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15921799099
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详细介绍
| 品牌 | Sigma-Aldrich | CAS | 2508-19-2 |
|---|---|---|---|
| 分子式 | C₆H₃N₃O₉S | 分子量 | 293.17 |
| 货号 | P2297 | 规格 | 10ML |
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药,综合 |
一、 产品描述
• 中文命名：苦基磺酸 溶液
• 英文命名：Picrylsulfonic acid solution / 2,4,6-Trinitrobenzenesulfonic acid solution (TNBS)
• 货号：P2297
• 产品品牌：Sigma-Aldrich
• 产品级别：BioReagent（生物级试剂，满足高标准的生化实验需求）
• 物质纯度/浓度：5 % (w/v) 水溶液（即每100mL溶液中含有5g苦基磺酸）
• 物理形态：液态（常温下为澄清至微浑浊的黄色液体）
• 经验分子式：C₆H₃N₃O₉S
• 主要应用：专用于光谱法定量测定伯胺（Primary amines），同时也可作为亲水改性剂及多肽合成中的氨基酸保护基修饰试剂。
二、 产品核心特点
1. 优秀的检测灵敏度与特异性
苦基磺酸 溶液作为一种经典的胺类检测探针，能够与伯胺基团发生高效、特异的亲核芳香取代反应。其反应产物在特定的紫外可见光区域（通常在340nm或420nm附近，取决于具体的缓冲体系和pH环境）具有强烈的吸收峰，从而实现对痕量伯胺物质的精准定量检测。
2. 高品质生化级（BioReagent）标准
作为Sigma-Aldrich旗下的高等级生化试剂，该产品经过了严格的质量控制和纯度筛选，确保极低的杂质干扰。其批次间稳定性高，能够满足从基础教学实验到前沿生命科学研究的各种严苛要求。
3. 预配制的即用型水溶液
苦基磺酸（TNBS）纯品在干燥状态下具有一定的爆炸危险性，且在水中的溶解度有限。本产品将其预先配制为5% (w/v) 的稳定水溶液，不仅极大地提升了实验操作的安全性，还免去了实验人员自行繁琐配制的步骤，开瓶即可使用，显著提高了实验室的工作效率。
4. 广泛的应用兼容性
除了作为经典的伯胺定量试剂外，由于其分子结构中含有强吸电子的硝基基团，使其苯环极易受到亲核进攻，因此在有机合成、高分子材料改性（如作为亲水改性剂接枝聚合物表面）以及免疫学动物模型构建（如TNBS诱导的结肠炎模型）中均有重要应用。
三、 储存与运输条件
• 短期储存（日常）：建议在 2℃ 至 8℃ 的避光环境下密封储存。在此条件下，产品可保持稳定至少五个月且分解率低于5%。
• 长期储存：若需延长保存期限，建议分装后置于 -20℃ 冷冻保存，可有效保持试剂的长期活性与稳定性。
• 避光要求：该试剂对光线较为敏感，见光易发生分解产生Picric acid等杂质，因此全程避光（如存放于棕色试剂瓶或用铝箔纸包裹）对于维持其化学性质至关重要。
• 运输条件：常温运输即可，但收到货物后应立即按规定温度储存。
• 安全警示：虽然本品为稳定的水溶液，但仍属于含能材料衍生物。严禁在开口容器中加热至干，干燥后的残留物具有高的爆炸性。所有使用过的容器和废弃物必须按照危险化学品的处理规范进行专门处置。
四、 工作原理与反应机制
苦基磺酸（TNBS）在定量分析伯胺（如氨基酸、多肽、蛋白质中的N端α-氨基或赖氨酸残基的ε-氨基）时，其核心工作机制基于 亲核芳香取代反应（Nucleophilic Aromatic Substitution, S_N2）。
1. 反应触发：在弱碱性（通常pH 8.0 - 9.0）的缓冲体系中，伯胺（R-NH₂）分子中的氮原子由于带有孤对电子，表现出强烈的亲核性。
2. 亲核进攻：伯胺基团向TNBS分子中电子云密度较低的苯环碳原子（通常是连接磺酸基的对位）发起亲核进攻，形成一个带负电荷的 Meisenheimer 络合物（σ-络合物）中间体。
3. 离去基团脱离：随着反应的进行，作为优良离去基团的磺酸根（SO₃⁻）从苯环上脱落。
4. 产物生成：最终生成稳定的、呈橘黄色的 TNP-胺
该有色衍生物在 340 nm（酸性条件）或 420 nm（碱性条件）波长处具有最大的光吸收值。根据朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law），通过测定反应体系在特定波长下的吸光度（OD值），即可计算出未知样品中伯胺基团的准确浓度。
五、 解决实验中的哪些痛点与问题
在生命科学与分析化学的日常实验中，研究人员经常面临以下难题，而本产品能够提供解决方案：
1. 蛋白质/多肽浓度的快速准确定量
传统的Lowry法或BCA法在含有高浓度去垢剂（如SDS、Triton X-100）或还原剂（如DTT、β-巯基乙醇）的样品中会受到严重干扰，导致读数偏差极大。而TNBS法则对这类干扰物质具有强的耐受性，能够在复杂的裂解液或纯化缓冲体系中依然保持对蛋白质伯胺基的精准检测。
2. 氨基酸组成分析中的N端测定
在多肽测序或氨基酸分析仪的前处理中，需要明确样品中游离α-氨基的数量。TNBS可以与除了脯氨以外的所有氨基酸发生反应，是进行氨基酸定性和定量分析的经典手段。
3. 高分子材料的表面亲水化改性
对于某些本身疏水的聚合物基质，研究人员可以利用TNBS分子上的磺酸基或经过衍生化后的活性位点，将其接枝到材料表面，从而显著改善材料的亲水性能和生物相容性。
4. 免疫学炎症模型的诱导
在动物实验（特别是小鼠结肠炎研究）中，TNBS常被用作半抗原（Hapten）。当其与组织蛋白结合后，能够将自身转化为抗原，从而诱发宿主产生迟发型超敏反应，模拟人类炎症性肠病（IBD）的病理过程。
六、 实验使用方法与操作流程
为了获得最佳且可重复的实验结果，建议参考以下基于经典文献优化的操作步骤进行伯胺浓度的测定：
A. 标准曲线绘制与样品测定（以96孔板为例）
1. 试剂平衡：从冰箱（2-8℃）中取出本品，置于室温下避光平衡30分钟。同时准备好pH 8.5的硼酸盐缓冲液（0.1 M）作为反应介质。
2. 制备标准品梯度：使用已知浓度的伯胺标准品（如甘氨或牛血清白蛋白 BSA），在缓冲液中稀释出一系列浓度梯度（例如 0, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 mM）。
3. 加入TNBS试剂：向每个孔中加入等体积（如100 µL）的平衡后TNBS溶液，轻柔振荡混匀。此时溶液应呈现均匀的黄色。
4. 避光孵育：盖上多孔板盖，在室温（约25℃）下避光孵育 2 小时，或在 37℃ 下避光孵育 1 小时。注意：温度过高可能导致试剂分解，需严格控制。
5. 终止反应与测定：根据需要，可加入稀酸或特定终止液中止反应。随后将多孔板放入酶标仪中，在 420 nm（或340 nm，视具体缓冲体系而定）波长下测定各孔的吸光度值（OD₄₂₀）。
6. 数据处理：以标准品的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。根据样品的吸光度值，即可从标准曲线上精确查得样品中的伯胺浓度。
B. 多肽/蛋白质N端修饰操作
1. 将目标多肽溶解于适量的缓冲液（pH 8.5）中。
2. 按多肽物质的量 5-10 倍的比例加入本品。
3. 在室温下避光搅拌反应 2-4 小时。
4. 反应结束后，可通过凝胶过滤色谱（GFC）或透析的方法去除未反应的TNBS小分子及副产物，收集改性后的多肽产物。
七、 常见问题分析与解决方案（FAQ）
在使用本品的过程中，可能会遇到一些技术疑问，以下是针对常见问题的专业解答与排查思路：
• 问题1：溶液底部或瓶壁出现了少量黄色或无色晶体，是否还能继续使用？
• 原因分析：这可能是由于储存温度过低导致部分溶质析出，或是试剂轻微分解产生了微量的晶体。
• 解决方案：一般情况下，这些晶体不会影响产品的核心使用性能。建议将试剂瓶取出，置于室温下充分平衡并轻轻摇晃直至晶体全重新溶解。若需高精度，可通过0.22 µm水系滤膜过滤后使用。
• 问题2：实验测得的吸光度值偏低或不稳定，可能的原因是什么？
• 原因分析：可能是pH值不适宜导致反应不全；或是样品中存在高浓度的还原性物质消耗了TNBS；亦或是孵育时间不足、光线过强导致产物分解。
• 解决方案：务必使用pH 8.0-9.0的缓冲体系；确保反应在严格避光的条件下进行；适当延长避光孵育时间至过夜；检查样品中是否含有干扰性强的还原剂。
• 问题3：产物的特征吸收峰除了420nm，还有没有其他选择？
• 原因分析：TNP-胺衍生物的紫外吸收受环境pH影响显著。
• 解决方案：在酸性环境（pH < 5.0）下，最大吸收峰会蓝移至 340 nm 左右，而在强碱性环境（pH > 10.0）下，则会红移至 460 nm 左右。可根据实验室仪器的配置灵活调整测定波长。
• 问题4：废弃的TNBS溶液应当如何处理？
• 解决方案：切勿直接倒入下水道。应先用大量水稀释，然后加入过量的溶液并缓慢加热煮沸，使其分解为无毒的化合物后再行丢弃，或交由具有资质的危废处理机构处置。
关键词：Sigma-Aldrich、西格玛奥德里奇、Sigma试剂、苦基磺酸、TNBS、P2297、伯胺测定试剂盒、生化试剂、多肽合成试剂、氨基酸分析、蛋白质定量、免疫学试剂、结肠炎模型、亲水改性剂、生命科学试剂、分析纯试剂、实验室耗材、试剂、高性能生化试剂、产品说明书。
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（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）
⚡Sigma-Aldrich热卖产品
货号 | 品名 | 规格 | 品牌 |
I0516-5ML | Insulin solution from bovine pancreas | 5mL | Sigma-Aldrich |
H0888-1G | Hydrocortisone | 1g | Sigma-Aldrich |
P2297-10ML | Picrylsulfonic acid solution | 10mL | Sigma-Aldrich |
F5881-10X10ML | 弗氏佐剂 | 10 X 10 ML | Sigma-Aldrich |
F5881-10ML | Freund’s Adjuvant, Complete | 10mL | Sigma-Aldrich |
MAB1285FX | Anti-HLA-B27 Antibody, clone HLA.ABC.m3, FITC conjugated | 100 assays | Sigma-Aldrich |
B2064-100G | Bovine Serum Albumin | 100g | Sigma-Aldrich |
33429-100MG-R | Doxycycline hyclate | 100mg | Sigma-Aldrich |
F8687-500ML | 澳洲胎牛血清, 热灭活 | 500ML | Sigma-Aldrich |
C-141-1ML | Cannabigerol solution | 1mL | Sigma-Aldrich |
10109169001 | RNaseA（RNASEA-RO） | 100mg/瓶 | Sigma-Aldrich |
48914-U | ProClin™ 300 | 400ml | Sigma-Aldrich |
10771-100ml | Histopaque®-1077 | 100ml | Sigma-Aldrich |
239216-25mg | 碳酸钙 | 25mg | Sigma-Aldrich |
U5128-1KG | 尿素 | 1 kg | Sigma-Aldrich |
243159-1G | (R)-3-羟基丁酸甲酯 | 1g | Sigma-Aldrich |
M4287 | Mitomycin C | 2mg | Sigma-Aldrich |
RECOMT-1KT | 凝血 CleanCleave™ 试剂盒 | 1 kit | Sigma-Aldrich |
M3633-250MG | 4-Methylumbelliferyl β-D-glucopyranoside | 250mg | Sigma-Aldrich |
G9145 | [Leu15]-Gastrin I human | 0.5mg | Sigma-Aldrich |
T5648-1G | 泰莫西芬 | 1G | Sigma-Aldrich |
P8340-5ML | Protease Inhibitor Cocktail | 5ml | Sigma-Aldrich |
152633 | 橄榄醇 | 1g | Sigma-Aldrich |
G7641-1MG | Monosialoganglioside GM1 from bovine brain | 1mg | Sigma-Aldrich |
P5493-1L | 磷酸盐缓冲盐水 | 1L | Sigma-Aldrich |
R8758-500ml | 1640培养基 | 500ml | Sigma-Aldrich |
H7379-1G | 血红蛋白 人 | 1g | Sigma-Aldrich |
610000-1EA | 挤出器套件，带支架/加热块 | 1 ea | Sigma-Aldrich |
91077C-100MG | 重组胰岛素 | 100mg | Sigma-Aldrich |
C8654 | 酪蛋白酸钠 | 500g | Sigma-Aldrich |
MR-070-D | EmbryoMax® Human Tubal Fluid (HTF) (1X), liquid, for Mouse IVF | 50mL | Sigma-Aldrich |
H9268-5G | Hexadimethrine bromide | 5g | Sigma-Aldrich |
E1250-25MG | Elastase from porcine pancreas | 25mg | Sigma-Aldrich |
H4522-20ML | Human Serum | 20mL | Sigma-Aldrich |
T8154-100ml | 台盼蓝溶液 0.4％ | 100ml | Sigma-Aldrich |
C-142-1ML | Cannabigerolic acid solution | 1ml | Sigma-Aldrich |
610014-1EA | 漏斗架 10mm Filter Supports | 100/pk | Sigma-Aldrich |
17000-25G | 溴乙酸 ReagentPlus®, ≥99.0％ | 25G | Sigma-Aldrich |
T2577 | Temozolomide | 25MG | Sigma-Aldrich |
42966-1KG | Kolliphor® HS 15 | 1 KG | Sigma-Aldrich |
D4693 | 蛋白酶II | 1g | Sigma-Aldrich |
P5899-5MG | 聚-L-赖氨酸 氢溴酸盐 | 5MG | Sigma-Aldrich |
363502-10G | Poly[(R)-3-hydroxybutyric acid] | 10g | Sigma-Aldrich |
47036-50G-F | 皂素 | 50g | Sigma-Aldrich |
I9030-100ML | 2-Propanol | 100ml | Sigma-Aldrich |
T9281-25ML | 四甲基乙二胺 | 25ml | Sigma-Aldrich |
A3678-25G | 过硫酸铵 | 25g | Sigma-Aldrich |
C3755-500UN | 肌酸磷酸激酶 来源于兔肌肉 | 500units | Sigma-Aldrich |
G8877-10MG | 鸟苷5′-三磷酸 盐 水合物 | 10mg | Sigma-Aldrich |
77938-100MG | 3-羟基己酸甲酯 | 100mg | Sigma-Aldrich |
PHR1359-500MG | Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material | 500MG | Sigma-Aldrich |
10417-5G-F | 8-苯基-1-萘磺酸 铵盐 | 5G | Sigma-Aldrich |
A9165 | N-Acetylcysteine | 5g | Sigma-Aldrich |
p4543-10g | 丙戊酸 盐 | 10g | Sigma-Aldrich |
SML1195-50MG | Palonosetron 盐酸盐 | 50MG | Sigma-Aldrich |
H7017-20MG | 血蓝蛋白 来源于大锁孔帽贝 （透孔螺） | 20MG | Sigma-Aldrich |
10103578001 | 胶原酶A | 100MG | Sigma-Aldrich |
H6635-50mg | Hydrocortisone 3-(O-carboxymethyl)oxime | 50mg | Sigma-Aldrich |
N0636 | Nicotinamide | 100g | Sigma-Aldrich |
L1886-25G | 亮绿 SF（淡黄） | 25G | Sigma-Aldrich |
T8787-100ml | Triton™ X-100 | 100ml | Sigma-Aldrich |
383694-100ml | 聚丁二烯 | 100ml | Sigma-Aldrich |
181374-100G | 聚丁二烯，顺式 | 100 G | Sigma-Aldrich |
V900863-100G | 明胶（来源于猪皮肤） | 100g | Sigma-Aldrich |
M1787-10X1ml | 溶液 | 10X1ml | Sigma-Aldrich |
HT110116-500ML | Eosin Y 醇溶液 | 500ML | Sigma-Aldrich |
05-844 | Anti-PLK1 Antibody, clone 35-206 | ea | Sigma-Aldrich |
SRP3201-20UG | GM-CSF 来源于小鼠 | 20ug | Sigma-Aldrich |
A9771-50mg | Albumin–fluorescein isothiocyanate conjugate | 50mg | Sigma-Aldrich |
A5006-100G | L-精氨 | 100g | Sigma-Aldrich |
F9252-500ML | Folin & Ciocalteu’s phenol reagen | 500ML | Sigma-Aldrich |
461091-250G | 4-硝基苯甲酸 | 250G | Sigma-Aldrich |
S1888-1kg | 蔗糖 | 1kg | Sigma-Aldrich |
Z742914-1.8kg | 去污剂 ALCONOX(R) DETERGENT | 1.8kg | Sigma-Aldrich |
U5507-1MG | U5507-1MG | 1 MG | Sigma-Aldrich |
T-037-1ML | Testosterone, 1.0 mg/mL | 1ml | Sigma-Aldrich |
172502-100G | 硫代乙酰胺 | 100 G | Sigma-Aldrich |
274135-100ML | N,N-二甲基丙烯酰胺 | 100ml | Sigma-Aldrich |
A8887-1KG | 丙烯酰胺 | 1kg | Sigma-Aldrich |
252859-100G | Tris Base | 100g | Sigma-Aldrich |
A6283-100ML | 乙酸 | 100ml | Sigma-Aldrich |
P4170 | 碘化丙啶 | 1g | Sigma-Aldrich |
SML1596-5MG | PPZ2，≥98% (HPLC) | 5mg | Sigma-Aldrich |
RU5500 | Rabies Detection Reagent - Direct Fluorescence Assay | 5 mL | Sigma-Aldrich |
G3272-1kG | 盐酸胍 盐酸盐 | 1kG | Sigma-Aldrich |
C1988 | Cycloheximide | 1g | Sigma-Aldrich |
A1009-1G | Albumin methylated from bovine serum | 1g | Sigma-Aldrich |
N2752-1G | 4-硝基苯棕榈酸酯 | 1g | Sigma-Aldrich |
S5921-.1MG | Staurosporine from Streptomyces sp | 0.1 mg | Sigma-Aldrich |
F1804-50UG | 单克隆抗-FLAG® M2 小鼠抗 | 50ug | Sigma-Aldrich |
G6642-.2ML | 抗 谷氨 兔抗 | 0.2 mL | Sigma-Aldrich |
T2376 | L-甲状腺素 | 100mg | Sigma-Aldrich |
C8052-0.5mg | 实验试剂 | 0.5mg | Sigma-Aldrich |
G1393 | Gelatin solution | 100mL | Sigma-Aldrich |
A4262-2mg | Actinomycin D | 2mg | Sigma-Aldrich |
MAK008-1KT | Hydroxyproline Assay Kit | 1 kit | Sigma-Aldrich |
I9278-5ML | Insulin solution human | 5ML | Sigma-Aldrich |
P5147-100MG | 蛋白酶 来源于灰色链霉菌 | 100mg | Sigma-Aldrich |
661740-1G | 聚(乙烯基膦酸) | 1G | Sigma-Aldrich |
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