ICT／ImmunoChemistry Technologies：活细胞分析试剂及特约代理经销商指南

前言

美国 ImmunoChemistry Technologies（简称 ICT，标识 ICT）现由上海起发实验试剂有限公司作为特约代理经销商引进与推广，面向国内科研用户供应细胞检测与免疫分析试剂。

一、品牌与公司介绍

ImmunoChemistry Technologies（ICT）是一家专注于蛋白质化学、细胞功能分析与免疫检测试剂研发的生物技术企业。品牌长期围绕细胞活力、细胞死亡、酶活性、氧化应激、ELISA 开发与组织化学检测构建产品体系。

ICT 的技术起点来自免疫分析开发服务与 ELISA 试剂优化经验。在长期服务科研项目的过程中，团队将包被、封闭、稀释、稳定与终止等环节中常用的缓冲体系标准化，形成可独立使用的试剂产品。随后，品牌进一步开发了适用于完整活细胞的荧光检测工具，用于观察细胞内部的蛋白酶活性、线粒体状态、自噬过程与毒性反应。

品牌旗下较有辨识度的技术平台包括 FLICA、Magic Red、MitoPT、FLISP 等。它们共同的特点是：不依赖细胞裂解或抗体结合，而是利用可进入活细胞的荧光底物或抑制剂探针，直接标记特定活性分子。

ICT 同时提供免疫组化复染、封片剂、抗体偶联与纯化相关试剂，并为 ELISA 开发提供从包被到终止的全流程耗材与缓冲液。其产品主要服务于细胞生物学、药理毒理、肿瘤研究、免疫学、分子诊断开发及药物筛选等方向。

二、热门产品介绍

01｜FAM-FLICA Caspase-3/7 Assay Kit

货号：ICT-93（25 tests）／ ICT-94（100 tests）

▍品名  

FAM-FLICA Caspase-3/7 绿色荧光检测试剂盒

▍产品特点  

• 使用细胞渗透性荧光探针 FAM-DEVD-FMK  

• 可标记活细胞中活化的 caspase-3 与 caspase-7  

• 适用于荧光显微镜、流式细胞仪与荧光酶标仪  

• 无需细胞裂解，可在完整细胞中进行活性检测  

• 绿色荧光信号与酶活性水平具有对应关系

▍存储条件  

未开封探针组分建议避光、低温保存，具体以随货说明书标注温度与有效期为准；复溶后避免反复冻融，并避光使用。

▍工作原理  

Caspase-3 与 caspase-7 是凋亡执行阶段的重要效应蛋白酶。ICT 将优选亲和肽序列 DEVD、绿色荧光染料 FAM 与氟甲基酮反应基团 FMK 连接，构成细胞渗透性探针。

探针进入活细胞后，若细胞内存在活化状态的 caspase-3/7，FMK 会与酶的活性半胱氨酸位点共价结合，使荧光信号保留在细胞内。未结合探针可被洗去，因此荧光强度可反映目标酶的实时活性水平，而非总蛋白表达量。

▍使用方法  

1. 按实验设计处理细胞，并设立空白与诱导凋亡对照组。  

2. 取适量 FAM-DEVD-FMK 探针加入细胞培养体系，轻轻混匀。  

3. 在适宜温度下孵育规定时间，使探针进入细胞并结合活性酶。  

4. 使用配套洗涤缓冲液清洗未结合探针。  

5. 直接进行流式分析，或在荧光显微镜下观察。  

6. 绿色荧光激发约 488–492 nm，发射约 515–535 nm。

02｜Magic Red Cathepsin B Assay Kit

货号：ICT-937

▍品名  

Magic Red 组织蛋白酶 B 活性检测试剂盒

▍产品特点  

• 基于细胞渗透性红光探针 MR-(RR)₂  

• 可在活细胞内实时观察组织蛋白酶 B 活性  

• 适用于荧光显微镜与流式细胞分析  

• 无需细胞通透或裂解步骤  

• 可结合核染色与溶酶体染色观察细胞结构变化

▍存储条件  

试剂盒各组分应按说明书要求避光保存，探针类组分低温存放，避免反复冻融与长时间暴露于光照环境。

▍工作原理  

组织蛋白酶 B 是溶酶体中的半胱氨酸蛋白酶，参与蛋白降解、自噬调控及细胞死亡过程。Magic Red 探针可穿透细胞膜与细胞器膜，进入活细胞内部。

当探针遇到具有活性的组织蛋白酶 B 时，底物被切割，封闭荧光基团释放，产生红色荧光信号。酶活性越强，信号积累越明显，因此可用于比较不同处理条件下细胞内蛋白酶活性变化。

▍使用方法  

1. 将培养好的贴壁或悬浮细胞进行实验分组处理。  

2. 按比例加入 Magic Red 探针，使其均匀接触细胞。  

3. 在培养条件下孵育，使探针进入细胞并被活性酶切割。  

4. 按流程洗涤背景探针。  

5. 如需结构定位，可结合 Hoechst 33342 或吖啶橙辅助观察。  

6. 使用荧光显微镜或流式细胞仪检测，探针相关激发约 560 nm，发射约 610–650 nm。

03｜Basic Calcein AM Cell Viability Kit

货号：ICT-9153

▍品名  

Basic Calcein AM 细胞活力检测试剂盒

▍产品特点  

• 可同时区分活细胞与死细胞  

• Calcein AM 进入活细胞后由酯酶转化产生荧光  

• 操作简便，部分场景下无需复杂洗涤  

• 适配流式细胞仪、荧光酶标仪与荧光显微镜  

• 试剂盒含 Hoechst 33342，可同步进行核染色

▍存储条件  

• 未开封 Calcein AM 组分：≤ -20℃，避光保存至有效期  

• 其余未开封组分：2–8℃保存  

• Calcein AM 经 DMSO 复溶后建议尽快使用；若分装保存，可 ≤ -20℃避光存放，避免反复冻融

▍工作原理  

Calcein AM 本身是非极性、非荧光分子，可自由穿过细胞膜。活细胞内的活性酯酶会水解乙酰氧基甲酯基团，释放出具有极性的 Calcein 荧光分子。

Calcein 不易穿出完整细胞膜，因此会在活细胞内积累并发出绿色荧光。死细胞缺乏足够活跃的酯酶，不能完成这一转化，荧光信号较弱。通过荧光强度，可以评估样本中相对活细胞比例与细胞状态。

▍使用方法  

1. 将待测细胞制备为适宜浓度悬液或贴壁培养体系。  

2. 按说明加入 Calcein AM 工作液，轻轻混匀。  

3. 在 37℃条件下短期孵育，使活细胞完成探针转化。  

4. 如需核定位，可加入 Hoechst 33342 进行复染。  

5. 使用流式细胞仪、荧光酶标仪或显微镜检测。  

6. Calcein 最佳激发约 494 nm，发射约 517 nm；Hoechst 33342 可用紫外激发观察。

三、品牌业务可以解决实验中的哪些问题

① 凋亡研究中只测蛋白表达，难以判断 caspase 是否真正活化  

FLICA 系列通过活性位点结合，直接反映 caspase-1、3/7、8、9 等酶的实时功能状态。

② 传统蛋白酶检测需要裂解细胞，丢失空间与群体信息  

ICT 全细胞探针可进入活细胞，保留细胞完整性，同时支持流式分群与成像定位。

③ 细胞死亡类型难以区分  

品牌提供凋亡、坏死、焦亡、自噬与线粒体膜电位相关检测工具，便于多维度比较。

④ 活力检测背景高、死活分界不清  

Calcein AM 类试剂依靠活细胞酯酶活性产生信号，可与核染结合，提升活死区分辨度。

⑤ ELISA 自建项目稳定性不足  

ICT 提供包被液、洗涤液、封闭液、稀释液、稳定剂与终止液，帮助优化板间重复性与信号背景。

⑥ 组织化学染色对比不足  

Hoechst、封片剂与复染类试剂可配合免疫荧光或 IHC 流程使用。

⑦ 药物筛选中需要高通量、低破坏检测  

荧光探针可在不破坏细胞结构的前提下连续观察酶活性变化，适合处理梯度筛选。

四、采购与使用时常见疑问

Q1：ICT 试剂盒是否适用于贴壁细胞和悬浮细胞？  

多数全细胞荧光试剂盒可用于两类细胞，但具体洗涤与离心条件应根据细胞类型调整。

Q2：FLICA 检测的是蛋白含量还是酶活性？  

主要检测活性酶。它与已活化并执行剪切功能的 caspase 结合，不等同于 Western Blot 的总蛋白定量。

Q3：探针荧光颜色如何选？  

可根据仪器滤光片配置选择。Caspase-3/7 常用绿色 FAM 通道；多色实验需提前规划补偿与通道冲突。

Q4：Magic Red 能否定量？  

可以用于相对定量。通过流式或酶标仪获取信号强度，但需设置相同细胞密度与处理时间。

Q5：Calcein AM 染色后是否需要洗涤？  

基础活力检测中部分体系可不洗；若背景较高，可按说明书进行温和洗涤。

Q6：试剂盒能否用于临床诊断？  

ICT 科研试剂通常标注“仅供科学研究使用"，不用于诊断程序。

Q7：存储温度不一致怎么办？  

不同组分可能分设冷冻与冷藏条件，应以具体批次说明书为准，避免统一放置导致试剂失效。

Q8：产品到货后如何验收？  

建议检查包装完整性、避光状态、组分清单、批号、有效期与运输温度记录。

Q9：能否与其他品牌缓冲液混用？  

可以，但使用建议按原厂体系建立基线，再逐步替换缓冲液验证兼容性。

Q10：实验无信号可能是什么原因？  

可能与探针未充分复溶、细胞活性过低、孵育时间不足、通道设置错误或洗涤过度有关，建议先做阳性对照。

Q11：如何选择测试规格？  

预实验可选择小规格；建立稳定流程后，再按样本量采购大规格，降低单次成本。

Q12：试剂是否含抗体？  

部分 FLICA 与 Magic Red 产品不依赖抗体识别，而是基于酶底物或抑制剂探针；ELISA 相关产品则涉及免疫试剂体系。

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更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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