俄罗斯SibEnzyme分子生物学实验里的酶与特约代理经销商概览

前言

俄罗斯 SibEnzyme®（SibEnzyme Ltd.，简称 SE）分子酶产品由上海起发实验试剂有限公司作为特约代理经销商引进与推广，面向国内科研与生物技术实验场景提供产品信息与选型支持。

一、品牌与公司介绍

SibEnzyme Ltd. 简称 SE，商标为 SibEnzyme®，是一家专注于分子生物学与基因工程用酶研发和生产的俄罗斯生物技术企业。

品牌核心方向包括：

① 限制性内切酶  

② 位点特异性 DNA 切口酶  

③ 甲基定向 DNA 内切酶  

④ DNA 甲基转移酶  

⑤ DNA 聚合酶、连接酶及其他核酸修饰酶  

⑥ dNTP、DNA 制备物、DNA Marker  

⑦ 分子生物学缓冲液与实验试剂盒  

SE 产品目录中涵盖 200 余款酶类产品，其中限制性内切酶占据重要比重。部分酶由品牌实验室完成发现、鉴定、克隆与纯化，并形成可商业化供应的产品体系。

在实验体系设计上，SE 推出 ROSE 通用缓冲液体系，使多款限制性内切酶可在同一缓冲条件下进行双酶切反应，降低体系优化成本。Turbo 系列酶则支持较短时间的 DNA 消化，适用于快速酶切与常规克隆流程。

除常规内切酶外，SE 长期关注表观遗传研究方向，开发甲基敏感性酶及基于酶的 DNA 甲基化检测方法，为甲基化状态分析提供酶学工具。

二、热门产品介绍

01｜Pst I 限制性内切酶

▍货号  

SE-E109（常规型）  

SE-E109T（Turbo 快速酶切型）

▍品名  

Restriction Endonuclease Pst I

▍识别位点  

5′…CTGCA▼G…3′  

3′…G▲ACGTC…5′

▍产品特点  

• 来源为携带 Pst I 基因的工程大肠杆菌  

• 提供常规型与 Turbo 型两种规格  

• Turbo 型可在 10–15 分钟内完成质粒 DNA 酶切  

• 支持 SE-Buffer O 或 ROSE 通用缓冲液  

• 经过量酶切后，DNA 片段仍可保持较好连接与再切割能力  

• 每批次附带质量检测信息

▍存储条件  

保存体系：  

10 mM Tris-HCl（pH 7.5）  

200 mM NaCl  

0.1 mM EDTA  

200 μg/ml BSA  

50% 甘油  

存储温度：-20℃

▍工作原理  

Pst I 属于 II 型限制性内切酶，在 Mg²⁺ 存在条件下识别双链 DNA 中的特定序列，并于识别位点附近切断磷酸二酯键，产生明确末端。其活性依赖识别序列的完整性与反应缓冲体系中的离子环境。

▍使用方法  

以 20 μl 反应体系为例：

① 加入无菌水至体系平衡  

② 加入 10× SE-Buffer O 或 10× ROSE 缓冲液 2 μl  

③ 加入质粒 DNA 或 PCR 产物  

④ 加入 Pst I 酶液 1 μl  

⑤ 37℃ 孵育  

常规反应：1 小时  

Turbo 反应：10–15 分钟  

反应结束后可按实验需求进行终止、纯化或连接操作。

02｜HspA I 限制性内切酶

▍货号  

SE-E069（常规型）  

SE-E069T（Turbo 型）

▍品名  

Restriction Endonuclease HspA I

▍识别位点  

5′…G▼CGC…3′  

3′…CGC▲G…5′

▍产品特点  

• 识别 4 碱基序列，切点多、适用于精细图谱分析  

• 最适缓冲体系为 SE-Buffer Y  

• 在 Y 与 ROSE 缓冲液中均表现出较好活性  

• 对 CG 甲基化状态具有敏感性  

• 提供常规与 Turbo 两种产品形态  

• 过量酶切后 DNA 片段仍具备连接与再切割能力

▍存储条件  

保存体系：  

10 mM Tris-HCl（pH 7.5）  

50 mM NaCl  

0.1 mM EDTA  

200 μg/ml BSA  

50% 甘油  

存储温度：-20℃

▍工作原理  

HspA I 通过识别双链 DNA 上的 GCGC 序列，在 Mg²⁺参与下切割两条链。由于该酶对 5′ 端 CG 甲基化具有阻断敏感性，也可用于基础甲基化状态观察与酶切图谱比较。

▍使用方法  

① 配制 20–50 μl 反应体系  

② 使用 10× SE-Buffer Y 作为反应缓冲液  

③ 加入模板 DNA  

④ 加入 HspA I 酶液  

⑤ 37℃ 孵育  

常规实验可设置 1 小时反应；快速体系可使用 Turbo 型号缩短孵育时间。反应后根据下游克隆、电泳或甲基化比较实验进行相应处理。

03｜SmiM I 限制性内切酶

▍货号  

SE-E293

▍品名  

Restriction Endonuclease SmiM I

▍识别位点  

5′…CAYNN▼NNRTG…3′  

3′…GTRNN▲NNYAC…5′

其中：  

Y = C/T  

R = A/G  

N = A/C/G/T

▍产品特点  

• 识别位点包含简并碱基，适用范围较特殊  

• 来源为 Sphingobacterium mizutae M  

• 最适缓冲体系为 SE-Buffer W  

• 适用于非常规酶切位点研究与复杂基因组分析  

• 非特异性水解风险低  

• 适合对特殊识别序列有需求的研究项目

▍存储条件  

保存体系：  

10 mM Tris-HCl（pH 7.5）  

250 mM NaCl  

0.1 mM EDTA  

200 μg/ml BSA  

50% 甘油  

存储温度：-20℃

▍工作原理  

SmiM I 属于位点特异性限制性内切酶，可识别含简并碱基的双链 DNA 序列，并在识别区域附近形成双链切割。其价值在于能够处理常规酶切工具难以覆盖的序列组合，为复杂 DNA 分析提供补充手段。

▍使用方法  

① 准备洁净冰上操作环境  

② 配制反应体系：无菌水、10× SE-Buffer W、DNA 模板、SmiM I 酶液  

③ 轻轻混匀，短暂离心  

④ 37℃ 条件下孵育  

⑤ 按标准单位定义：1 单位指在 37℃、50 μl 体系中 1 小时水解 1 μg Lambda DNA  

⑥ 反应结束后进行电泳检测或后续纯化

三、SibEnzyme 产品可支持的实验场景

① 克隆与载体构建

通过 Pst I、HspA I 等限制性内切酶完成载体与外源片段酶切，用于传统限制性克隆、双酶切组装与片段回收。

② 质粒与基因组 DNA 分析

利用不同识别位点内切酶进行酶切图谱验证、质粒完整性检查、插入片段确认与基因组消化。

③ 快速酶切流程

Turbo 系列酶可在 10–15 分钟内完成质粒 DNA 消化，适合高通量初筛与快速验证实验。

④ 双酶切反应优化

ROSE 通用缓冲液可兼容多款限制性内切酶，减少双酶切时的缓冲体系冲突。

⑤ 表观遗传与甲基化研究

甲基敏感性内切酶可用于观察 DNA 甲基化对酶切效率的影响，辅助甲基化状态比较分析。

⑥ dNTP 与核酸制备

酶促 dNTP、DNA Marker、质粒与噬菌体 DNA 等产品可配套用于 PCR、测序前处理、核酸电泳及分子检测。

⑦ 核酸修饰酶实验

聚合酶、连接酶、甲基转移酶、切口酶等产品可服务于建库、标记、连接、修饰与体外酶学反应。

四、采购与使用中常见问题

Q1：SibEnzyme 产品是否适合日常分子克隆？  

适合。其限制性内切酶、缓冲液与 Turbo 快速酶切体系可覆盖常规质粒切割、载体预处理与片段释放等基础流程。

Q2：Turbo 酶和普通酶有什么区别？  

Turbo 酶支持更短孵育时间，通常 10–15 分钟即可完成质粒 DNA 消化；普通酶更适合长时间标准反应或对反应条件有特殊要求的项目。

Q3：双酶切时缓冲液怎么选择？  

可优先查看产品对应的缓冲液活性信息。SE 提供 ROSE 通用缓冲液，多款酶在该体系中可保持可用活性，便于双酶切设计。

Q4：内切酶使用后是否需要热失活？  

不同酶热失活条件不同。例如 Pst I 在 65℃ 20 分钟条件下不能全失活，而部分酶可在 80℃ 20 分钟条件下处理。具体以对应产品参数为准。

Q5：酶切后出现星号活性或非特异条带怎么办？  

可检查甘油比例、酶用量、孵育时间、缓冲液体系与 DNA 纯度。高酶量或长时间孵育可能增加非特异切割风险。

Q6：HspA I 的甲基化敏感性有什么意义？  

HspA I 对特定 CG 甲基化状态敏感，可用于比较同序列在不同甲基化背景下的酶切差异，但不等同于完整甲基化测序。

Q7：SmiM I 识别位点含简并碱基，实验结果是否稳定？  

在合适缓冲体系与模板条件下可保持稳定切割。因其识别序列较特殊，建议先以小体系预实验确认切割效率。

Q8：产品到手后如何确认质量？  

可结合说明书中的单位定义、识别位点、缓冲液活性、连接恢复能力与核酸污染控制指标进行验收。

Q9：酶类试剂运输和保存需要注意什么？  

低温避光保存，避免反复冻融。取用过程尽量在冰上进行，防止甘油体系温度变化影响酶活性。

Q10：如何判断该选哪款限制性内切酶？  

依据识别位点、载体多克隆位点、片段末端类型、双酶切兼容性、甲基化敏感性与实验周期综合判断。

五、产品选型简要对照

▍Pst I｜SE-E109 / SE-E109T  

适用：常规克隆、载体切割、快速酶切  

特点：有 Turbo 版本，识别位点清晰，双酶切兼容性好

▍HspA I｜SE-E069 / SE-E069T  

适用：精细酶切图谱、甲基化敏感分析  

特点：4 碱基识别，切割频率高，可观察甲基化影响

▍SmiM I｜SE-E293  

适用：特殊识别序列、复杂序列分析  

特点：简并碱基识别，适合非常规酶切设计

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更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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