Glen Research寡核苷酸合成试剂选型及代理商介绍

▌前言

美国Glen Research Corp（商标Sterling™、Glen-Pak™）从事DNA/RNA寡核苷酸合成、修饰与纯化试剂供应。上海起发实验试剂有限公司为其授权代理商，面向国内实验室提供目录产品、货期咨询与售后技术对接。

📌 下图为上海起发实验试剂有限公司作为美国Glen Research Corp授权代理商的授权书

▌一、品牌与产品体系

「1」核酸合成单体  

提供标准DNA/RNA亚磷酰胺，以及2′-O-甲基、硫代、稀有碱基、荧光、生物素、叠氮/炔基等修饰单体，用于人工设计寡核苷酸序列。

「2」固相载体  

CPG系列按孔径分为500Å、1000Å、2000Å，配合dA、dC、dG、dT及各类3′端修饰载体，覆盖短链、中长链与长链合成。

「3」标记与猝灭组件  

荧光染料以Cyanine、FAM、TAMRA、ROX等形态提供亚磷酰胺或CPG；猝灭组分包含BHQ、Dabcyl、Eclipse®等，用于探针构建。

「4」纯化与后处理耗材  

Glen-Pak™ cartridges、Glen Gel-Pak™及相应缓冲体系，用于脱盐、反相纯化、.page前处理等环节。

「5」质量文件  

常规单体随批提供Certificate of Analysis，部分产品附HPLC轨迹；CPG提供孔径、负载、端帽与drop-off信息，便于合成工艺追溯。

▌二、热门产品介绍

「01」dA-CE Phosphoramidite｜货号10-1000系列（以10-1000-02/05/10/20/40为例）

◇品名：5′-DMT-N-苯甲酰基-2′-脱氧腺苷-3′-β-氰乙基二异丙基亚磷酰胺  

◇常用包装：0.25 g、0.5 g、1.0 g、2.0 g、4.0 g  

◇产品特点：用于标准DNA自动合成仪添加A碱基；批检项目包含HPLC纯度、TLC、31P NMR、偶联测试与0.1 M溶液澄清度检测，目检减少颗粒污染。目录标准品要求HPLC与31P纯度≥98%，偶联效率≥99%。  

◇存储条件：未开封产品置于干燥环境，避光保存；具体温度以产品标签与CoA为准，亚磷酰胺对水分敏感，稀释后使用无水乙腈并尽快上机。  

◇工作原理：亚磷酰胺在三唑类活化剂作用下生成亚磷酰四唑中间体，与固载引物3′-OH发生亲核取代形成亚磷酯键；经封端补齐未反应羟基，氧化剂将三价磷转为磷酸三酯，酸洗脱DMT可监测偶联；循环叠加碱基后氨解切除保护基并脱离载体。  

◇使用方法：  

①按合成仪推荐浓度用无水乙腈配制单体溶液，10-1000-02约0.25 g可按0.1 M折算约2.9 mL，实际以仪器与 column volume为准。  

②装入对应阀门或单孔瓶，执行标准DNA合成循环，活化—偶联—封端—氧化—DMT脱除。  

③合成结束后按dA所用碱基保护基选择氨解条件；常规苯甲酰基/异丁酰基保护可用氨水室温或加热方案，具体参照碱基组合与合成仪手册。  

④切落产物经Glen-Pak™或反相纯化，定量后用于PCR、测序引物、杂交探针等。

「02」dA-CPG 2000｜货号20-2002

◇品名：5′-DMT-N-苯甲酰基-2′-脱氧腺苷，3′-琥珀酰-长链烷基氨基-CPG，孔径2000Å  

◇常用形态：按合成柱规格、装载量与仪器接口选配  

◇产品特点：采用标准lcaa接头；500Å适合较短序列，1000Å对30 mer以上DNA更合适，2000Å用于150 mer以上长链。全端帽处理降低未钝化表面产生的缺失序列；CoA记录因空间位阻导致偶联下降的drop-off点。  

◇存储条件：受控室温或更低温度、干燥保存；运输与暂存避免高湿，开封后按合成仪要求装柱，剩余载体密封防潮。  

◇工作原理：CPG作为固相基质，3′端预先固定首碱基；合成循环在孔道内接长寡链，孔径越大对长链空间阻碍越小。端帽使断裂产生的新鲜硅面失活，减少非法起始。  

◇使用方法：  

①按目标长度选孔径：＜30 mer可评估500Å，30–150 mer评估1000Å，＞150 mer评估2000Å。  

②装柱后执行合成仪标准dA起始程序，无需更改偶联基本参数；长链可将偶联等待由15秒延长至30秒以上，封端等待相应延长，必要时Cap B采用DMAP以提高封端完整度。  

③按所用人造碱基保护基脱保护；若使用氨解，依dA/dC/dG/dT保护基组合确定温度与时间。  

④长链产物建议反相或凝胶型纯化，用毛细管电泳/PAGE/LC验证全长比例。

「03」Cyanine 5 CPG｜货号20-5915

◇品名：Cyanine 5标记CPG，1000Å，3′-固载近红外花青染料  

◇常用规格：按0.1 g、1.0 g级与柱型选配  

◇产品特点：用于3′端Cy5标记，避免5′端染料在部分合成仪DMT监测中被误判；也可配合Cy5亚磷酰胺做5′标记。产品面向FRET、分子信标、近红外检测与多重荧光体系。  

◇存储条件：冷冻保存，-10℃至-30℃，干燥避光；开封后避免反复回温，分装使用可降低受潮与光照降解。  

◇工作原理：CPG在3′端预置Cy5，合成时从5′向3′延伸，最终切落得到3′-Cy5寡核苷酸；Cy5激发/发射位于近红外区间，和FAM、HEX、TAMRA等组合可实现多色检测，与猝灭剂配对可构建探针。  

◇使用方法：  

①若全程标准碱基，可用10-1030 dT等标准单体；若含对酸/热敏感修饰，评估UltraMILD碱基组合。  

②将20-5915装入3′端支持柱，按常规循环添加其余亚磷酰胺；如仅做3′标记，不在5′再加Cy5亚磷酰胺。  

③脱保护按碱基保护基选择：标准碱基可氨水温室24–36小时；若使用UltraMILD dA 10-1601、dC 10-1015、dG 10-1621、dT 10-1030，可用0.05 M K2CO3/甲醇室温4小时，或30%氨水温室2小时。高温氨解时Cy5稳定性弱于Cy3，宜缩短处理时间。  

④产物用反相HPLC或Glen-Pak™纯化，测定A260与Cy5特征吸收，校验标记率。

▌三、可解决的实验问题

「1」短片段引物杂质多：标准CE单体批检纯度与偶联效率，配合端帽CPG降低缺失副产物。  

「2」长链合成收率不足：按长度选1000Å/2000Å CPG，优化偶联等待与封端，降低空间位阻导致的提前掉耦。  

「3」荧光探针信噪比偏低：Cy5 CPG与BHQ/Dabcyl/Eclipse®等猝灭器组合，明确5′或3′标记位置，减少DMT监测误差。  

「4」修饰寡核苷酸构建复杂：氨基、羧基、生物素、叠氮、炔基、硫代、稀有碱基等单体可按标准亚磷酰胺循环掺入，后接点击化学或亲和纯化。  

「5」纯化回收不稳定：按产物长度与疏水性选Glen-Pak™柱容量或Glen Gel-Pak™介质，建立脱盐—反相—分析验证流程。

▌四、采购与使用中常见疑问

Ｑ1：货号如何对应仪器？  

Ａ：标准亚磷酰胺可按ABI、Expedite、Mermade等仪器选瓶型与浓度；下单时提供合成仪型号、单步合成量、瓶/柱接口，由上海起发实验试剂有限公司核对10-xxxx或20-xxxx配置。

Ｑ2：亚磷酰胺配制后多久有效？  

Ａ：以无水乙腈配制后尽量当日使用；1-Ethynyl-dSpacer 10-1910溶液稳定性约1–2天，Symmetric Doubler 10-1920约2–3天，常规dA/dC/dG/dT按标签与CoA执行，避免含水溶剂。

Ｑ3：长链用哪种CPG？  

Ａ：＜30 mer评估500Å，30–150 mer评估1000Å，＞150 mer评估2000Å；如合成仪出现后期偶联下降，可结合CoA drop-off点调整等待时间与封端方案。

Ｑ4：Cy5 CPG脱保护会褪色吗？  

Ａ：标准氨解对Cy5可行，但高温长时间处理可能增加降解；含UltraMILD碱基时优先温和甲醇钾碳酸盐或短时氨水方案，纯化前避光。

Ｑ5：硫代单体如何配液？  

Ａ：部分硫代亚磷酰胺需用含10%无水DCM的乙腈作稀释剂，浓度约0.15 M，活化剂可评估0.25 M ETT或DCI，硫化用Sulfurizing Reagent II/DDTT等配套试剂，具体以对应技术公报为准。

Ｑ6：CPG到货有细粉是否正常？  

Ａ：高孔CPG质地较脆，运输可能产生少量细粉；装柱使用合适frit，必要时按厂家建议预封端，不影响既定合成方案。

Ｑ7：如何确认每批质量？  

Ａ：单体可索取CoA与HPLC轨迹，CPG可核对孔径、装载量、端帽与drop-off文件；如实验参数异常，提供合成仪型号、循环表、脱保护条件用于排查。

Ｑ8：修饰单体能否和标准A/C/G/T混用？  

Ａ：多数CE修饰单体可按标准循环掺入，但荧光、硫代、RNA、酸敏、UltraMILD体系可能存在脱保护或封端差异，需按单个货号技术单确认。

Ｑ9：纯化柱怎么选容量？  

Ａ：按合成规模与产物毫克数选Glen-Pak™ 10 mg/30 mg/3 g等级；粗产物盐度高先用脱盐，疏水差异大再用反相，长链或高二级结构可评估凝胶过滤。

Ｑ10：订单到货周期如何预估？  

Ａ：国内常备目录货号周期较短，非常规包装、特殊瓶型、RNA高敏单体或批量定制需向上海起发实验试剂有限公司确认进口库存与运输条件。

▌五、选型简表思路

◇常规PCR引物、测序引物：10-1000/10-1010/10-1020/10-1030＋500Å或1000Å对应CPG。  

◇30–150 mer DNA：1000Å CPG，标准CE单体，长链延长偶联等待。  

◇＞150 mer或高二级结构：2000Å CPG，评估DMAP封端与分步偶联。  

◇3′荧光探针：20-5915 Cy5 CPG或其他染料CPG；5′荧光用对应Phosphoramidite。  

◇点击化学修饰：10-1910 1-Ethynyl-dSpacer等炔基/叠氮单体，合成后与叠氮/炔基配体共轭。  

◇多重标记树突探针：10-1920 Symmetric Doubler或10-1925 Long Trebler，配合1000Å支持物与延长偶联。

▌六、技术合规与使用注意

「1」亚磷酰胺均按无水体系操作，瓶子、管路、乙腈均应避免进水；进水会导致水解、偶联率下降。  

「2」CPG孔径、装载量、首碱基与3′修饰必须和合成仪column定义一致，混用会造成起始失败。  

「3」荧光与猝灭产品避光保存，脱保护温度、氨水浓度、甲醇钾碳酸盐条件需按单体技术单执行。  

「4」硫代、RNA TBDMS/TOM、UltraMILD、mRNA帽结构相关单体各有独立脱保护要求，不可套用单一氨解程序。  

「5」所有存储温度、稳定性天数、脱保护时长以具体货号CoA与技术公报为准，推文参数仅作选型参考。

▌七、适用研究方向

DNA/RNA化学合成、qPCR与测序引物、FRET与分子信标、ASO/siRNA化学修饰、mRNA帽与修饰核苷研究、表观遗传甲基化模型、G-四链体与i-Motif结构、核酸纳米组装、蛋白/小分子亲和捕获、近红外成像探针。

关键词：寡核苷酸合成试剂、DNA亚磷酰胺单体、RNA修饰单体、CPG固相载体、Cyanine5标记CPG、硫代磷酸寡核苷酸、荧光猝灭探针、Glen-Pak纯化柱、叠氮炔基点击化学、长链DNA合成方案、引物去杂质纯化、FRET分子信标构建、ASO化学修饰原料、siRNA载体试剂、mRNA帽结构单体、甲基化检测亚磷酰胺、核酸纳米材料试剂、近红外成像探针、定制修饰寡核苷酸、实验室授权代理采购

更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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