▌前言
上海起发实验试剂有限公司正式作为 Triple Helical Peptides Ltd(商标:THP)的特约代理经销商,负责该品牌胶原类三股螺旋肽产品线在国内的技术对接与供货协调。
§01 品牌与研发脉络
Triple Helical Peptides Ltd 的研发脉络可追溯至剑桥大学生物化学系 Richard Farndale 课题组与相关 Strangeways 研究实验室的长期工作积累。团队在1995年发表 Collagen-Related Peptide(CRP)序列,1998年借助该配体确认 Glycoprotein VI(GPVI)为血小板表面识别胶原的主要活化受体;后续陆续完成 Collagen Toolkit 初代(覆盖Ⅲ型胶原全长三股螺旋域)与第二代(覆盖Ⅱ型胶原)的合成与验证。该系列现更名为 Collagen Ligands Collection(CLC)。
产品线的设计逻辑建立在一条共识之上:针对特定靶点的识别同时依赖肽段氨基酸序列与其三股螺旋空间构象。同一序列的线性版本(单链对照肽,可由品牌方另行提供)在大多数结合实验中信号显著偏弱或不呈现活性。因此所有上市 THP 均以 (Gly-Pro-Hyp)₅ 即 GPP₅ 片段作为两端 Host 稳定翼,中间嵌入27个残基的 Guest 序列并按18个残基步进平移,相邻肽段保留9个残基重叠窗口。
§02 热卖产品
§02-01|Collagen Ligands Collection Ⅱ(CLC II)
❖ 货号:CLC-II-SET(整板套装,含三张复检优化用空白板)
❖ 品名:Collagen Ligands Collection Class Ⅱ / Sub-class Collagen Ⅱ,56枚重叠三股螺旋肽预包被96孔板
❖ 产品特点:56条 Guest 序列自Ⅱ型胶原 COL 域 N 端起始依次平移覆盖;每条肽全长63残基,两端 GPC 延伸段预留可选交联位点;附带 GPP₁₀ 惰性三股螺旋阴性对照与空孔 BSA 封阻对照
❖ 存储条件:收到后以原封装铝箔袋4℃避光存放;拆封后未用完的板条用配套密封膜回封,-20℃可保存至品牌方标示的有效期内,避免反复冻融
❖ 工作原理:各孔肽段以10 µg/ml 饱和浓度共价吸附于聚苯乙烯孔底;待测蛋白或细胞悬液加入后,仅当靶标存在对应构象识别表位时形成固相复合物,后续经一抗/酶标二抗放大读取 OD 值,从而将结合位点定位到具体9残基重叠区间
❖ 使用方法:200 µL 50 mg/ml BSA in TBS 室温封阻1 h → TBS-0.1% Tween-20 洗三次 → 加50–100 µL 靶蛋白(建议起始100 nM,按体系优化)→ 室温孵育1 h → 同缓冲液洗三次 → 一抗1:2000 室温1 h → 洗三次 → 酶标二抗1:10000 室温1 h → 洗三次 → 按试剂盒加底物读数
§02-02|Collagen Ligands Collection Ⅲ(CLC III)
❖ 货号:CLC-III-SET(整板套装,含三张复检优化用空白板)
❖ 品名:Collagen Ligands Collection Class Ⅲ / Sub-class Collagen Ⅲ,57枚重叠三股螺旋肽预包被96孔板
❖ 产品特点:57条肽覆盖Ⅲ型胶原三股螺旋域全长,步进与重叠规则同 CLC II;该矩阵曾用于鉴定整合素结合簇、GPVI 活化簇与 VWF A3 结合簇的位置分布
❖ 存储条件:与 CLC II 一致;板面为预包被工艺,不建议超声或有机溶剂处理
❖ 工作原理:相同重叠扫描逻辑应用于Ⅲ型胶原序列;因Ⅲ型胶原在血管壁基底膜与活化血小板微环境里丰度较高,该板常被用于区分某候选受体对Ⅱ型与Ⅲ型胶原的结合偏好
❖ 使用方法:沿用上文九步 protocol;若研究对象为全血流动条件下的 VWF A3 捕获,建议在 adhesion buffer 中将 BSA 浓度下调至0.5 mg/ml 以降低竞争背景
§02-03|GFOGER Triple-Helical Peptide(单体溶解型)
❖ 货号:THP-GFOGER-HP(Host-stabilised, 冻干粉)
❖ 品名:GFOGER Motif THP, sequence GPC-(GPP)₅-GFOGER-(GPP)₅-GPC-NH₂
❖ 产品特点:GFOGER 是被报道较多的整合素识别基序,可被 α1β1、α2β1、α10β1、α11β1 四类胶原结合整合素共同识别;α2β1 同时为血小板表面表达的该家族成员,因而该肽段也可作血小板黏附涂层
❖ 存储条件:冻干粉4℃运输,到货后分装,-20℃或-80℃长期保存;复溶后短期4℃避光使用,剩余等分冻存
❖ 工作原理:Motif 两侧 GPP₅ Host 将 Tm 稳定在接近或高于37℃区间,使涂层或溶液状态下的三股螺旋构象在常规细胞培养温度内维持;线性变体不呈现同等水平的细胞铺展响应,该差异常被用作构象对照
❖ 使用方法:先取少量粉末用无菌 PBS(pH7.4)试溶,难溶时改用含少量乙酸的水相或短暂温和超声;包被浓度文献区间多为1–20 µg/cm²,用于水凝胶共组装时按质量比 k9R:Sol-GFOGER ≈ 30:1 溶于纯水后4℃过夜退火成胶
§03 可回应的实验卡点
▸ 结合位点作图周期长:传统全长胶原酶切片段重叠差、批次间异质性明显;CLC 板的57/56条定义明确的合成肽把初筛压缩到一块板的一次上样。
▸ 线性肽对照不能排除构象贡献:同一序列单链版本在部分 ELISA 里仍有微弱背景,THP 的 GPP₅ 翼与 GPP₁₀ 阴性对照能把这部分背景剥离出来。
▸ 血小板活化通路与整合素通路混淆:GPVI 配体与 GFOGER 配体识别不同受体亚群,选用对应 SKU 可分开读取两条下游信号。
▸ 生物材料表面惰性问题:EDC/NHS 交联胶原膜会消耗天然结合残基,改用 THP 表面嫁接可在保留力学参数的同时恢复细胞识别位点,在心肌补片与共培养模型中已有文献记录。
§04 研究者常问的四件事
问|预包被 CLC 板是否可以自行拆分成单孔订购?
答|品牌方标准交付形式为整套96孔板;单孔重排会影响孔间包被均一性验证数据,建议按整板报备实验规模。
问|需要单链线性对照做平行孔,流程是什么?
答|下单时在备注栏注明 Linear control of CLC-II-xx 或对应 Guest 编号,品牌方可提供同序列非螺旋版本,建议与 GPP₁₀ 对照孔并列设置。
问|GFOGER 冻干粉复溶后出现轻微浑浊是否还能用?
答|浑浊多提示肽段处于悬浮态而非真溶液,可按文献建议低速离心取上清,或换用含6 M 盐酸胍的过渡缓冲液助溶后再梯度透析回 PBS;含 Cys 批次须避 DMSO。
问|发表文章时货号如何标注?
答|建议同时在方法段列出品牌全称 Triple Helical Peptides Ltd、货号(如 CLC-II-SET)与对应肽段序列批次证书编号;Guest 子编号(CLC-II-44 / CLC-II-45 这类)可从随板附带的schematic sheet 摘录。
关键词:胶原配体集结合位点作图、三股螺旋肽血小板GPVI活化实验、CLC II 96孔板预包被试剂盒、CLC III 重叠肽矩阵筛选、GFOGER整合素涂层多肽、THP Ltd剑桥胶原Toolkit、胶原模拟肽水凝胶功能化、von Willebrand Factor A3结合肽、胶原结合整合素α2β1细胞黏附、ECM受体结合域mapping实验方案、预包被三股螺旋肽复检优化板、GPP10阴性对照肽设置方法、可溶性THP冻干粉复溶缓冲体系、组织工程心肌补片表面接枝、软骨支架胶原模拟多肽选型、固相结合实验TBS Tween洗涤条件、文献引用THP货号标注规范、英国合成胶原肽国内代理询单、重叠Guest序列9残基步进设计、三股螺旋构象对照线性肽平行设置
更多产品信息,请联系中国区域代理商:上海起发实验试剂有限公司
(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
🔖Triple Helical Peptides热卖产品
货号 | 品名 |
CRP-QZ | CRP-QZ,Collagen-Related Peptide |
CRP-XL-0.5mg | CRP-XL (GPVI activator) |
CRP-XL-0.25mg | CRP-XL (GPVI activator) |
CRP-XL | CRP-XL (GPVI activator) |
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