现货sanquin M1551说明书

Sanquin以非营利为基础在荷兰提供血液服务。Sanquin是血液领域的知识研究所，在输血医学和免疫学领域开展科学研究，将这些知识应用于一系列制药和诊断服务的开发和生产。

sanquin M1551说明书

Peliclass ELISA combikit IgG1 + 2 + 3 + 4

产品规格

文章编号

M1551

产品组

IgG亚类，Elisa

尺寸

4 x 48孔

技术

ELISA

血清中人IgG亚类的ELISA检测试剂盒（EN）

ELISA kit for quantitative determination of human IgG subclasses in serum (en) 

一、导言
人胰岛素样生长因子包括四个亚类：胰岛素样生长因子1、胰岛素样生长因子2、胰岛素样生长因子3和胰岛素样生长因子4。Igg亚类的生物化学特性
Described Extensively（1-5）.在几种生物重要功能中，如
抗原识别、补体活化和结合到细胞表面受体很多研究都揭示了血清中的异常
IGG亚类水平可能与各种疾病状态有关。特别是选择性IGG2亚类缺陷的组合
随着病毒或细菌感染的易受感染性的增加，已大量记录在案（4、5）。人胰岛素样生长因子2或胰岛素样生长因子3的低血清水平
报告的患者中有复发性上皮和低呼吸道感染。其他人建立了一个非常低的协会
血清浓度与中肺再生感染（6）子群血清中的异常也有
在自身免疫疾病、神经疾病和艾滋病毒感染中观察到（4）。
二技术原则
试剂盒英文名称含有高涂层微粒条纹的试剂盒
禽单克隆抗体，每种抗体的一个亚类人的特异性。测试样品，校准和控制将被孵化
在各自的井里。被确定的Igg亚类将被固相结合，而非边界Igg被清洗。Next，
过氧化物酶共轭抗人免疫血清添加到每个井中，洗涤后清除了非边界共轭物。之后
用碱性溶液（ABTS）和H2O2进行孵化，用酸性缓冲阻止反应。绿色反应产品是
在测试样品中通过吸收和亚类Igg浓度的测定，与参考曲线的价值相对应。
测定了IGG亚类控制血清的校准曲线的有效性和IGG亚类的精度。
决定
根据WHO 67/97参考材料制备的校准器确定了校准器中的IGG亚类水平。茶
Recommended target values of 5.0 g/l for IGG1，2.6 g/l for IGG2，0.4 g/l for IGG3 and 0.5 g/l for IGG4 were used（7）.
三、储存和稳定性
人骨髓细胞亚纲应在2-8°C保持新版本，并可在标签上使用，直至期满之日为止。
开放后所有部件的稳定度为1周，在2-8°C时保存。
运输条件可能不同于储存条件。
IV.Contents of the KIT
See the table at the beginning of this package insert.
人亚组蛋白含有足够的反应物，用于每个亚组的48个测试，包括校准器、控制器和布兰克。
用柱色谱法纯化组织培养基中的单克隆抗体（离子交换与亲和性）
色谱法校准与控制是液体的人。
五.安全
本发明涉及一种含有危险货物的骨细胞抑制剂（HOLDS）酶联免疫（ELISA）试剂盒（酶联免疫吸附试验法）。

危险象形图：GHS07
信号词：警告
危险说明：
H319引起严重的眼睛刺激
预防说明：
P280佩戴护目/面部防护
P264处理后*洗手
P305+P351+P338如果进入眼睛：用水小心冲洗几分钟。取下隐形眼镜（如果有且容易取下）
做。继续冲洗
p337+p313如果眼睛刺激持续：请就医
六、所需附加材料
稀释洗涤-稀释-和基质缓冲液的蒸馏水。
-准确输送体积的移液装置。
-培养箱（37±2°C）。
-一个标准的酶联免疫吸附洗涤器或一个500毫升的塑料喷水瓶，用于自动或手动清洗条带。
-用于测量414 nm或405 nm吸光度的标准酶联免疫吸附测定仪。
日志线性纸。
七。试样处理
只有血清样本应该被测试。样品应尽可能新鲜或冷冻保存。
使用前应手动稀释样品（见VLL分析方案）。
八。分析协议
-将所有试剂置于室温（18-25°C）并充分混合。避免气泡或泡沫。
建议对所有样品、对照品和校准品稀释液进行一式两份的测试。
1。微量滴定板
Peliclass人IgG亚类酶联免疫吸附测定试剂盒提供了在不同场合使用部分平板的灵活性。
打开塑料袋之前，确定测试所需样品数量所需的条带数量加上所需的14口井。
用于运行校准器、控件和空白两份。从板架上拆下不使用的板条，然后重新包装
含有干燥剂的塑料袋，存放温度为2-8°C。

2。缓冲液配制
洗涤缓冲液：在950ml蒸馏水中加入洗涤缓冲液浓缩液瓶的总含量，制备洗涤缓冲液。
稀释的洗涤缓冲液必须在2-8°C下储存，并保持稳定1周。
注：浓缩缓冲液可能含有盐晶体。在制备工作强度缓冲液之前，将浓缩缓冲液加热
短暂至37°C以溶解晶体。
稀释缓冲液：计算所需稀释缓冲液的数量（每个微孔条约2毫升未稀释缓冲液），并制备
工作强度溶液，将缓冲液在蒸馏水中稀释10倍。
三。校准品和对照血清的制备
浓度见所附信息传单的表2和表3。
校准器：（见随附信息传单的表1）用“1:500”标记一根10毫升试管，用“1:8”标记八根3毫升试管。
分别。
将4.99毫升稀释缓冲液移到10毫升的试管中，加入10μl的校准血清（初始稀释液1:500）。移液管1.9毫升
将标有“cal1”和1.0 ml的试管中的稀释缓冲液倒入标有“cal2-cal8”的试管中。
将100μl 1:500稀释校准器移液管1，从该管中加入1.0 ml
上一次稀释到下一个“校准”管。为每个igg子类选择校准器稀释系列：igg1 1:80000-1:1280000
igg2、igg3和igg4 1:10000-1:160000。
对照组：在一根试管上贴上“1:500”标签，两根3毫升试管上贴上“1:30000”（用于IGG2、3、4）和“1:240000”（用于IGG1）标签。
管内移液管用1:500毫升稀释缓冲液和10升对照血清标记。
移液管内贴有1:30000 885μl稀释缓冲液和15μl 1:500稀释液的标签。
试管中的移液管标记有1:240000 875μl稀释缓冲液和125μl 1:30000稀释液。
准备一管3毫升的稀释缓冲液作为空白。
4。样品的制备
稀释液与对照血清相同的稀释液稀释试验样品。对于超出给定范围的结果
范围（见随附信息传单的表1），应使用不同的样品稀释液重复试验。
5。次洗涤步骤
用洗涤缓冲液洗涤板架上所需的微孔四次。手动清洗时，*注入井内（>300
使用洗涤缓冲液并丢弃，重复此步骤三次。后，井应该是*空的。随后的
应立即加入试剂，不要让井长时间干燥。
6。步孵化
将100微升稀释的校准器、对照品、样品和空白物添加到适当的孔中。
用粘合密封件盖住板，轻敲微量滴定板边缘几秒钟，轻轻搅拌，以混合每口井的内容物。
在37°C下培养1小时。
清洗前，按照第8点所述准备下一种培养试剂。

7。第二步，洗
吸入supernatant from the the井洗板5在AS点描述的程序办理。
8。incubation共轭抗体与人IgG HRP—to
dilute by the共轭1∶500µL移液30毫升稀释14.97 of the共轭到缓冲区。dilute共轭：继续to the
1：3000×1.2毫升移液稀释1：of the 500毫升稀释到缓冲区6。
1：2000×2.0毫升移液稀释1：of the 500毫升稀释到缓冲区6。
1：1000×3.5毫升移液稀释至1∶500 of the 3.5毫升稀释缓冲。
of the 100µL：add to the 1:500稀释抗IgG1的微孔条；
100µL of the 1:3000稀释to the反IgG2的微孔条；
100µL of the 1:2000稀释to the IgG3抗微孔条；
100µL of the 1:1000稀释抗人IgG4 to the微孔条。
覆盖板与粘接密封茶叶，攻丝模式边缘轻轻（for a几秒到the contents of each混合好。
在37°C孵育1小时）。
只是之前洗下incubation试剂准备在10点和描述的程序办理。
9。三步洗
吸入supernatant from the the井洗板5在AS点描述的程序办理。
10。incubation与ABTS底物
底物溶液（calculate the amount of相角近似为0.9毫升的微孔条will be needed）。
equivalents add the solution of 200µL氢过氧化物的股票和股票400µL溶液20 mL of  ABTS的工作强度
底物缓冲液（18底物溶液2毫升+股票distilled毫升水）。
add to 100µL的底物溶液的井。
攻丝模式的边缘轻轻地大一些microtitreplate for the seconds to the contents of each混合好。
在室温孵育30分钟换（18 - 25°C）。
11。停止酶反应
50µL add to solution of停在井。
12。板读取超时
在1小时内（阅读414 preferably）或安在405 nm）的阅读器。
结果和解释（九日。
absorbance at the -记录（414 preferably for each 405 nm）或平均值和复制的好茶。
- duplicates should not for each样品有什么区别，超过平均值15% from the。如果卵巢duplicates黑莓，should be the法
重复灌水。
图- absorbances校准器（the average of the Y轴）与茶相关的subclass毫微克/毫升的浓度（X轴）的在线日志线性
适合的拟合曲线和纸画。
- the levels of the调控血清IgG subclass should FIPS在范围（S）表3 of the given在封闭的信息传单。
the average value for - each absorbances插值曲线上的参考样品。
测试显示均值- samples which the range of the“absorbance dilutions参考曲线，appropriately should be稀疏。
- subclass for an评价IgG浓度在测试样品中出现found the levels，with the values for  normal IgG
subclasses（EEA X参考靶道）。

X.测定范围
关于试剂盒特定的分析范围，请参阅随附信息传单的表1。
四
十一。参考范围
健康高加索个体血清样品中IgG亚类的参考范围（G/L）（8）。其他人群分开
应获得参考范围。

注：
试验的具体性能特性所引用的值代表典型结果，不应视为规范。
这个工具包。
十三。限制
1。用户应接受培训，熟悉酶联免疫吸附试验和检测程序。
2。不应使用大量溶血或含脂样品。对于含有
类风湿因子，高胆红素水平，或其他循环免疫复合物。这些样品应采用其他方法进行分析。
三。超出范围的样品，如副蛋白，应使用不同的稀释液重复。
4。发现其中一个IgG亚类的水平降低永远不能提供明确的诊断，但应该考虑。
作为免疫系统紊乱的迹象，需要进一步的诊断调查。
5。控制血清应始终用于检查校准曲线的有效性。当控件超出范围时，
试验样品不可靠。应重复试验。
6。不同批次的试剂不能互换。
7。剩余的试剂（如静容量）不应与新开小瓶的内容物混合。
8。瓶盖和小瓶不能互换。应更换相应小瓶上的瓶盖。
9。尽管人类校准品和对照血清已经被检测出特定疾病传播因子的标记物。
根据欧盟现行的药品生产质量管理规范指南，所有来源于人类的成分应被视为
可能具有传染性。
10。防腐剂：硫柳汞®0001%。
11。在酶联免疫吸附试验的每个培养/固定步骤中使用新的平板封条，以避免交叉污染。不要使用铝
箔。
12。每次转移时使用一次性移液管头，以避免交叉污染。
13。每次使用该试剂盒时，应进行校准器、共轭物和缓冲器的新稀释。
14。不要使用与试剂盒一起提供的试剂和微量滴定条。
15。叠氮化纳灭活HRP，不使用含叠氮化纳的溶液，也不向提供的缓冲液中添加叠氮化纳。
16。应根据实验室规定进行废物处理。

XIV. 参考

1. Shakib, F. (Editor), Monograph in Allergy, Karger A.G., 19 (1986). 2. Shakib, F. (Editor), The human IgG subclass, Pergamon Press (1990). 3. Vlug, A. et al., Eur. Clin. lab., 8:26 (1989). 4. Jefferis, R. et al Clin.Exp.Immunol. 81:357 (1990). 5. Hamilton, R.C., Clin. Chem., 33:1707 (1987). 6. Beck, C.S. and Heiner, D.C., Am. Rev. Respir. Dis., 124:94 (1981). 7. Klein, F et al., Clin. Chem. Acta., 150 119 (1985) 8. Vlug, A. et al., Ann. Biol. Clin. 52:561-67 (1994). 

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