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Visual Protein特约代理

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上海起发实验试剂有限公司 Visual Protein 专业代理,具体产品信息欢迎电询:4006551678
  Visual Protein特约代理的详细资料:

世界*实验材料供应商 Visual Protein 正式授权上海起发为其中国代理, Visual Protein 在一直是行业的标杆,一直为广大科研客户提供zui为优质的产品和服务,上海起发一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务,签约 Visual Protein 就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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蛋白染色只要五分钟!

目标蛋白可直接取出做质谱分析

 

VisPROTM 蛋白负染色试剂盒为imidazole-zinc 负染色剂剂,能在5分钟内完成染色步骤,灵敏度高达 1 ng,并可相容于质谱仪分析及各种下游实验。

连结:http://www.visualprotein。。com/vispro/index.php/proteomics/vispro-5-minutes-protein-stain-kit

一、产品特点:

1. 简单且快速:染色过程只需5分钟即可或得结果,不需要醋酸固定
2. 超高灵敏度:可达到 1ng 以下,优于SYPRO Ruby、银染法与CBB染色
3. 高应用性:染色过后可进行蛋白质转渍或、电泳溶离、质谱仪蛋白质鉴定与转译后修饰分析
4. 安全且容易操作:染液不具毒性且可室温储存

二、技术原理:
一般蛋白质染剂为正染色法,藉由染剂分子和蛋白质结合而达到观察蛋白质染色效果,换言之,有颜色的区域则代表是有蛋白质的存在的地方;VisPROTM 蛋白负染色试剂盒跟正染色方式不同,为负染色法,其中溶液I 为 Imidazole 溶液,溶液II为锌离子溶液。胶体先浸泡溶液I,Imidazole 会充满在整个胶片,而蛋白质处因空间已被占据,所以 Imidazole 无法进入。随后加入溶液II,锌离子与与胶体内的 Imidazole 结合形成白色沉淀,蛋白质位置因无白色沉淀而呈现透明。


图1:正染色与负染色法示意图



图2:VisPRO 蛋白质负染色试剂与其他染色法操作时间比较图


三、使用方法:

1. 电泳完成后,将胶体小心放入黑色染盒,加入Solution I 直到胶体完全被覆盖。
2. 将染盒置于震荡摆动机,并使Solution I 和胶体作用 5 分钟。
3. 倒掉 Solution I,加入 ddH2O 润洗胶体,移除多余液体。
4. 于胶体周围加入Solution II,并以手快速且大力的摇动染盒使染剂均匀分布,20-40 秒之内将出现呈色影像 (蛋白质位置为透明,其余胶体位置为白色)。
5. 当胶体染色完毕,倒掉 Solution II,使用 ddH2O 润洗胶体两次将终止反应。
6. 使用 Gel Lighting Plate 可得到更好的观察效果,或是利用穿透式扫瞄机得到zui佳的影像。

图3:VisPRO 蛋白质负染色试剂操作步骤图


四、实验结果图:


图4:VisPRO 蛋白质负染色试剂与其他染剂的灵敏度比较,显示 VisPRO 染剂聚有较佳的染色灵敏度


五、Q&A:
Q1: 请问经由 VisPRO 染色后的胶体,若想将蛋白质取出进行质谱分析,后续操作步骤为何?
A1: VisPRO染色后的胶体可直接取下使用,简要步骤如下:(1) 用 ddH2O 清洗二维电泳胶体两次,每次 10 分钟。(2) 将 Blue tip 前端用剪刀剪下约 1 mm,接着垂直对准在二维电泳胶体待取下的点。(3) 接着按压 Blue tip 后轻轻旋转,并确定胶体块已被切下。(4) 把 Blue tip 倒插在 1.5 mL 离心管 (需可耐有机溶剂) 中,以离心管底端轻搞桌面,使胶体块掉落在离心管中。(5) 加入 1mL 10% 醋酸溶液到 eppendorf,摇晃 30 分钟达到胶体染色还原和蛋白质固定效果。后续步骤可参考各质谱设备厂商的建议步骤。
 
Q2: 请问VisPRO染色后的胶体,可以进行蛋白质转印与后续Western blotting 实验吗?
A2: 可以。VisPRO 染色后的胶体,以 Native  电泳缓冲液润洗两次,*次摇晃润洗 5 分钟,第二次摇晃润洗 10 分钟。后续步骤请参照转印设备厂商的建议步骤。
 
Q3: 请问 VisPRO 染色后的胶体,也可以进行蛋白质溶离实验吗?
A3: 可以。VisPRO 染剂不会结合蛋白质,相当适合进行蛋白质溶离实验进行蛋白质纯化。简要步骤如下:(1) 使用解剖刀将含有蛋白质胶体切下,并将胶体切0.5cm X0.5cm 大小左右。(2) 将切割完成胶体放置在 eppendorf 内,加入 1mL 冰的电泳溶离液震荡 5 分钟进行退染,移除胶体内的染剂。(3) 倒掉电泳溶离液,再加入 1mL 冰的电泳溶离液震荡 5 分钟。(4) 倒掉电泳溶离液,将胶体取至电泳溶离槽,设定电流等 10mA,分别在 2 小时、4 小时、6 小时、24 小时分别收集 0.2mL 电泳溶离液即可。

 

我们公司zui大优势是强大的采购,

1:基本什么都能进口,血清,抗体,耗材,还有部分限制进口的,

2:货品全,现经营过700多个品牌,基本所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷偏的产品那就更有优势,

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6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc, Visual Protein ,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. Dako,Inc, GePromegaridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,Visual Protein , Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,FULLERLABS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司授权代理。
7:我们还是invitrogen,qiagen,Visual Protein am,sigma;Promega,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名大品牌批发,欢迎合作。

 

上海起发实验试剂有限公司

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