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Noviocell NCS01操作说明书

点击次数:32 发布时间:2019/10/30
提 供 商: 上海起发实验试剂有限公司 资料大小:
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Noviocell NCS01操作说明书

syntrix-P kit

Quantity: 10 ml 
Catalog number: NCS01

Syntrix-P是一种合成基质,可用于为各种基于细胞的测定法创建定义的3D微环境。Syntrix-P已被低聚乙二醇部分官能化,从而为细胞提供了低粘附力的表面。

描述

 

syntrix-p试剂盒使用指南

syntrix-p是一种合成基质,可用于为各种基于细胞的分析创建定义的三维微环境。syntrix-p已被低聚乙二醇部分功能化,从而呈现出与细胞的低粘附表面。在细胞培养基存在下,syntrix-p自组装成水凝胶,水凝胶呈现纳米纤维结构,类似于天然的细胞外基质。已发现所得水凝胶支持各种细胞系(如3T3、HepG2、MDCK和CaCO-2)和原代细胞(如HUVEC、HADSC和HESC)。

工具包内容

Syntrix-P Kit                                                                     Amount

Syntrix-P (Solution A)*                                                   2 x 1.65 mL

Hyaluronic acid (Solution B)*                                          1 x 1.5 mL *

 

Store at -20o C

 

一般考虑

•仔细检查解冻溶液A后是否有任何沉淀。如有必要,通过上下数次移液管重新溶解任何沉淀。

•首次解冻后,取适当体积的等分溶液A,以避免多次冻融循环。此外,将溶液A在室温下的时间保持在最低限度,即在进行实验后立即将其放回-20°C。

•syntrix-p可用于3-9mg/ml的最终基质浓度范围。

表1中的体积导致最终的基质浓度为5 mg/ml,为特定应用的优化提供了良好的起点。由于不同的细胞类型可能需要不同的浓度,我们参考了文件协议中其他浓度所需的体积

•当在96孔板1 syntrix-p试剂盒中以5 mg/ml的浓度和每孔60微升的体积使用时,可为约2.5个96孔板提供足够的基质。

•Syntrix-P溶液呈酸性(pH 2-2.5)。包封后,凝胶的ph值将在6.5-7.5之间。ph值随后将与添加的介质平衡

通过细胞培养基中存在的缓冲液中和SyTrIX-P的凝胶化,并在混合时立即开始。因此,“细胞悬浮液+溶液B”与“SyTrIX-P”(溶液A)的混合是非常重要的,但要快速而小心地进行(避免引入气泡)。我们建议在混合时直接开始电镀,因为部分形成的凝胶的破坏会对最终凝胶完整性产生负面影响。

•细胞在syntrix-p中培养,浓度范围为4*104-2.5*107细胞/ml。需要滴定法来确定实验的最宜细胞密度。

高通量实验的一个很好的起点是以每毫升凝胶4*104–2*105个细胞的密度对细胞进行平板化。

•在电镀后的0.5-2小时内,使用带有酚红pH指示器的细胞培养基制备的基质将颜色从三文鱼色变为浅粉色。syntrix-p与所有标准培养基兼容。

•重要的是尽量减少气泡的形成,因为最终凝胶中存在气泡会干扰气泡与井的连接。

•为了填充更多的井,建议使用多通道吸管。

•Syntrix-P矩阵随着时间的推移透明度增加。为了获得更高的光学透明度,使用较低的凝胶体积,因为这将降低凝胶的光吸收率。

•syntrix-p是一种完全定义的合成基质,与基底膜提取物相比,不含可溶性生长因子或细胞因子。为了获得最宜的细胞生长和分化,可能需要向培养基中添加生物活性分子(如生长因子、细胞因子等)。

 

 

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