100至500 bp片段回收窗口,操作流程与市面常用AMPure XP体系一致,可在同等条件下承接原有实验SOP;单微升磁珠结合容量约22至500 ng DNA。
▸ 存储条件 4℃长期保存,开封前回温5至20分钟后涡旋混匀再取用。
▸ 工作原理 依据PEG/盐诱导的SPRI剂量效应,磁珠与样本按固定体积比(1:1)孵育后,≥100 bp的双链与单链DNA均可被截留,短片段引物、dNTP、酶残余及盐类留在上清中。
▸ 使用方法 ①磁珠提前回温并涡旋10秒;②40 µl磁珠悬液与40 µl DNA样本等体积混合,室温静置30分钟;③磁分离,吸弃上清;④新鲜配制80%乙醇100 µl洗涤两次,每次2分钟;⑤室温风干5分钟,注意避免过度干燥致 pellet 开裂;⑥20 µl Elution Buffer洗脱5分钟,磁分离转移上清,可进行凝胶电泳、Qubit定量或上机测序。
◈ 产品③|MagVigen™ – anti-CD19, Human Nanoparticles
▸ 货号 Cat# 51005 / Kit版 K51005
▸ 品名 anti-CD19人源磁性纳米粒(细胞分选试剂)
▸ 产品特点 纳米粒径远小于常规微米级分选微球,对抗原表位的可及性更好,表面经专有涂层处理以降低对CD19阴性细胞的非特异黏附;Kit版额外附带10×浓缩洗涤缓冲液15 ml。
▸ 存储条件 1 ml PBS(pH 7.4)体系分装,全部组分4℃保存,保质期6个月。
▸ 工作原理 偶联抗CD19单克隆抗体的纳米粒在温和旋转条件下与样本中的CD19⁺细胞发生亲和结合,磁场静置5分钟即可完成结合细胞群与悬液其余组分的物理分离;磁珠结合后的细胞团块仍可裂解用于后续蛋白或核酸分析。
▸ 使用方法 ①外周血等体积PBS+2 mM EDTA稀释后,2 ml Ficoll-Hypaque每1 ml血样密度梯度离心(400 g,室温40分钟,无刹车);②收集中间单核细胞层,4倍体积冷PBS洗涤一次(400 g,4℃,10分钟);③25 µl磁珠用PBS洗两次后重悬至25 µl,加入含400至500万细胞的悬液,4℃轻柔旋转孵育1至2小时;④磁架放置5分钟;⑤正选保留 pellet 洗涤一次后重悬于培养液,去除法则直接移走上清至新管。
▌三、这套试剂体系可对应的实验卡点
▌01|液体活检起始量低、ctDNA占比仅千分级的样本
K61003的收率在PicoGreen与Bioanalyzer两种定量方式下对内源cfDNA与加标梯度的回收表现稳定,小片段区域的捕获偏好较传统柱法有所改善,适合早筛与疗效监测类课题的文库起始物料制备。
▌02|三代长读长与二代短读长文库需要分开维护两套分选条件
K61001-Easy(100至500 bp)与同系列的K61001-Extend(500至3000 bp)共用一套缓冲体系,仅调整磁珠/样本体积比即可切换窗口,课题组不必分别维护两套耗材库存。
▌03|稀有细胞分选后仍需保留下游转录组或蛋白组分析通路
51005纳米粒结合态细胞可直接裂解进后续流程,不需要额外的解离酶处理步骤,对原本产量有限的临床分选样本较为实用。
▌04|IP/Co-IP与ChIP实验里背景非特异拉拽偏高
MagVigen™全系表面涂层对胞内杂蛋白的非特异吸附维持在较低水平,21001等通用功能化磁珠可按实验需要自行偶联一抗或寡核苷酸探针。
▌四、采购与实验前的常见问答
▸ Q1 K61001-Easy能否直接沿用实验室现有的AMPure XP SOP
可以。两者在100至500 bp窗口内的体积比与孵育条件一致;若需要覆盖500 bp以上长片段,建议单独评估K61001-Extend并按比例梯度优化。
▸ Q2 磁珠从4℃取出后需要回温多久
视分装瓶容积,5至20分钟,涡旋一至两次后再吸取;混匀与洗涤步骤建议吹打5至10次或短时涡旋,避免气泡混入影响片段截留重复性。
▸ Q3 K61003最大能处理多大体积的血浆
文献级workflow支持100 µl至10 ml连续放大,放大时只需同比倍增磁珠用量与洗涤液体积,不需要重新摸索结合时间。
▸ Q4 磁分离是否一定要配离心步骤
多数场景下外接磁分离架(如配套Cat# A20006)即可完成全部固液转移;离心并非必需,强行高速离心反而可能让纳米粒压实后难以重悬。
▸ Q5 51005分选后的细胞存活率如何评估
建议在磁分离完成后取少量重悬液做台盼蓝或流式活死染色,正选与去除两种路径的回收率和纯度结果会因起始样本中单核细胞比例而有差异,正式实验前宜用标准PBMC样本做一次条件滴定。
关键词:cfDNA提取试剂盒、MagVigen磁珠分选、NGS文库片段筛选、液体活检样本前处理、plasma游离DNA纯化、SPRI磁珠替代方案、人源CD19细胞分选、K61003 protocol、K61001-Easy建库纯化、稀有循环肿瘤细胞富集、链霉亲和素DNA捕获探针、染色质免疫沉淀磁珠、mRNA Poly-T磁珠分离、磁性纳米粒表面偶联、科研试剂进口渠道、临床样本ctDNA回收、二代测序文库cleanup、磁分离架A20006配套耗材、MyQuVigen荧光磁粒成像、可生物降解超顺磁氧化铁纳米粒
更多产品信息,请联系中国区域代理商:上海起发实验试剂有限公司
(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
🔖NVIGEN热卖产品
货号 | 品名 |
41007 | MyQuVigen™ – anti mouse IgG conjugates, 535, 585, 615 or 635 nm emission |
A20006 | Magnetic rack |
K21005C-1ml | MagVgien-Streptavidin kit, cell separation |
K21005P-1ml | MagVigen™ – Streptavidin, protein capture kit |
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