瑞典Mabtech特约代理经销商-上海起发

▎01　公司介绍

瑞典Mabtech从事免疫检测试剂与配套方案开发，产品覆盖ELISpot、FluoroSpot、FociSpot、ELISA以及多因子免疫检测相关试剂。品牌围绕单克隆抗体、预包被板、检测抗体、酶结合物、荧光标记物与实验缓冲体系提供标准化试剂盒，适用于科研人员在细胞免疫、体液免疫、蛋白定量、感染与疫苗研究、肿瘤免疫评价等方向开展定量与半定量实验。

Mabtech产品以夹心法免疫检测为基础，提供BASIC、FLEX、PLUS、PRO等多种组分配置，可根据实验室已有板材、二抗、底物和自动化读取设备选择相应规格。其ELISpot与FluoroSpot试剂可与PVDF膜板、读斑设备配合使用，ELISA试剂可提供预包被条板、标准品、生物素化检测抗体、链霉亲和素酶结合物与TMB底物等完整组分。

作为Mabtech特约代理经销商，上海起发实验试剂有限公司提供产品咨询、货号匹配、规格确认、到货周期沟通与实验选型建议，协助科研人员按检测指标、种属、样本类型和读板设备完成采购。

▎02　核心优势

①　检测体系完整：从捕获抗体、检测抗体、酶或荧光偶联物到标准品、洗液、底物、增强液均有配套，可减少自行配对抗体产生的批间差异。

②　格式可选性强：ELISpot可分为Flex基础试剂、Plus预包被二步法、Pro一步法等；ELISA可提供development kit与ELISA Pro完整 kit；FluoroSpot可提供单因子、双因子及多因子预包被方案。

③　细胞与蛋白兼顾：既能计数分泌细胞因子的T细胞、分泌抗体的B细胞，也能定量血清、血浆、细胞培养上清中的可溶性蛋白，适配免疫学多项常规实验。

④　组分标注明确：产品datasheet通常列明克隆号、抗体浓度、缓冲体系、存储温度、板处理方式和读板参数，便于实验室建立SOP。

⑤　代理服务对接：上海起发实验试剂有限公司可按具体货号核对库存、运输条件、规格包装与售后技术资料，减少采购过程中的信息误差。

▎03　热门产品介绍

◇03.1　货号3850-2A｜ELISpot Flex：Human IgG（ALP）

「品名」ELISpot Flex：Human IgG，碱性磷酸酶显色体系。

「产品特点」

· 用于计数分泌人IgG的B细胞，可检测总IgG分泌细胞，也可通过包被抗原或使用生物素化抗原检测抗原特异性IgG分泌细胞。

· 采用匹配单克隆捕获抗体MT91/145与生物素化检测抗体MT78/145，链霉亲和素-ALP显色，适合PVDF膜ELISpot板。

· 试剂盒含多克隆刺激剂R848与重组人IL-2，可用于记忆B细胞预刺激与活化条件优化。

· 适配人及部分非人灵长类样本，具体交叉反应以datasheet为准。

「存储条件」

· 常温运输；收到后捕获抗体、检测抗体、链霉亲和素-ALP保存于4至8摄氏度。

· R848与重组人IL-2保存于零下20摄氏度或更低温度。

· 未开封产品按瓶身有效期使用，避免反复冻融；抗体含PBS与0.02%叠氮钠，酶结合物按对应缓冲说明保存。

「工作原理」

将PVDF膜ELISpot板用抗人IgG捕获抗体包被并封闭后，加入B细胞或经刺激后的淋巴细胞。分泌到膜表面的IgG被捕获抗体固定，形成局部抗原-抗体结合区域。若检测总IgG，后续用生物素化抗人IgG检测；若检测抗原特异性IgG，可将抗原包被于板面，或用生物素化抗原与捕获IgG结合。再加入链霉亲和素-ALP，最后用BCIP/NBT等ALP底物显色。每个显色斑点对应一个IgG分泌细胞，可通过读斑设备计数。

「使用方法」

①　板处理：选用PVDF膜ELISpot板，按试剂要求用乙醇或无菌PBS进行膜预处理，包被MT91/145捕获抗体，4至8摄氏度或过夜条件依SOP确定，随后用PBS洗涤。

②　封闭：加入含10%胎牛血清的细胞培养介质或试剂指定封闭液，室温平衡，减少非特异性吸附。

③　细胞加样：分离PBMC或脾脏B细胞，若进行抗原特异性检测，可先包被抗原；若进行总IgG检测，直接加入细胞。记忆B细胞方案可先用R848与IL-2预刺激数日，洗去悬浮IgG后再铺板。

④　培养：37摄氏度、5%二氧化碳湿化培养，时间按B细胞亚群与刺激物优化，通常过夜至数日不等。

⑤　检测：弃去细胞，PBS洗涤，加入MT78/145生物素化检测抗体，室温孵育；洗板后加链霉亲和素-ALP；再次洗涤后加ALP底物。

⑥　读板：底物显色稳定后倒扣晾干或用试剂规定方式终止，使用ELISpot读板仪计数斑点。斑点数量按铺入活细胞数折算为每百万细胞分泌IgG细胞数。

◇03.2　货号3710-1HP-2｜ELISA Pro：Human apoA1

「品名」ELISA Pro：Human apolipoprotein A1，人载脂蛋白A1酶联免疫吸附试剂盒。

「产品特点」

· 预包被抗apoA1单克隆抗体HDL110的条板，提供生物素化检测抗体HDL44、链霉亲和素-HRP、人apoA1标准品、TMB底物、终止液及Apo ELISA缓冲液。

· 适用于血清、血浆、细胞培养上清中apoA1定量。

· 配套Apo ELISA缓冲液可用于减少人血清中异嗜性抗体引起的假阳性交联信号。

· 标准曲线范围0.63至40纳克每毫升，按datasheet灵敏度约0.2纳克每毫升，适合脂代谢与心血管相关研究中的蛋白定量。

「存储条件」

· 常温运输；检测抗体、链霉亲和素-HRP、洗液、底物、缓冲液、终止液与预包被板收到后保存于4至8摄氏度。

· 标准品保存于零下20摄氏度或按瓶身说明存放。

· 开封后按单次用量分装管理，避免污染；TMB与终止液按危险化学品种类落实实验室存储要求。

「工作原理」

采用夹心ELISA。预包被HDL110捕获抗体固定在孔面，样本中的apoA1与固相抗体结合；加入生物素化HDL44检测抗体后形成“捕获抗体-抗原-检测抗体"夹心结构。链霉亲和素-HRP与生物素结合，加入TMB底物后发生显色反应，颜色深浅与样本中apoA1浓度正相关。用硫酸类终止液停止反应后，酶标仪读取450纳米附近吸光度，根据标准品拟合曲线计算样本浓度。

「使用方法」

①　准备：将预包被条板、标准品、检测抗体、SA-HRP、洗液与TMB提前恢复至室温，TMB若说明书要求低温使用则按说明执行。

②　稀释：用标准重建液重建apoA1标准品，按倍比稀释建立标准曲线。血清与血浆因apoA1浓度较高，通常需高倍稀释，具体倍数按预实验确定。

③　加样：每孔加入标准品或样本，体积按kit要求控制，通常不超过100微升；设复孔、空白孔与背景孔。

④　一抗反应：加入生物素化HDL44，室温孵育，用洗液洗涤多次，去除未结合物质。

⑤　酶结合：加入按比例稀释的链霉亲和素-HRP，室温孵育后充分洗板。

⑥　显色与读数：加入TMB，避光反应至标准曲线高点在可接受OD范围；加入终止液，酶标仪读取450纳米吸光度。以标准品浓度对数与OD值进行四参数或线性回归，计算样本apoA1含量。

⑦　报告：结合样本稀释倍数换算原始浓度，血清血浆结果以毫克每毫升或克每升记录，培养上清按纳克每毫升记录。

◇03.3　货号FSP-0110-10｜FluoroSpot Plus：Human IFN-γ/Granzyme B

「品名」FluoroSpot Plus：Human IFN-γ/Granzyme B，人干扰素γ与颗粒酶B荧光斑点试剂盒，预包被10板装。

「产品特点」

· 同一孔中可检测分泌IFN-γ与Granzyme B的细胞，并借助读板软件区分单因子分泌细胞与双因子分泌细胞。

· 预包被PVDF板含抗IFN-γ抗体1-D1K、抗Granzyme B抗体GB10，减少自行包被差异。

· 检测端采用7-B6-1-FS-FITC标记IFN-γ抗体、GB11生物素标记Granzyme B抗体，配合anti-FITC-490与SA-550荧光体系。

· 提供CD28共刺激抗体、CD3阳性刺激抗体与FluoroSpot enhancer，适合细胞毒性T细胞、NK样功能及疫苗细胞免疫评价。

「存储条件」

· 常温运输；荧光检测抗体、anti-FITC-490、SA-550、共刺激与阳性刺激抗体、enhance液收到后保存于4至8摄氏度。

· 预包被板可室温保存于原密封包装，避免受潮与强光直射。

· 按datasheet有效期使用，荧光试剂避免反复冻融与长时间暴露于光照环境。

「工作原理」

PVDF孔膜预包被捕获抗体后，加入人PBMC并施加CD3/CD28或多肽、肿瘤细胞系等刺激。分泌到膜局部的IFN-γ被1-D1K捕获，后续用FITC标记7-B6-1检测；Granzyme B被GB10捕获，后续用生物素化GB11检测，再结合SA-550荧光偶联物。加入FluoroSpot enhancer提高荧光斑点稳定度后，使用具备对应激发与发射波长的FluoroSpot读板仪采集图像。软件可分别计数IFN-γ单阳、Granzyme B单阳与双阳细胞，用于评估多功能细胞毒性淋巴细胞频率。

「使用方法」

①　板准备：无菌条件下拆开预包被板，用无菌PBS每孔200微升洗涤3至4次；加入含10%胎牛血清的细胞培养介质，每孔200微升，室温 conditioning 至少30分钟。

②　细胞与刺激：弃去条件液，加入CD28-A共刺激抗体；若做阳性对照，加入CD3-2抗体，常用稀释比例按datasheet确定。加入PBMC或分选T细胞，细胞数按样本类型与预期频率优化。

③　培养：37摄氏度、5%二氧化碳湿化箱培养，IFN-γ/Granzyme B双因子方案可设24至72小时；培养期间避免移动板子，可用铝箔包裹减少蒸发。

④　洗涤：弃去细胞悬液，PBS每孔200微升洗5次，充分去除残留细胞与蛋白。

⑤　检测抗体：将7-B6-1-FS-FITC与GB11-biotin按datasheet稀释于含0.1% BSA的PBS，过滤后每孔加入，室温避光孵育约2小时；洗板后依次加入anti-FITC-490与SA-550混合荧光试剂，避光孵育。

⑥　增强与读板：按流程加入FluoroSpot enhancer，洗板、晾干或用试剂规定方式处理；使用Mabtech IRIS等支持490与550通道的FluoroSpot读板仪采集。软件设定斑点大小、强度与双标叠加参数，输出单因子与双因子细胞数。

▎04　解决实验中哪些问题

①　抗原特异性T细胞频率低：ELISpot与FluoroSpot可在单细胞水平富集分泌信号，较常规ELISA更适合低频抗原反应计数，如疫苗后特异性IFN-γ、IL-2、TNF-α细胞检测。

②　多因子功能评价不足：单色ELISpot一次只能看一种因子，FluoroSpot可同时检测IFN-γ、IL-2、TNF-α、Granzyme B、IL-6等组合，用于判断细胞是否具备多因子分泌能力。

③　B细胞抗体分泌定量困难：Human IgG ELISpot可区分总IgG与抗原特异性IgG分泌细胞；配合R848与IL-2可提高记忆B细胞检出稳定性。

④　血清蛋白定量受异嗜性抗体干扰：apoA1等ELISA Pro提供专用Apo ELISA缓冲液，可降低部分人血清样本因异嗜性抗体产生的异常信号。

⑤　自行配对抗体批间差大：使用同一货号内的捕获、检测、酶或荧光体系，可减少抗体来源、克隆组合与偶联批次不一致带来的结果波动。

⑥　读板标准不统一：Mabtech试剂盒datasheet列明克隆、底物、荧光通道与板处理要求，便于不同实验人员建立统一SOP。

▎05　购买Mabtech产品常见疑问与解答

Q1：如何确认某个指标该买ELISpot、FluoroSpot还是ELISA？

A1：若需计数分泌细胞因子的单个细胞，选ELISpot；若同时看两个及以上因子，选FluoroSpot；若只定量血清、血浆或上清中的可溶性蛋白，选ELISA。上海起发实验试剂有限公司可按指标、种属与样本量推荐货号。

Q2：PLUS、PRO、FLEX、BASIC有什么区别？

A2：FLEX或BASIC偏基础试剂，适合已有板、底物和自建流程的实验室；PLUS通常含预包被板与二步检测试剂；PRO强调一步或简化检测流程。选择时看是否需要预包被、是否要求少步操作、是否已有读板与洗板设备。

Q3：3850-2A能否直接检测抗原特异性IgG？

A3：可以。可采用抗原包被板面后用生物素化抗IgG检测，也可先生物素化抗原、通过捕获IgG后再加生物素化抗原显示特异性。具体抗原浓度、包被条件与对照设置需做预实验。

Q4：3710-1HP-2用于血清样本为何要高倍稀释？

A4：apoA1在血清中浓度较高，若稀释不足会超出标准曲线上限。datasheet给出apoA1标准范围0.63至40纳克每毫升，实际血清可按数千至数十万倍梯度预稀释，再用标准曲线回算。

Q5：FSP-0110-10是否必须与特定读板仪配套？

A5：荧光通道需匹配检测试剂波长。该kit使用FITC通道与SA-550通道，读板仪应支持对应激发和发射配置，并具备斑点图像分析与双标叠加功能。采购前可提供设备型号由上海起发实验试剂有限公司核对兼容性。

Q6：ELISpot板用PVDF还是普通聚苯乙烯？

A6：Mabtech多数ELISpot与FluoroSpot采用PVDF膜板，膜面更利于抗体固定与斑点形成。普通ELISA板不直接替代ELISpot板；若换板型需重新验证捕获抗体包被与背景。

Q7：试剂到货后短期不用如何保存？

A7：抗体、酶结合物、检测试剂按4至8摄氏度保存；标准品、部分细胞因子、刺激剂与重组蛋白按零下20摄氏度保存；预包被板按说明室温或冷藏密封保存。所有试剂避免与不同批号混用。

Q8：能否提供小包装或单板规格？

A8：Mabtech不同货号有2板、4板、6板、10板、20板等规格。若样本量少，可优先选择小规格PRO或PLUS；Flex类可按试剂体积自行分装到自有板，但需自行验证板型与用量。

Q9：国内采购周期怎么确认？

A9：部分常规货号可按代理渠道查询库存；非常规规格、定制缓冲或大宗包装需向品牌确认交期。上海起发实验试剂有限公司在下单前提供货号、规格、运输方式与预计到达时间。

Q10：实验出现高背景怎么办？

A10：先检查包被抗体浓度、封闭液、血清来源、洗板次数与底物时间。ELISpot高背景可优化PVDF乙醇处理、膜湿润度与检测抗体过滤；ELISA高背景可检查异嗜性抗体、样本稀释液与SA-HRP稀释比；FluoroSpot高背景应检查荧光抗体浓度、避光条件与enhance用量。

Q11：人源试剂能否用于小鼠、大鼠或非人灵长类？

A11：部分人源抗体与其他种属存在交叉反应，但并非所有指标通用。小鼠IFN-γ、IL-2等有对应Mouse货号；非人灵长类部分指标可使用人源cross-reactive kit。下单前应提供种属，由代理核对datasheet交叉反应表。

Q12：购买后是否有protocol资料？

A12：每套产品对应datasheet与protocol。上海起发实验试剂有限公司可随订单提供电子说明书要点、货号组分清单与洗板、读板参数建议。

▎06　代理采购与产品咨询

上海起发实验试剂有限公司作为Mabtech特约代理经销商，可提供以下支持：

①　按检测指标整理ELISpot、FluoroSpot、ELISA货号对照，包括人、小鼠、大鼠、猪、猴等常用种属。

②　按实验规模推荐4板、10板、2板、20板等规格，避免闲置与重复采购。

③　核对ALP、HRP、荧光、生物素等不同显色体系的设备兼容性。

④　跟进运输温度、到货验收、存储条件与售后技术资料。

⑤　对apoA1、apoB、apoM等脂代谢ELISA，IgG、IgA、IgM等B细胞ELISpot，IFN-γ、IL-2、TNF-α、Granzyme B、IL-6等免疫因子FluoroSpot提供选型建议。

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更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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