Biotium（博迪森）特约代理经销商

前言

Biotium 与上海起发实验试剂有限公司达成特约代理经销合作。即日起，中国地区用户可通过上海起发实验试剂有限公司（特约代理经销商）咨询与采购 Biotium 全线荧光试剂产品，获取货号核对、批次溯源与技术资料支持。

一、公司介绍

Biotium 是一家以化学研发为核心的生命科学试剂企业，专注于荧光染料、荧光探针与生物检测试剂的设计、开发与制造。其研发路径强调从分子结构层面解决实际问题，通过改良染料的水溶性、光稳定性与标记效率，服务于细胞生物学、分子生物学、免疫学、神经科学及药物筛选等研究方向。

品牌的技术主线围绕 CF® Dyes（CF® 荧光染料） 展开。该系列染料覆盖可见光至近红外区段，提供多种激发／发射波长组合，可用于荧光显微镜、共聚焦、流式细胞术、多重免疫荧光（IF）与超分辨成像等平台。除染料本体之外，Biotium 将其转化为多类即用型试剂：抗体偶联物、链霉亲和素与凝集素偶联物、蛋白／抗体标记试剂盒、细胞活性与凋亡检测体系、核酸凝胶染料、细胞核染料及背景信号调控试剂。

产品体系中较具代表性的技术平台包括：

• CF® Dyes：荧光素替代型染料，强调亮度与光稳定性，并以多种官能团形式（琥珀酰亚胺酯、马来酰亚胺、肼、氨基氧等）支持用户自行标记；

• Mix-n-Stain™ 抗体标记试剂盒：面向小量抗体的一步式标记方案，通常可在数十分钟内完成标记，多数版本无需纯化步骤；

• NucView® Caspase-3 酶底物：活细胞凋亡检测探针，支持免洗与实时成像；

• EverBrite™ 抗淬灭封片剂：用于荧光信号在成像过程中的保持；

• GelRed® / GelGreen®、EvaGreen® 等核酸染色与 qPCR 染料体系；

• TrueBlack® 自荧光淬灭剂：针对脂褐素等自发荧光背景的调控工具。

Biotium 在与产品资料中提供配套的 Protocol、SDS、COA、光谱数据与文献索引，便于使用者在具体实验体系中核对参数。

二、热门产品介绍

产品 01｜Hoechst 33342（货号 40046 / 40047）

品名：Hoechst 33342, 10 mg/mL in H₂O（货号 40046）；Hoechst 33342, trihydrochloride trihydrate（货号 40047，粉末，100 mg）。

产品特点

Hoechst 33342 为可透过细胞膜的蓝色荧光 DNA 染料，通过结合 DNA 小沟产生荧光信号，激发／发射波长约为 350/461 nm（与 DNA 结合时）。该染料可用于活细胞与固定细胞，也可作为核复染（counterstain）组分用于细胞周期分析与凋亡研究。

与 Hoechst 33258 相比，33342 的膜通透性相对更强；两者光谱接近，可根据染色体系与溶解需求选择。Biotium 同时提供水溶液（40046）与粉末（40047）两种形态，便于直接稀释或自行配制储备液。

存储条件

依据 Biotium 产品资料：40046、40047 均建议 避光保存，存储温度为 2–8 °C；粉末形态应注意防潮。具体以随货产品信息单页（Product Information Sheet）与标签为准。

工作原理

Hoechst 染料进入细胞后，与双链 DNA 的小沟区域结合，染料荧光显著增强。蓝色荧光信号即反映细胞核所在位置与 DNA 含量分布。在凋亡或细胞周期实验中，它常与 Annexin V、Caspase 底物、死细胞核染料等搭配，构成多色判读体系。

使用方法（参考流程）

1. 取 Hoechst 33342 储备液，按实验体系稀释至工作浓度，文献中常用浓度量级约为 1 µg/mL；

2. 将染色液加入细胞培养体系或缓冲液中，室温或 37 °C 孵育数分钟至数十分钟；

3. 活细胞染色后可直接观察；如需洗去多余染料，可用缓冲液轻洗后上机或成像；

4. 固定细胞可在固定前后染色，注意后续封片与避光操作。

实际浓度、孵育时间与固定方式应结合细胞类型、染色剂组合与仪器通道先做条件摸索。

产品 02｜CF®488A Annexin V and 7-AAD Apoptosis Kit（货号 30060）

品名：CF®488A Annexin V and 7-AAD Apoptosis Kit，规格 100 assays（货号 30060）。

产品特点

该试剂盒用于流式细胞术同步区分凋亡与坏死细胞：

• CF®488A Annexin V（Ex/Em 约 490/515 nm）标记凋亡细胞，呈绿色信号，对应 FITC 通道；

• 7-AAD 为膜非通透性核酸染料，可进入坏死或晚期凋亡细胞，呈远红信号（Ex/Em 约 548/648 nm，与 DNA 结合时），对应 PE-Cy 或 PerCP 通道。

两者组合可在一次检测中将活细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡／坏死细胞进行区分。CF®488A 作为荧光素替代染料，在光稳定性与 pH 敏感性方面与传统 FITC 存在差异，实际表现仍需在各自仪器上验证。

存储条件

Biotium 产品页标注：试剂盒建议 2–8 °C 保存，请勿冻存，避光。Annexin V 结合缓冲液等组分按说明书要求操作，避免反复冻融。以随货说明书与标签为准。

工作原理

在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）位于细胞膜内侧；细胞进入凋亡过程后，PS 外翻至膜外侧。Annexin V 是钙离子依赖的磷脂结合蛋白，对 PS 有较高亲和力，经 CF®488A 标记后即可对膜外侧暴露 PS 的细胞进行荧光标记。

7-AAD 因分子特性不易进入膜结构完整的活细胞，故在活细胞与早期凋亡细胞中信号较弱；当细胞膜完整性受损（坏死或晚期凋亡），7-AAD 进入细胞与核酸结合而发荧光。两者联合即构成四象限判读逻辑。

使用方法（参考流程）

1. 收集细胞，用预冷的 1× Annexin Binding Buffer 洗涤；

2. 重悬于结合缓冲液，加入 CF®488A Annexin V 与 7-AAD，轻柔混匀；

3. 室温避光孵育约 15–30 分钟（以说明书为准）；

4. 上机前补加结合缓冲液，尽快完成流式检测；

5. 以未染色、单染对照调节补偿与荧光通道，进行群体划分。

操作宜在低钙／无钙条件之外维持 Annexin V 对钙离子的需求，所用缓冲液、离心力与时间点建议保持一致。

产品 03｜NucView® 488 Caspase-3 Substrate（货号 10406）

品名：NucView® 488 Caspase-3 Substrate（货号 10406，规格 100 µL，1 mM in DMSO）。

产品特点

NucView® 是一类基于 Caspase-3 活性的荧光酶底物，用于活细胞中凋亡事件的检测。NucView® 488 发绿色荧光，可与蓝色核染料、线粒体电位染料或远红探针组合，做多色活细胞成像与时间序列记录。产品支持免洗、实时成像，并可兼容后续甲醛固定流程。

同系列还包括 NucView® 530 等，可根据通道安排选择；其中 488 版本在使用 488 nm 激光激发、与绿色探针共染时需注意光谱串色问题。

存储条件

依据 Biotium 产品属性页：建议 -10 至 -35 °C 保存，避光；部分规格亦标注 2–8 °C 短期条件。DMSO 储备液应避免反复冻融，具体以产品信息单页、SDS 与标签为准。

工作原理

NucView® 技术将一种对 DNA 有亲和力的荧光染料与 Caspase-3 的底物肽段（DEVD）相连。底物在未裂解状态下荧光较弱；当细胞内 Caspase-3 被激活并切割底物肽段后，游离染料与 DNA 结合，产生可检测的荧光信号。由于信号发生在凋亡执行阶段，该体系可用于观察凋亡发生的时间与空间分布。

使用方法（参考流程）

1. 从 -20 °C 取出 DMSO 储备液，短暂离心后按体系稀释至工作浓度；

2. 将 NucView® 488 加入细胞培养液中，于 37 °C、CO₂ 培养条件下孵育；

3. 可在荧光显微镜或活细胞成像系统下连续记录，也可在设定时间点取样观察；

4. 如需固定，使用甲醛固定后再进行后续染色或上机操作；

5. 绿色信号的出现与强度需设置阳性对照（如 STS 处理）与阴性／未处理对照，避免将非特异性染色误判为凋亡。

浓度与孵育时间受细胞类型、诱导剂与仪器灵敏度影响，宜先以梯度条件确定线性区间。

三、解决实验中的哪些问题

1. 荧光信号衰减与成像重复性差

CF® Dyes 在设计与选型中考虑了光稳定性因素，适用于需要较长时间的单张采集、Z 轴层扫或多次曝光的多色成像。配合 EverBrite™ 抗淬灭封片剂，可在固定样本成像中减缓信号衰减。

2. 凋亡与坏死群体的区分

凋亡研究常仅依赖单一核染料，难以分辨早期凋亡、晚期凋亡与坏死。30060 试剂盒以 Annexin V 与 7-AAD 双参数判读，配合 NucView® 的活性 Caspase-3 读值，可形成从膜事件到酶活性的多层级证据。

3. 活细胞长时程记录中的毒性与洗涤干扰

NucView® 免洗体系减少换液与离心步骤，对易脱落、易碎的贴壁细胞及悬浮细胞较友好；Hoechst 33342 可在活细胞中直接染色，便于实时追踪核形态变化。

4. 抗体标记流程复杂、抗体用量小

Mix-n-Stain™ 系列面向 5–100 µg 量级的抗体标记，一步反应、多数版本无需纯化，用户可自行制备 CF® Dye 标记的二抗或一抗，用于 IF、流式与超分辨成像。常见货号如 CF®594 标记试剂盒 92276（5–20 µg）、92256（20–50 µg）、92236（50–100 µg）。

5. 自发荧光与组织背景干扰

TrueBlack® 背景减少剂可用于脂褐素等来源的背景调控；CF® Dye 提供从紫外到近红外的多色选择，有助于在复杂样本中将目标信号与目标外的自发荧光错开。

6. 核酸染色的安全与灵敏需求

GelRed®、GelGreen® 等核酸凝胶染料，以及 EvaGreen® qPCR 染料，覆盖常规琼脂糖凝胶染色与实时定量 PCR 场景，使用者可依据仪器通道、dsDNA 结合模式与产物判读方式选择。

四、常见问题与解答

Q1：Biotium 的 CF®488A、CF®594 与 FITC、Texas Red® 通道是否兼容？

A：CF®488A 光谱与 FITC 接近，CF®594 与 Texas Red® 区段接近，CF®640R 与 Cy®5 区段接近。多色实验前建议使用厂家提供的光谱查看器核对激光器、滤光片与检测器组合，并做单染补偿对照。

Q2：抗体标记试剂盒应如何选择染料与规格？

A：先确定显微镜或流式仪的可用通道，再依据抗体可用量选择规格。例如 Mix-n-Stain™ CF®594 抗体标记试剂盒，5–20 µg 对应 92276，20–50 µg 对应 92256，50–100 µg 对应 92236。使用前需核对抗体缓冲液是否含胺类、甘油、叠氮钠等可能影响标记的成分。

Q3：Hoechst 33342 与 Hoechst 33258 如何选择？

A：两者均为蓝色核染料、光谱接近。33342 膜通透性相对更强，常用于活细胞；33258 水溶性相对更好。若体系对细胞活性、染色速度敏感，可先做平行比较再定型。

Q4：凋亡试剂盒上机前为什么要设对照？

A：Annexin V／7-AAD 判读依赖荧光补偿与群体边界。建议使用未染色细胞调节电压、单染样本校正补偿，并设置阳性诱导对照（如星形孢菌素处理）确认染料响应，避免将仪器漂移或自发荧光误读为凋亡信号。

Q5：NucView® 信号不出现或本底偏高怎么办？

A：先检查储备液是否避光保存、冻融次数是否过多；再核对细胞是否有 Caspase-3 通路活性、诱导剂浓度与作用时间是否充分。可降低或提高工作浓度、缩短／延长孵育时间做梯度测试，并以未处理细胞与阳性对照作为判读基准。

Q6：染料类产品的有效期如何判断？

A：Biotium 在部分产品页说明：试剂盒的保证保质期见于产品信息单页，部分试剂盒盒标印有保质期；抗体与偶联物以数据表为准；化学、染料与凝胶染色类在按要求保存条件下通常具备较长时间的稳定性。建议在大量或珍贵样本上样前，先做小规模阳性对照验证。

Q7：试剂到货后应如何验收与保存？

A：核对货号、规格、批号、到货温度与外观，确认 SDS、COA 等文件；按标签要求分温区保存（2–8 °C、冻存或室温），荧光化合物注意避光。试剂使用前恢复至推荐温度，避免反复冻融。

Q8：能否提供多色实验的通道搭配建议？

A：可在一次实验中组合蓝色核染料（如 Hoechst）、绿色 Caspase 底物（NucView® 488）、橙色／远红探针等，但应避免相邻通道串色。具体组合须结合仪器激光线与滤片，必要时调整染料顺序或采用光谱拆分。

五、关于采购与技术支持

上海起发实验试剂有限公司作为 Biotium 特约代理经销商，可为用户提供货号匹配、产品资料核对、批次溯源与到货验收等支持。选购时建议同时确认：产品货号、规格、研究用途声明、运输温度与存储条件，并在实验方案中保留对照设计。

Biotium 全线产品仅供生命科学研究使用，不用于临床诊断、治疗或人体给药。实验操作中涉及的化学品、酶类与核酸染料，请按所在实验室安全规程与废弃物管理规定执行。

关键词：荧光染料、CF染料、CF488A、CF594、细胞凋亡检测、Annexin V、7-AAD、Caspase-3底物、NucView、Hoechst 33342、细胞核染色、流式细胞术、荧光显微镜、免疫荧光、抗体标记试剂盒、Mix-n-Stain、超分辨成像、近红外荧光、核酸凝胶染料、qPCR染料

更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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