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biozyme-inc PEPDAB010说明书
点击次数:73 发布时间:2020-12-09

biozyme-inc PEPDAB010说明书

ADAM Substrate II (Fluorogenic) – PEPDAB010

ADAM底物II(荧光)– PEPDAB010

规格及用途

荧光底物:Dabcyl-SPLAQAVRSSK(5FAM)-NH 2

货号:          PEPDAB010m001,1mg,125美元

货号:          PEPDAB010m005,5mg,500美元

 

 

使用:

该荧光ADAM底物最初由我们在出版物“用作ADAM9的高通量筛选工具的荧光底物”中进行了描述。该ADAM底物基于前体TNF-α的切割序列,并已用于评估ADAM17在单细胞测定以及标准体外酶促和基于细胞的测定中的活性(请参见以下出版物)。有关该底物的底物特异性概况,请参见我们的产品表。该ADAM底材还是ADAM9和ADAM10的出色底材。该底物不是ADAM家族成员特有的,因为它也可以被蛋白酶MMP家族的成员加工。BioZyme Inc确实为ADAM或MMP系列成员出售特定的底材(请参阅我们的产品说明书或目录,用于底物特异性概况)。它显示出对所有这些酶的相当强的活性,特异性常数k cat / K m(M -1 s -1),范围从大约4 x 10 3  到4 x 10 5。通常,将肽溶解在DMSO中制成浓度约为10mM的储备溶液。当用于体外测定时,底物通常以约10uM的浓度使用。切记将最终反应中的DMSO浓度保持在1%或以下,以避免DMSO对反应的影响,并切记在背景孔中有相当百分比的DMSO。为了与ADAM系列成员一起使用,缓冲液应由25mM Tris,pH 8、10mM CaCl 2和6 x 10 -4 Brij洗涤剂组成。为了与蛋白酶的使用,缓冲应含有的50mM Tris,pH 7.5中,150mM NaCl的,2毫米氯化钙2,5μM的ZnSO 4,和0.01%的Brij-35。激发和发射波长分别为485和530 nm。

分子量:

1751.9克/摩尔

纯度:

通过HPLC和质谱评估大于92%。

溶解度:

含10%甲酸的水中1 mg / ml

出现:

红色冻干粉

运输:

肽粉在室温下运输。

存储:

收到后,应将肽储存在-70 oC。避免重复冻融循环。如果溶解在液体(例如DMSO)中,请分装到单独的试管中,以一定程度地减少冻融循环次数。

稳定性:

样品在-70 o C下可稳定长达6个月。

参考文献:

1.荧光底物可用作ADAM9的高通量筛选工具。Marcia L Moss,Fred H Rasmussen,Raphael Nudelman,Peter J Dempsey,Jason Williams 组合化学与高通量筛选12/2009; 13(4):358-65。

2.用于同时测定多种蛋白酶活性的蛋白水解活性矩阵分析(PrAMA)。 Miles A Miller,Layla Barkal,Karen Jeng,Andreas Herrlich,Marcia Moss,Linda G Griffith,Douglas A Lauffenburger综合生物学12/2010; 3(4):422-38。

3.高通量蛋白酶活性细胞计数法显示PMA介导的ADAM17激活具有剂量依赖性异质性。 Wu L等。整合生物学(Camb)。2015年5月; 7(5):513-24。doi:10.1039 / c5ib00019j。

 

 

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