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蛋白酶k现货供应

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蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。
  蛋白酶k现货供应的详细资料:

 

蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。据资料显示:该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以,蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合ca2+。

 

  蛋白酶K,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。

 

  推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。

 

  蛋白酶K配制标准:20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K):将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

 

蛋白酶k的作用

  值得注意的是,蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果.

 

蛋白酶k的保存

  保存:保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证12月。

 

  孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。

 

编辑本段广泛应用

  蛋白酶K已广泛应用在皮革毛皮丝绸医药食品酿造等方面。皮革工业的脱毛软化已大量利用蛋白酶,既节省时间,又改善劳动卫生条件。蛋白酶还可用于蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清。临床上可作药用,如用胃蛋白酶治疗消化不良,用酸性蛋白酶治疗支气管炎,用弹性蛋白酶治疗脉管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对外科化脓性创口的净化及胸腔间浆膜粘连的治疗。加酶洗衣粉是洗涤剂中的新产品,含碱性蛋白酶,能去除衣物上的血渍和蛋白污物,但使用时注意不要接触皮肤,以免损伤皮肤表面的蛋白质,引起皮疹、湿疹等过敏现象。

产品简介:
货号: GPE-2009001
批号: 201003008
规格: 每个独立包装中含有100毫克的蛋白酶K冻干粉
比活性值: 40 U/mg蛋白,17.5 U/mg干粉
来源种属: 林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber)
相对分子质量:29,730
贮存条件:
干粉状态可在2~4ºC条件下低温保藏。使用时,建议将每个独立包装的干粉全部溶解,分装为适当体积后,-20ºC贮存。
正确的贮存条件下,干粉状态的有效期可达一年。液体状态的有效期为半年。打开包装使用后,如果在2~8ºC环境下放置超过一周时间,建议过滤除菌后再用于实验。
贮存缓冲液:20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1 mM氯化钙,50%甘油(稀释用缓冲液不含甘油)。
质量控制:
活性单位定义
37ºC、pH 7.5条件下,每分钟可水解底物酪蛋白生成1 μmol酪氨酸的蛋白酶K 的量,定义为一个单位(U)。
脱氧核糖核酸酶残留
以λ DNA为底物,37ºC消化6小时以上,未检测到脱氧核糖核酸酶活性。
核糖核酸酶残留
25ºC消化16小时以上,未检测到核糖核酸酶活性。
产品用途:
蛋白酶K是一种用途广泛的非特异性的丝氨酸蛋白酶。在pH 4到pH 12的条件下均有活性,在SDS、尿素或EDTA存在时亦很稳定。常用于提取mRNA、基因组DNA,或用于从各种细胞中提纯DNA和RNA时消化杂蛋白。还可用于糖蛋白的修饰,以及蛋白质结构研究等方面。

 

 

订货信息:

货号 产品名称 规格 纯度 活性单位 单价(元/100mg) 品牌
3508838103 蛋白酶K 100mg ≧95% ≧35U/mg RMB:300 ROCHE
1.24568.0100  蛋白酶K 100mg ≧95% ≧35U/mg RMB:300 MERCK

 

产品相关关键字: 蛋白酶K Proteinase K  Proteinase K MERCK
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