▍前言
上海媛禧生物携手Novo-light品牌,由上海起发实验试剂有限公司作为授权代理商,面向科研实验室提供多重荧光免疫组化、抗原修复、抗体洗脱及信号放大试剂。本推文仅作产品技术说明与采购答疑,所有货号、组件与存储要求均按公开产品资料整理。
📌 下图为上海起发实验试剂有限公司作为上海媛禧生物Novo-light授权代理商的授权书

一、品牌与公司业务概况
「上海媛禧生物」围绕Novo-light品牌构建组织水平生物标记物检测体系,业务覆盖组织多重荧光免疫组化染色、肿瘤微环境分析、组织芯片构建、定量病理读图与技术培训。品牌方向不局限于单指标染色,而是将一抗孵育、HRP二抗、酪胺信号放大、荧光染料沉积、抗体洗脱与再循环、数字图像定量串成完整流程。
Novo-light产品线主要服务以下场景:
01 科研课题中的组织蛋白共定位与细胞亚群计数
02 抗肿瘤药物评价中的肿瘤微环境浸润分析
03 人源或鼠源石蜡切片、冰冻切片、TMA芯片的多重标记
04 常规IHC背景优化、抗原修复、荧光封片与信号增强
05 CRO或医院科研平台的批量染色标准化
品牌不提供临床诊断判定,相关试剂标注仅作科研实验使用。
二、Novo-light热门产品介绍
2.1 Novo-light 4色多重荧光免疫组化染色试剂盒
★ 品名与货号
品名:Novo-Light TSA 4色多重荧光免疫组化染色试剂盒
人源样本货号:H-D110041-20T、H-D110041-50T、H-D110041-100T
鼠源样本货号:M-D110041-20T、M-D110041-50T、M-D110041-100T
★ 主要组件
按公开说明书, kit包含TSA荧光母液、信号放大反应液、Polymer HRP标记二抗、DAPI母液、抗荧光淬灭封片剂等。常见配套单品货号可供分别采购:
TSA 520 100×母液:D110011
TSA 570 100×母液:D110013
TSA 670 100×母液:D110016
信号放大反应液:A10014
Polymer HRP羊抗兔二抗:A10012
Polymer HRP羊抗鼠兔通用二抗:A10011
DAPI 100×母液:A11008-100
抗荧光淬灭封片剂:A11009-5
★ 产品特点
01 采用TSA酪胺信号放大,可在同一张FFPE切片上依次完成多轮一抗、二抗、荧光沉积。
02 人源与鼠源分别配货,减少种属交叉干扰。
03 荧光母液为浓缩形式,可按组织表达强度与显微镜通道调整稀释比例。
04 配套HRP聚合物二抗,省去生物素—亲和素系统时的内源性生物素处理步骤。
05 提供20T、50T、100T规格,适配小样预实验、课题主实验与批量TMA扫描。
★ 存储条件
试剂盒整体建议2~8℃存储,荧光染料母液避光保存;DAPI母液按对应单品说明低温保存;封片剂与二抗避免反复冻融。使用前检查母液颜色、沉淀与有效期,过期或污染组件不用于正式实验。
★ 工作原理
第一轮一抗结合目标抗原后,加入HRP标记二抗;二抗HRP催化对应TSA荧光底物,生成活化酪胺中间体,活化物与抗原附近酪氨酸残基共价沉积,形成稳定荧光信号。随后通过热修复或专用洗脱步骤去除非共价结合的一抗/二抗,保留共价荧光;再换下一株一抗进入第二轮,选用不同发射波长的TSA,最终实现多色同片。4色方案通常选取520、570、670等通道组合,并以DAPI标记核DNA。
★ 使用方法
01 切片预处理:人源或鼠源FFPE切片按4μm左右防脱片制作,脱蜡至水;冰冻切片固定后直接进行阻断与修复。
02 抗原修复:根据一抗表位要求选用pH6.0或pH9.0修复液,微波、蒸汽或水浴热修复,自然冷却后PBS洗涤。
03 封闭:用Novo-light封闭液/抗体稀释液或实验验证过的封闭液处理,减少非特异性吸附。
04 第一轮一抗:按验证浓度稀释,湿盒孵育,PBS充分洗涤。
05 二抗与信号放大:加入Polymer HRP二抗,洗涤后按1∶100等比例用信号放大反应液稀释TSA荧光母液,现配现用,避光孵育。
06 洗涤与成像准备:PBS洗涤去除游离染料;若仅4色单次规划,可DAPI复染、抗淬灭封片后扫描。
07 若继续加色:采用抗体洗脱液去除非共价抗体,再进行下一轮一抗—HRP—不同波长TSA,最终合并多通道图像。
具体修复温度、一抗浓度、TSA孵育时间以目标抗体验证结果和批次说明书为准。
2.2 Novo-light信号放大反应液
★ 品名与货号
品名:Novo-light信号放大反应液
货号:A10014
规格:60mL
货期信息以授权代理发货通知为准。
★ 产品特点
01 用于TSA多重荧光染色中荧光染料母液的稀释与反应体系配制。
02 与Novo-light各波长TSA母液配套,减少染料聚集与非特异沉积。
03 单瓶60mL可支持多张切片的梯度稀释与工艺优化。
04 适用于人源或鼠源石蜡切片、冰冻切片、TMA芯片的多重荧光IHC。
★ 存储条件
按公开产品页建议2~8℃存储,避免高温与强光直射;开封后按无菌操作取用,防止微生物污染。若液体出现浑浊、异味或沉淀异常,停止用于正式实验。
★ 工作原理
信号放大反应液为TSA底物提供稳定稀释与反应环境。HRP标记二抗结合一抗后,催化荧光酪胺底物,活化肥料与组织抗原周边酪氨酸形成共价沉积;反应液配比直接影响荧光强度、背景与通道分离度。通过调节染料母液与信号放大液比例,可适配弱表达抗原与高背景组织。
★ 使用方法
01 按实验设计取信号放大反应液作为稀释基质。公开说明建议可用1∶100至1∶200区间稀释TSA染料制备工作液,现配现用。
02 每轮荧光前新鲜配制所需通道工作液,避光保存,尽量缩短室温放置时间。
03 加入已结合HRP二抗的切片,按验证时间孵育,后用PBS或TBST充分洗涤。
04 多轮实验在抗体洗脱后更换新通道工作液,避免不同波长交叉残留。
实际稀释比应结合一抗信号强度、组织类型、 scanner通道与历史验证数据调整。
2.3 Novo-light抗体洗脱液
★ 品名与货号
品名:Novo-light抗体洗脱液
货号:A10020-30
规格:30mL
参考用量:按每张片每次150μL、一轮染色洗两次估算,30mL可供约100次抗体洗脱。
★ 产品特点
01 用于TSA多重染色轮间去除非共价结合一抗、二抗,保留已共价沉积荧光。
02 适用于石蜡切片、冰冻切片、骨组织切片、细胞爬片。
03 即用型设计,无需自行配制复杂洗脱缓冲。
04 可与Novo-light 4色、5色、6色、7色试剂盒配套,用于扩展更多循环。
★ 存储条件
2~8℃存储,避免冷冻与长期室温放置;开封后保持瓶口清洁,防止缓冲成分污染。过期产品不用于珍贵样本。
★ 工作原理
TSA第一轮荧光通过酪胺—酪氨酸共价结合保留;非共价结合的一抗、HRP二抗需通过热处理或化学洗脱去除,否则会占用后续一抗结合位点或产生串色。抗体洗脱液在设定温度下破坏抗体蛋白与抗原的非共价相互作用,使旧抗体脱落,而共价荧光信号基本保留,从而允许同一张切片进入下一轮新一抗孵育。
★ 使用方法
01 第一轮荧光洗涤完成后,将切片放入预热至规定温度的抗体洗脱液中。
02 按组织厚度、一抗种类与目标信号保留率设定洗脱时间;难洗脱结构性蛋白如E-cadherin、Tuj1等可提高温度或延长时间,公开资料示例可到50℃或60min,但需先做小样验证。
03 洗脱结束用PBS充分洗涤,检查上轮荧光是否保留、背景是否干净。
04 进入下一轮一抗、HRP二抗、新波长TSA。骨组织或细胞爬片可参照同类参数做梯度预实验。
三、Novo-light试剂可解决的实验问题
01 单标IHC信息不足:传统单染一次观察一个蛋白,多重荧光可在同片同时读取多个标志物,用于免疫浸润、表型共表达与空间分布统计。
02 抗原表位被福尔马林交联遮蔽:配套抗原修复液改善蛋白交联导致的弱信号,降低假阴性。
03 荧光信号弱:TSA把每个HRP位点催化沉积多个荧光分子,较直接荧光二抗更适合低丰度蛋白。
04 多轮染色残留:抗体洗脱液去除旧一抗/二抗,减少串色与双重结合造成的误判。
05 背景偏高:信号放大液合理稀释、HRP聚合物二抗无生物素系统、封闭液与洗涤优化共同降低非特异荧光。
06 荧光衰减快:抗荧光淬灭封片剂配合避光存储与尽快扫描,延缓DAPI及TSA通道褪色。
07 TMA批量不一致:统一kit货号、固定修复—封闭—TSA—洗脱参数,有利于多芯点结果可比。
08 人鼠样本混用混乱:4色kit按H-/M-货号区分,减少种属二抗选择错误。
四、采购Novo-light产品常见疑问与解答
Q1:上海起发实验试剂有限公司作为授权代理商,能提供哪些支持?
A1:可提供Novo-light货号核对、规格建议、库存与货期沟通、配套单品清单整理、批次说明书参数解释。技术判断仍以实验样本、一抗验证与媛禧产品说明书为准。
Q2:做4色应该买人源还是鼠源货号?
A2:人源组织选H-D110041各规格,小鼠模型选M-D110041各规格;若同时做人鼠混合项目,分别备货,不混用种属二抗体系。
Q3:TSA母液可单独补货吗?
A3:可单独采购D110011、D110013、D110016等对应波长母液,也可按需补A10014信号放大液、A11008-100 DAPI、A11009-5封片剂。补货时提供原kit货号便于核对批次兼容。
Q4:信号放大反应液稀释比如何定?
A4:公开建议1∶100至1∶200配制TSA工作液;弱表达、厚切片、低丰度标志物可先做1∶100,强表达或高背景组织可尝试更高稀释。所有比例需小样验证。
Q5:抗体洗脱会不会把已染荧光洗掉?
A5:TSA荧光通过酪胺与酪氨酸共价沉积,规范洗脱主要去除非共价抗体;但不同波长、组织固定程度、洗脱温度时间会影响保留率。新组织先做2—3轮小样再扩大。
Q6:抗原修复液怎么选?
A6:酸性表位可核对Novo-light pH6.0抗原修复液,其他表位按一抗说明书选pH9.0或供应商建议;货号A11006-100为pH6.0 100×浓缩示例,使用按1份原液加99份水配工作液。
Q7:产品能否用于临床诊断?
A7:Novo-light相关染色kit、洗脱液、信号放大液均标注科研实验使用,不用于临床诊疗、体外诊断报告或治疗决策。
Q8:冰冻切片和石蜡切片都适用吗?
A8:4色kit、信号放大液、洗脱液资料均覆盖人源/鼠源石蜡与冰冻切片;骨组织、细胞爬片可用洗脱液,但需根据固定方式优化修复与渗透步骤。
Q9:HRP二抗选A10011还是A10012?
A9:A10012为羊抗兔Polymer HRP;A10011为羊抗鼠/兔通用型Polymer HRP。单兔一抗可用A10012,鼠兔混合或多克隆方案按一抗种属选A10011。
Q10:收到试剂后存储有什么注意?
A10:整体2~8℃避光;荧光母液、DAPI、封片剂按单品标签避光低温;二抗不冻融、不分装频繁转管;定期记录开封日期与批号。
Q11:多色超过4色如何扩展?
A11:可采购5色D110051、6色D110061、7色D110071等Novo-light套件,配合A10020-30洗脱液、A10014放大液按通道规划轮流上样;通道组合需与显微镜滤片或光谱扫描仪匹配。
Q12:实验结果背景高如何处理?
A12:依次核查一抗浓度、封闭时间、修复强度、TSA稀释比、二抗孵育时长与洗涤次数;用阴性对照、同型对照和空白TSA对照定位问题环节。
Q13:TMA芯片能用这些产品吗?
A13:4色kit、信号放大液、洗脱液均适用于TMA芯片;建议先挑3—5个代表性芯点做条件优化,再全片运行,避免整张芯片参数偏差。
Q14:货号版本更新如何确认?
A14:以订单确认货号、产品页说明书与到货标签为准;H-/M-前缀表示人/鼠,D1开头多为kit或母液,A1开头多为缓冲液、二抗、洗脱、封片等配套。
Q15:没有多重经验,直接买4色kit能做完吗?
A15:可完成基础4通道;若建立方法,建议先以1—2个已知阳性标志物做单轮TSA,再逐步加入洗脱与多轮流程,减少试剂损耗。
五、Novo-light实验配置建议
★ 基础单轮强信号方案:一抗+A10012/A10011+单色TSA+A11008-100 DAPI+A11009-5封片。
★ 4色同片方案:H-D110041或M-D110041为主kit,按520/570/670/DAPI规划,缺乏某母液用D110011/D110013/D110016补货。
★ 5色以上扩展方案:主kit之外配A10020-30洗脱液、A10014信号放大液,每轮换一抗与波长,最后统一封片扫描。
★ 高背景组织方案:优化抗原修复液浓度与温度,降低TSA工作液浓度,增加PBS洗涤次数,设置同批阴性对照。
关键词:Novo-light多重荧光免疫组化、上海媛禧生物试剂、H-D110041试剂盒、M-D110041小鼠染色、A10014信号放大液、A10020-30抗体洗脱液、D110011 TSA520母液、D110013 TSA570母液、D110016 TSA670母液、A10012 HRP羊抗兔二抗、A10011 HRP羊抗鼠兔二抗、A11008-100 DAPI母液、A11009-5抗荧光淬灭封片、A11006-100抗原修复液、TSA酪胺信号放大、FFPE切片多重染色、TMA芯片荧光IHC、肿瘤微环境生物标记物、上海起发Novo-light授权代理、科研免疫组化试剂采购
更多产品信息,请联系中国区域代理商:上海起发实验试剂有限公司
(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
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货号 | 品名 | 规格 |
M-D110061-100T | Novo-Light ®6色多重荧光免疫组化试剂盒 | 100T |
D110014-100uL | Novo-Light®TSA 荧光染料,TSA 620 | 100uL |
H-D110061-100T | Novo-Light ®6色多重荧光免疫组化试剂盒 | 100T |
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