▍前言
上海起发实验试剂有限公司作为美国Innovative Cell Technologies(商标LOGO名:ICT)特约代理经销商,面向科研与细胞培养用户提供Accutase、Accumax、AccutaseLZ等细胞解离产品咨询与供货服务,协助实验室建立稳定传代与单细胞制备流程。
▍01 公司介绍
Innovative Cell Technologies(简称ICT)专注于细胞培养与生命科学试剂开发,核心方向为无胰蛋白酶类细胞解离方案。品牌围绕Accutase、Accumax、AccutaseLZ、AccutaseGMP等产品形成完整体系,覆盖贴壁细胞传代、细胞团解聚、原代组织分散、流式前处理、病毒转染前单细胞制备等场景。
ICT产品以酶学组合和即用型液体为主要技术路线,强调对细胞膜蛋白、表面抗原表位以及细胞活性的保留。Accutase系列用于贴壁细胞温和解离,Accumax系列用于细胞团、组织块及高聚集样本解聚,AccutaseLZ以冻干粉形式降低长途运输与低温配送限制,AccutaseGMP则面向有质量管理文件要求的培养与解离环节。
在科研用户实际使用中,ICT试剂常被用于替代传统胰蛋白酶/EDTA方案,减少血清中和、反复清洗以及因过度消化造成的细胞状态波动。其产品说明与多篇独立技术资料均将其定位为胰蛋白酶替代型细胞解离试剂。
▍02 热门产品介绍
① AT-104|Accutase细胞解离液
◇ 基本货号与品名
货号:AT-104,常见规格AT-104 100 mL、AT104-100ml、ICTAT104-100ml、ICTAT104-500ml等渠道目录写法;品名:Accutase Cell Detachment Solution,中文常称Accutase细胞解离液/细胞脱离液。
◇ 产品特点
Accutase为即用型液体,含蛋白水解酶与胶原酶活性,不属于哺乳动物来源、不属于细菌来源,不含胰蛋白酶。其对多数贴壁细胞可产生解离作用,对胚胎干细胞、神经干细胞等较为敏感的细胞类型具有相对温和的脱离效果。产品无需血清中和,可直接用于后续离心、重悬与培养;对部分表面抗原表位保留较好,适合流式细胞分析前处理。
◇ 存储条件
未开封液体按产品标签要求低温保存;到货后避免反复冻融与长期室温放置。具体温度区间以瓶身COA、批次标签及供应商发货说明为准。日常实验取用后应及时归位,避免污染。
◇ 工作原理
Accutase通过蛋白水解酶与胶原酶协同作用,削弱细胞间连接蛋白及细胞与培养表面附着相关蛋白。其酶活组合可同时处理部分细胞外基质成分,因此相较单一胰蛋白酶,对某些依赖钙黏蛋白、胶原接触的细胞具有更均衡的解离表现。由于配方不含胰蛋白酶且通常无需EDTA中和,解离后细胞所受酶暴露与离子环境扰动相对较低。
◇ 使用方法
1)从冷藏条件取出Accutase,按标签要求平衡至适宜温度。
2)吸除培养瓶/板中旧培养基,用DPBS或无酶缓冲液轻洗贴壁层,去除血清残留。
3)按培养面积加入适量Accutase,覆盖贴壁面;置于37℃、5%CO2培养条件观察。
4)多数贴壁细胞可于数分钟内开始脱壁,具体时间依细胞系、融合度、基质包被情况调整;可在显微镜下判断单个细胞比例。
5)加入含血清培养基或适宜终止液停止酶作用;若下游允许,也可直接离心换液。
6)200—300×g离心5分钟收集细胞,重悬后计数、传代或进入流式、转染、冻存等实验。
② AM-105|Accumax细胞解离液
◇ 基本货号与品名
货号:AM-105,常见规格AM-105 100 mL、AM105-100ml、AM105-500ml;品名:Accumax Cell Dissociation Solution,中文常称Accumax细胞解离液/细胞团解聚液。
◇ 产品特点
Accumax含蛋白水解酶、胶原水解酶及DNase活性,配制于Dulbecco PBS体系,部分商品版含0.5 mM EDTA-4Na。其酶浓度高于常规Accutase,适合处理杂交瘤、CHO、BHK、293、COS、Sf9等易结团细胞,也用于神经球、组织块及原代组织获得单细胞悬液。产品为无菌过滤液体,用于细胞计数前解聚、流式分选前制样、病毒转染前单细胞化及生物反应器放大前处理。
◇ 存储条件
商品资料规定-20℃保存可保持稳定;解冻后4℃可保存最多2个月,避免室温长期存放。冷冻液体运输到货后按标签及时入-20℃;分装使用可减少反复冻融。不同供应商SKU可能标注干冰发运、冷冻液体、无菌过滤等状态,以实物标签为准。
◇ 工作原理
Accumax通过蛋白水解酶切断细胞间黏附相关蛋白,胶原水解酶处理胶原类基质,DNase降低解离过程中因细胞破裂释放DNA所形成的絮状聚集。对于悬浮培养中的细胞团,等量加入后可在37℃短时间内将聚集体打散为单个细胞;对于原代组织,可配合机械吹打获得均一悬液。其目标是在不依赖高浓度胰蛋白酶的前提下,提高单细胞得率与计数准确性。
◇ 使用方法
1)-20℃取出的Accumax可在4℃过夜或室温解冻,避免高温水浴造成酶活损失;具体解冻方式以产品数据表为准。
2)取代表性结团细胞样本0.5—1.0 mL,加入等体积Accumax。
3)37℃孵育5—10分钟,期间轻弹或低速吹打帮助分散;难解聚样本可延长观察,但不盲目增加时间。
4)镜检单细胞比例,若达到实验要求,按常规计数。因加入了等体积解离液,计数结果应折算稀释倍数。
5)后续流式、转染或培养可按常规离心换液;如对抗原表位完整性要求高,建议预实验验证抗体染色信号。
6)剩余试剂及时4℃短期保存或按标签回冻,记录批号与开瓶日期。
③ AT106系列|AccutaseLZ冻干Accutase
◇ 基本货号与品名
货号:AT106/AT106-500等渠道目录写法;品名:AccutaseLZ Lyophilized Accutase,中文常称冻干Accutase、冻干粉型Accutase。
◇ 产品特点
AccutaseLZ以冻干粉形式提供,1支可按标签复溶为一定体积Accutase工作液,渠道资料常见“1小瓶复溶500 mL"的描述。其优势在于运输过程不强制低温冷链,适合国际发货、偏远地区补给及批量备货。复溶后可作为无胰蛋白酶来源细胞解离液使用,属性与液体Accutase一致,适用于对运输成本和库存周期较敏感的实验室。
◇ 存储条件
冻干粉按标签要求常温或受控温度保存,避免受潮、高温与阳光直射;复溶后液体按对应Accutase液体标准低温保存,并尽快按无菌要求分装使用。具体复溶体积、保存温度与有效期以当批COA和瓶身说明为准。
◇ 工作原理
AccutaseLZ保留Accutase的蛋白水解与胶原酶协同机制,冻干工艺仅改变物理形态。复溶后酶分子恢复溶液状态,可降解细胞间及细胞—基质间黏附蛋白,使贴壁细胞脱落。因去除了液态运输对冷冻链的依赖,其在保证酶活稳定性的同时降低物流限制。
◇ 使用方法
1)阅读瓶身标签,确认复溶总体积与无菌操作要求。
2)使用无菌水、无菌DPBS或标签指定复溶液加入冻干粉瓶,轻柔旋摇至全溶解,避免长时间剧烈涡旋。
3)若为大体积复溶,可进行无菌过滤并分装;记录批号、复溶日期、分装体积。
4)按AT-104 Accutase流程用于贴壁细胞:洗去血清、加液覆盖、37℃观察脱壁、离心收集。
5)更换为AccutaseLZ的实验室,建议用常用细胞系做传代存活率、消化时间与下游表型对照,再固定常规用量。
▍03 可解决的实验问题
01)胰蛋白酶消化后细胞成团、死细胞增多:Accutase以非胰酶酶组替代,降低过度蛋白水解风险,改善单细胞得率。
02)干细胞、神经元细胞传代后贴壁慢、分化状态波动:Accutase对胚胎及神经干细胞解离较温和,可减少表面蛋白损伤。
03)杂交瘤、CHO、293等悬浮结团影响计数:Accumax通过蛋白水解酶+胶原酶+DNase处理聚集体,提高计数与分选一致性。
04)神经球、组织块难获单细胞:Accumax可用于脑组织和部分原代组织解聚,配合机械吹打获得悬液。
05)流式表面标志物信号减弱:Accutase无需胰酶长时间处理,对多种表位保留更好,但不同抗体仍需预实验。
06)偏远地区低温到货不稳定:AccutaseLZ冻干形态降低冷链依赖,便于长期备货与跨国补货。
07)病毒转染前细胞状态不均:Accumax解聚后获得较均一单细胞,有利于MOI计算与转染重复。
08)原代胰岛、视网膜等敏感组织解离收率低:Accumax资料收录了胰岛、视网膜色素上皮等解离应用,可按要求优化时间。
09)传统消化需血清中和、步骤繁琐:Accutase、Accumax在多数流程中无需额外中和,简化换液与离心。
10)GMP文件审计要求严格:AccutaseGMP提供高度表征、低污染风险与质量管理文件支持,适合合规培养环节。
▍04 购买与使用时常见疑问解答
问:Accutase和Accumax怎么选?
答:常规贴壁细胞传代、干细胞、流式前处理可选Accutase AT-104;细胞团、神经球、原代组织、高聚集样本可选Accumax AM-105。若仅偶发结团,先小样测试Accutase,再决定是否切换Accumax。
问:Accutase需要加EDTA吗?
答:AT-104常规配方以产品标签为准,多数流程不另加EDTA;若使用Accumax,其部分商品版含EDTA,下游螯合敏感实验应提前确认成分表。
问:消化时间一般多久?
答:Accutase贴壁细胞常按分钟级观察,具体随细胞系、融合度、包被基质变化;Accumax结团样本37℃5—10分钟起步。所有产品均以镜检单细胞比例为准,不固定统一时长。
问:解离后必须离心洗酶吗?
答:Accutase多数场景可直接加培养基收集并离心;Accumax解聚后建议按下游要求换液离心。流式、转染、冻存等敏感实验以清洗后使用更稳妥。
问:能代替所有胰蛋白酶实验吗?
答:多数贴壁传代可替代,但某些强附着、厚基质或特殊包被表面可能仍需优化酶浓度、温度、机械吹打。新细胞系应先做小体系对照。
问:Accumax会影响流式抗体染色吗?
答:其具有蛋白水解活性,可能改变部分抗原表位。资料提示某些抗体染色会受影响,正式实验应以目标抗体克隆做平行验证。
问:AccutaseLZ复溶后和液体Accutase一样吗?
答:作用机制一致,但复溶水质、过滤方式、保存温度会影响稳定性。按AT106标签复溶,并做细胞活性与消化效率验证。
问:产品到货冻结或温度偏高还能用吗?
答:Accumax冻结运输融化通常不影响性能,但到货后应入-20℃;若标签要求冷冻而长期室温暴露,应联系上海起发实验试剂有限公司核对批号与COA后再用。
问:原代组织解离怎样提高得率?
答:Accumax先37℃短孵,配合精细剪切、低速吹打;坚硬组织可分段延长并镜检。避免一次性长时间高温消化,以减少死细胞。
问:上海起发实验试剂有限公司作为特约代理经销商能提供什么?
答:可提供ICT产品货号核对、规格选择、COA与说明书资料对接、到货存储建议及实验选型咨询。
▍05 品牌服务与选型建议
科研实验室常规传代:优先AT-104 Accutase 100 mL或500 mL,建立固定消化时间与离心参数。
药筛与蛋白细胞系:AM-105 Accumax处理结团,配合自动计数建立标准解聚曲线。
原代组织与类器官单细包化:Accumax做主解离,Accutase做后续贴壁亚培养。
海外分支机构与冷链受限地区:AccutaseLZ冻干型降低运输不确定性。
临床前与合规培养:AccutaseGMP提供文件化质量支持,具体等级以项目要求选型。
关键词:Innovative Cell Technologies、ICT Accutase、AT-104细胞解离液、Accumax AM-105、AccutaseLZ AT106、无胰蛋白酶细胞消化、贴壁细胞传代试剂、干细胞温和解离、神经干细胞消化液、流式前细胞解离、细胞团解聚试剂、杂交瘤单细胞制备、CHO细胞解离液、原代组织解离液、神经球解聚试剂、冻干Accutase复溶、上海起发ICT代理、Accumax存储条件、Accutase使用方法、AccutaseGMP细胞解离
更多产品信息,请联系中国区域代理商:上海起发实验试剂有限公司
(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
🔖Innovative Cell Technologies热卖产品
货号 | 品名 | 规格 |
AT-107 | AccutaseGMP | 100ml |
AT-104-500ml | Accutase | 500ml |
AM-105-500ML | Technologies ACCUMAX 500ML BOTTLE | 500ML |
AM-105 | Technologies ACCUMAX 100ML BOTTLE | 100ml |
AT106 | ACCUTASE CELL DETACHMENT REAGN | 100mL |
AT-104 | Accutase | 100ml |
AM105-500ml | Accumax | 500ml |
AM105 | Accumax | 100ML |
AT104-100 | cell detachment solution | 100ml |
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