BioGrammatics毕赤酵母定向糖基化方案与特约代理经销商实录

▌01 前言

上海起发实验试剂有限公司正式作为美国BioGrammatics生物公司特约代理经销商，承接其旗下GlycoSwitch®商标系列毕赤酵母表达工具及配套试剂在中国的询单与技术对接。

▌02 品牌公司介绍

BioGrammatics围绕甲基营养型毕赤酵母Pichia pastoris这一单细胞真核表达宿主，持续输出两类交付物│一类是可直接下单的现货试剂，包含工程化感受态菌株、pGlycoSwitch®系列表达载体、选择性培养基及菌株构建试剂盒；另一类是按需启动的合约服务，覆盖基因序列优化、定制菌株构建、小规模高密度发酵、转录组建库与基因组测序数据分析。

其GlycoSwitch®技术路线的核心切入点在于N-连接糖基化修饰│通过在SuperMan5背景中对Och1位点进行改造并引入里氏木霉来源的α1,2-甘露糖苷酶表达盒，使宿主分泌产物的糖链停留在Man5结构，更接近哺乳动物细胞的糖型特征。该技术已实际参与过传染病抑制剂筛选项目以及食品级风味蛋白的工业化表达验证。

▌03 热门产品

① PS005-01 · 糖基化毕赤酵母SuperMan5 (his-) GlycoSwitch®菌株

│ 品名│Pichia pastoris SuperMan5 strain (HIS-, histidine auxotroph)

│ 真实货号│PS005-01

│ 产品特点│Och1基因敲除背景搭载pGAP-甘露糖苷酶表达盒，组氨酸营养缺陷型筛选标记，杀稻瘟素抗性基因共整合；分泌表达产物呈现均一的Man5 N-连接寡糖结构

│ 存储条件│甘油保藏菌液-80℃长期存放，工作菌液4℃不超过两周，避免反复冻融

│ 工作原理│借助毕赤酵母自身醇氧化酶强诱导型启动子系统驱动外源基因分泌表达，同时由改造后的糖基化通路截断高甘露糖链延伸，输出可控糖型的重组蛋白

│ 使用方法│将其作为受体直接进行电转化或化学法转化pGlycoSwitch®载体质粒；转化子先在Minimal Medium (无组氨酸)平板筛选，挑单克隆扩培后转至BMGY/BMMY诱导培养基进行甲醇诱导表达

② CSB-E14393m · Mouse Interleukin-33 (IL-33) ELISA Kit

│ 品名│小鼠白细胞介素33酶联免疫吸附测定试剂盒

│ 真实货号│CSB-E14393m

│ 产品特点│双抗体夹心法，检测范围15.6–1000 pg/mL，典型灵敏度≤3.9 pg/mL，板内CV<8%、板间CV<10%，提供96孔预包被微孔板与全套浓缩稀释液

│ 存储条件│未开封试剂盒2–8℃避光保存；拆封后的包被板放回铝箔袋密封防潮可存一个月；标准品暂不使用时建议分装-20℃

│ 工作原理│微孔内预包被鼠源IL-33捕获抗体，样本中抗原先与固相抗体结合，再加入生物素化检测抗体形成三明治复合物，随后HRP-链霉亲和素催化TMB显色，450 nm读值定量

│ 使用方法│样本血清室温凝块两小时或4℃过夜后1000×g离心15分钟取上清；组织匀浆按100 mg : 1 mL PBS制备并经两次冻融裂解后5000×g离心取上清；各孔依次加入标准品与样本50 μL、生物素二抗100×浓缩液工作液、HRP-avidin工作液，37℃分步孵育，每次孵育后用25×浓缩洗液洗涤，最后加TMB避光显色10分钟并以终止液截止，酶标仪读数

③ CSB-PA021062EA01HU · SERPINA6 兔多克隆抗体

│ 品名│Rabbit anti-Human SERPINA6 Polyclonal Antibody (Non-conjugated)

│ 真实货号│CSB-PA021062EA01HU

│ 产品特点│免疫原为重组人皮质类固醇结合球蛋白23-405AA片段，Protein G亲和纯化纯度>95%，IgG亚型，经U87全细胞裂解液WB验证观察条带46 kDa，同批次提供HRP/FITC/Biotin三种偶联变体可选

│ 存储条件│收到后-20℃或-80℃分装保存，工作液4℃一周内用完，避免反复冻融循环

│ 使用方法│WB推荐2.7 μg/mL一抗浓度、二抗羊抗兔IgG 1:50000；IHC石蜡切片经柠檬酸缓冲液(pH6.0)高压修复、10%正常山羊血清封闭30分钟后，一抗1:800 4℃过夜孵育，生物素化二抗结合HRP-SP显色系统判读；IF用HepG2细胞4%甲醛固定、0.2% Triton X-100通透后1:266孵育，Alexa Fluor 488二抗复染DAPI

▌04 这套试剂解决的实验卡点

│ 糖型异质性│常规GS115宿主分泌的重组蛋白常带高甘露糖尾巴，后续体内实验会遇到非预期免疫原性信号，SuperMan5背景能把糖链终点锁在Man5这一档

│ 表达菌株构建周期长│pGlycoSwitch®载体已预装对应筛选标记(G418 / 潮霉素 / 诺尔丝菌素 / Zeocin)，省去自行组装同源臂的亚克隆步骤

│ 炎症因子样本批量筛查通量不够│CSB-E14393m这类预包被夹心法试剂盒把批内变异压到个位数百分比，适合同一批动物模型的多时间点血清追踪

│ 一抗交叉反应难排查│该SERPINA6多抗提供同源重组免疫原序列，较混合肽段抗血清在肝肾组织IHC里的背景更低

▌05 采购与实验准备 · Q&A

Q1 · 冻干粉状重组蛋白到手看不见粉末是否正常

A · 多数批次冻干前未额外添加BSA或蔗糖载体，低盐体系下管壁只会留下一层透明薄膜。开盖前3000–3500 rpm离心20–30秒把管壁残留归集到底部即可，每管投料量在出厂QC环节已校准。

Q2 · 复溶该用无菌水还是含甘油缓冲液

A · 初次重悬统一用无菌去离子水调至0.1–1.0 mg/mL；如需跨月使用再补加甘油至终浓度5%–50%(默认参考值50%)分装冻存，短期4℃工作液不必加甘油。

Q3 · 想要特定融合标签(His / GST / MBP)能否指定

A · 常规现货的标签类型在生产排期中确定。下单时备注所需标签组合，产线可按指定方案安排批次，His-GST、His-SUMO、His-MBP等组合均有前例。

Q4 · 不同批次抗体浓度标称值不一致怎么处理

A · 多抗类制品批次间蛋白浓度存在正常浮动，建议每次实验以推荐稀释比(而非固定质量浓度)为起点做一块梯度预实验，再回推本批次的最佳工作浓度。

Q5 · 干冰运输要不要提前说

A · 蛋白类产品默认蓝冰发货；如需干冰需在下单环节同步备注，涉及额外冷链费用与预约窗口。

关键词：毕赤酵母表达系统、Pichia pastoris感受态细胞、GlycoSwitch糖基化改造、SuperMan5酵母工程菌株、pGlycoSwitch表达载体试剂盒、重组蛋白糖型调控方案、酵母高密度发酵培养基配方、小鼠IL-33 ELISA检测试剂盒、夹心法酶联免疫定量流程、人SERPINA6多克隆抗体验证、WB IHC IF一抗稀释比参考、冻干重组蛋白复溶分装方法、真核蛋白分泌表达菌株构建、酵母基因组测序转录组分析、custom Pichia strain contract service、非动物源胶原酵母表达平台、上海起发生命科学试剂代理、科研抗体ELISA货号查询、外源基因甲醇诱导表达条件、组氨酸营养缺陷型筛选标记

更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

🔖BioGrammatics热卖产品