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 技术文章
genetargetsolutions电动大肠杆菌
点击次数:99 发布时间:2019-12-27

genetargetsolutions电动大肠杆菌

TransforMax™EPI300™电动大肠杆菌

应用领域

  • 使用CopyControl™克隆系统生成可诱导的拷贝数克隆。
TransforMax™EPI300™  大肠杆菌  细胞缺少  tonA  基因,经过改造可与Epicentre的CopyControl™cDNA,基因和PCR克隆试剂盒以及其他不需要噬菌体T1抗性细胞的CopyControl克隆系统一起使用。细胞包含可诱导的突变体  trfA  基因,其基因产物是从ori V 复制起点开始复制所必需的  ,例如在CopyControl pCC1™载体中。在LB氯霉素平板上或在补充氯霉素的LB或SOC培养基中,在TransforMax EPI300 大肠杆菌中生长的CopyControl克隆   从F因子复制子以单拷贝数复制,因为trfA的表达  基因被抑制。加入CopyControl诱导溶液可诱导细胞表达  trfA  基因产物,并诱导其从ori V 以高拷贝数复制  (图1)。从ori V 复制可  产生更高的产量和更高的克隆DNA纯度。好处

 

  • 克隆的拷贝数受到与trfA  基因连接的诱导型启动子的严格控制  。
  • 具有各种大小的克隆的高转化效率。
  • lacZΔM15  用于重组体的蓝/白筛选。
  • 限制-负[ mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]表型能够有效克隆甲基化DNA。
  • 核酸内切酶负号(endA1),以确保高产量的DNA。
  • 重组减号(recA1),用于较大插入片段克隆的更高稳定性。
 
 

基因型

F- mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)Φ80dlacZΔM15ΔlacX74recA1 endA1 araD139Δ(ara,leu)7697 galU galKλ-rpsL(StrR)nupG trfA dhfr

TransforMax EPI300电  感受态大肠杆菌

  • pUC19的转化效率> 1 x 1010 cfu / µg。

TransforMax EPI300具有化学活性的  大肠杆菌

  • pUC19的转化效率> 5 x 108 cfu / µg。

 

图1.在TransforMax™EPI300™ 大肠杆菌中, 可以将CopyControl™BAC克隆的拷贝数诱导10到20倍  加入CopyControl诱导溶液后,来自CopyControl BAC克隆的110-145 kb BAC DNA的产量增加了14倍以上。U =未诱导的细胞;I =诱导的细胞。

定购

货号 浓度 尺寸

TransforMax™EPI300™电动大肠杆菌

  
EC30011010 X 100微升
EC30015050 X 100微升

包括CopyControl™诱导溶液和pUC19对照DNA。

TransforMax™EPI300™具有化学活性的大肠杆菌

C300C10510 X 50微升

包括CopyControl™诱导溶液和pUC19对照DNA。

CopyControl™感应解决方案

CCIS12525毫升

1,000X浓缩溶液。过滤器已消毒。

 

 

 

 

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