【Abcam实验支持】如何确定 ELISA 检测范围？

ELISA 的动态范围是指试剂盒能够准确测定的抗原浓度范围。 

阅读下文，详细了解如何确定动态范围以及如何解读不同样本类型下的动态范围。

如何计算动态范围？

动态范围可以通过绘制抗原浓度与检测信号之间关系的标准曲线来确定。

准确且符合动态范围的检测必须满足以下条件：

●标准品平行试样之间的标准偏差较低

●抗原浓度与检测信号之间的相关性较强

我们的 ELISA 试剂盒说明书和实验方案通常会详细说明实验样本的动态检测范围，该动态范围已经通过检测进行准确测定。 这些动态范围通常有两种表示方式：被测蛋白的浓度或稀释度（后者更常见于血浆或血清等样本）。

当动态范围以浓度表示时，该如何解释？

Abcam 的人 Frataxin ELISA 试剂盒 (ab176112) 的实验方案包含一份表格，其中列出了预计位于动态范围内的各种细胞系裂解物的总蛋白浓度范围。 测试时，这些浓度都在标准曲线的线性范围内。

对于 HeLa 细胞裂解液：

●在动态范围的下限，ELISA 可以准确检测的总共济蛋白浓度为 0.5 µg/mL

●在动态范围的上限，ELISA 可以准确检测的总共济蛋白浓度为 100 µg/mL

●因此，动态范围表示为 0.5 – 100 µg/mL

当动态范围以稀释度或百分比表示时，该如何确定检测范围？

其他样本类型（如血清和血浆）的浓度动态范围通常以稀释度（分数或百分比）表示。

以 Abcam 肿瘤坏死因子 (TNF) α ELISA 试剂盒为例 (ab208348)。 该试剂盒实验方案中包含一份检测范围内血浆样本的稀释倍数推荐表。

对于肝素血浆：

在动态范围的下限，ELISA 试剂盒可以准确检测稀释度为 1/16（6.25/100，或 6.25%）的蛋白质。

在动态范围的上限，ELISA 试剂盒可以准确检测未稀释血浆中的蛋白质（100/100 =1，或 100%）

因此，动态范围表示为 6.25 – 100%

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