ALSTEM M050说明书

ALSTEM M050说明书

ALSTEM是一家位于湾区的早期生物技术公司，拥有快速扩展的产品和服务组合，为生物制药和学术机构提供服务。受到加利福尼亚干细胞研究承诺的启发，ALSTEM于2012年由具有iPS细胞重编程和基因组编辑技术专业知识的科学家创立。

EZStem™ Stem Cell Freezing Medium: #M050

EZStem™干细胞冷冻培养基：＃M050

产品描述

开发EZStem™干细胞冷冻培养基，在培养人胚胎干（ES）和诱导多能干细胞（iPS）时，在冷冻保存期间保持无异源和无饲养细胞条件。它是一种用于人ES / iPS细胞冷冻保存的即用型解决方案。用EZStem TM干细胞冷冻培养基保存的人多能干细胞导致高细胞活力和恢复，并且在解冻后表达典型的多能标记物。EZStem™干细胞冷冻培养基已经在人ES和iPS细胞上进行了测试。与含有血清的冷冻培养基和竞争无血清产品相比，获得了更好的结果，使其成为用于冷冻保存有价值的人多能干细胞的理想产品。

• 概观

该方案可用于冷冻保存用饲养细胞培养的人胚胎干（hES）细胞或无饲养细胞条件。该方法描述了在6孔板的一个孔中培养的细胞的冷冻保存。如果冷冻多个孔，可以按比例放大量，但是，每个低温小瓶中只应将1ml细胞悬浮液等分。始终将EZStem Freezing Medium放在冰上。

• 程序

1.在冰上准备EZStem冷冻培养基。

2.在6孔板中培养细胞直至60％至80％汇合。

3.从hES / hiPS细胞培养物中吸出培养基并用DPBS（2mL /孔）冲洗。

4.每孔加入0.5mL EZStem无酶干细胞解离溶液（目录号M100，ALSTEM）。将其在室温下静置1-2分钟。

5.吸出解离溶液，每孔用2 mL DMEM / F-12轻轻冲洗2 - 3次。

6.加入2mL /孔新鲜培养基，用细胞刮刀刮去菌落。

7.将分离的细胞悬浮液转移至15mL锥形管中。

8.在室温下以200×g离心5分钟。

9.轻轻吸出上清液，轻敲管底，松开细胞沉淀。

10.轻轻地将颗粒重新悬浮在冷的EZStem冷冻培养基中，注意使团块留下比通常用于传代的团块更大的团块。

11.将1mL细胞悬浮液转移到每个标记的低温小瓶中。

12.将小瓶放入异丙醇冷冻容器中，将容器置于-80℃过夜。

13.第二天转移到液氮罐。

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